生化基础知识简介(李丽媛).ppt

生化基础知识简介,新成生物市场部,目录,朗伯比尔定律仪器试剂试剂评价校准品量值溯源交叉污染,朗伯比尔定律,当光线通过均匀而透明的溶液时，一部分被散射或反射，一部分被吸收，只有一部分被透射，透射光与入射光之比，称作透光度（T）透光度的负对数称为吸光度（A）朗伯比尔定律是描述溶液对光吸收的定律，表达式为：A=KLC其中A为吸光度，L为溶液液层厚度或光径（以cm为单位），C为吸光物质的浓度（通常以g/L 或mg/L 为单位），K为吸光度系数。当液层厚度L以cm为单位，浓度C以mol/L为单位，则吸光系数K常改用摩尔吸光系数表示，其单位为Lmol-1cm-1在给定条件（入射光波长、溶液的性质和温度等）下，摩尔吸光系数是物质的特征性常数，通过测定已知浓度的溶液的吸光度，可求得值，再通过测定另一部分同种物质的吸光度即可计算另一部分的浓度。,朗伯比尔定律,临床生化检验是一个比对科学，所有的样本均是与校准品比较后得出结果。,临床生化检验是一个完整的检测系统：由仪器、试剂、校准、质控品组成。,仪器的发展,581/721比色计半自动生化仪连续流动式生化分析仪：采用“气泡隔离连续分析”原理，由半自动生化分析仪发展而来 离心式生化分析仪：采用离心机的原理，来完成混合、反应、测定的工作分离式生化分析仪：模仿手工操作，有单通道和多通道之分，也有大中小型仪器之分，是生化分析仪中应用数量最大的一种机型。模块式：能提供多种组件，有多种配置方式，从而满足不同的要求。此机型已不是一台仪器，而是一套小型的实验室自动化系统,仪器的发展,仪器的发展,速度（T/H）：指每小时能报告多少个检测结果。从每小时100T/H到几千T/H，到模块组合无限扩展,常见生化仪器提供商,进口：日立、罗氏、贝克曼、欧林巴斯、东芝、西门子（拜耳）、雅培、希森美康国产：迈瑞、迪瑞、科华、丰汇等,全自动生化仪器厂家及型号-国际,HITACHI：7600系列/7180/7170/7100/7080/7060/7020；Labspect003/008ROCHE：MODULAR D/P、COBAS Integra800/400/311贝克曼：DXC800/DXC600/LX20/CX9/7/5/4/3（封闭、开放通道）OLYMPUS：AU5400/2700/680/640/600/400（目前其生化已被贝克曼收购）TOSHIBA：TBA-200/120/40FR Simen-Bayer：ADVIA 2400/1650/1200ABBOTT：Aeroset C8000/2000 SYSMEX：Chemix 800/180SHIMADZU：CL-8000/7300/7200DADE-Behtingcp:Dimension AR/RxLVITALAB:selectra-XL/E欧宝力霸蓝宝石XL-300600;魅力18002000;SABA18;Bio-systems:A25/A15,全自动生化仪器厂家及型号-国内,深圳迈瑞：BS-1600/800/400/300/200/120长春迪瑞：CS-1600/800/600/400/300/240沈阳东软:NSA-270/400/800赛诺迈德：SUNOAB-3024/1020科华卓越：350/400北京松上：A6/A7/A8南京英诺华：D280/360优利特：URIT-8000南京劳拉：FAITH-3000上海丰汇：FH400珠海森龙：Senlo 8030/8020/8010/8008,生化分析仪基本结构,样品系统试剂系统条形码识读系统反应系统清洗系统比色系统程序控制系统,生化分析仪基本操作,参数的设置试剂、校准品的装载试剂的校准常规样品的设定反应曲线的观察质控的设置,生化试剂的发展,化学试剂自配试剂 手工半自动试剂 干粉试剂 液体单试剂 液体双试剂,生化试剂的发展,液体试剂与干粉试剂比较,生化试剂的发展,双试剂优点：扣除样本空白的影响（R1多为缓冲液，R2多为启动试剂）去除内源性干扰物质（R1含与内源性干扰物质反应的物质，R2为启动试剂）单试剂优点：单一剂型，使用简便节约试剂位，节省检测时间试剂稳定，避免浪费（由于仪器的死腔体积，造成双试剂使用量上的差异，造成不必要的浪费）,常见生化试剂提供商,欧美：罗氏（宝灵曼）、贝克曼、西门子（拜耳）、雅培、英国朗道、德国豪迈日本：希斯美康、欧林巴斯、日本第一化学、日本协和、日本和光（日立配套）中国：北京中生、上海科华、复星长征、利德曼、北京九强、科美东雅、深圳迈瑞、宁波美康、宁波瑞源、四川迈克、浙江夸克、四川新成等,生化项目常见分类按化学性质分,酶类：ALT、AST、GGT、LDH、CK、ALP、-GT、AMY、LAP（亮氨酸氨基肽酶）、CHE（胆碱酯酶）、CK-MB、LD-1（乳酸脱氢酶同工酶)脂类：TC、F-CHO(游离胆固醇)、TG、HDL-C、PL（人胰脂肪酶）、NEFA(游离脂肪酸)、-脂蛋白、LP(a)、BA（胆汁酸）、apoA1、apoB代谢物类：Urea、UA、Crea、cRT（血清肌酐）蛋白类：TP、ALB、TTT（麝香草酚浊度）、ZTT（硫酸锌混浊）胆红素类：TBIL、DBIL糖代谢类：GLU、SA（唾液酸）电解质：Ca、IP、Mg、Na、K、Cl微量元素：Fe、UIBC（未饱和铁结合力）微量蛋白：-TP、-ALB免疫蛋白质：CRP、RF、ASO、2-MG、IgG、IgA、IgM、C3、C4、Tf(铁传递蛋白)其它：AT-（抗凝血酶因子）、FDP（人纤维蛋白原降解产物）、DD（D2-聚体）,生化项目分类按临床性质分,肝功能试剂：TBIL、DBIL、TP、ALB、ALT、AST、ALP、GGT、CHE、TBA、ADA、5-NT、PA、AFU、MAO肾功能试剂：UREA、CREA、UA、CO2、B2-MG、MALB、CYS-C、尿TP糖类产品：GLU、FMN(GSP)、HBA1C心肌类产品：LDH、HBDH、CK、CK-MB、HS-CRP脂类产品：TC、TG、HDL、LDL、APOA1、APOB、LP(a)、HCY离子类产品：Ca、Mg、P、NA、K、CL、阴离子隙(AG)、Cu、Zn、铅胰腺类产品：AMY、AMM其他产品：CSF、CTn、乳酸、丙酮酸、C3/4、IGG/A/M、FER、ASO、RF、CRP、ACP(酸性磷酸酶)、LPS(脂肪酶)、NAG、血浆氨,临床生化检验,临床生化检验是检验医学的重要组成部分，它对疾病的诊断、治疗、预后判断和健康评价等有着十分重要的意义。随着检验仪器和计算机科学的飞速发展，以及基础医学研究的重大突破，出现了许多新理论、新项目、新技术、新方法，它将临床生化检验推向一个新的高度。,为诊断提供及时的依据为治疗提供可靠的数据为病人提供有效的信息为临床提供完善的服务,临床生化的任务,一个好的医学试验条件,这个试验结果能回答一个医学疑问根据这个结果能制定一个治疗方案这个结果的连续报告能观察病情变化 Infus Ther Transfus Med 2001,常见生化项目的临床解释,肾功测定肝功测定心肌测定血脂测定血糖测定胰腺测定自身免疫测定离子类测定,检验项目,Urea 尿素 Crea 肌酐UA 尿酸UTP 尿总蛋白MALB 尿微量白蛋白2-MG 2-微球蛋白Cys-C 胱抑素C,肾功组合,肾功能试验,尿素(Urea)参考范围:2.90-8.20mmol/L。在正常饮食条件下，血液尿素浓度是肾功能的一项敏感指标。在肌酐浓度发生明显变化前，血液尿素浓度通常已升高，因此监测血液尿素对肾病病程的随访非常有用。注意：随着人民生活水平的提高，每天摄入的蛋白饮食越来越多，血液正常值上限也应加宽。,肾功能试验,肌酐（Crea）参考范围：血清/血浆：104mol/L（男性）84mol/L（女性）血液肌酐经肾小球过滤后不被肾小管重吸收，通过肾小管排泄。在肾病初期血液肌酐通常不升高，直至肾脏实质性损害时血液肌酐才升高。在正常肾血流条件下，肌酐值如升高至176353 umol/L，提示为中度或重度肾损害。所以，血液肌酐对于中晚期肾病临床意义较大。血液Crea的浓度与肾功能的衰竭程度相关,所以Crea是肾病疗效监控的重要指标。,肾功能试验,尿酸（UA）参考范围；男性：208428mol/L女性：155357mol/L血尿酸75%由肾排除，25%由消化道排除。肾主要靠远曲小管分泌排除，所以肾小管分泌功能下降时（如有机物中毒）血尿酸升高。各种慢性肾病、肾功能不全、心功能不全（肾血流减少）时血液尿酸增高。另外核酸代谢增加时，如白血病，多发性骨髓瘤，血液尿酸增高。,肾功能试验,尿总蛋白（UTP）参考范围:尿液140.0mg/L 脑脊液500.0mg/L测定尿液中的总蛋白成分,对评价肾脏疾病,如肾炎、糖尿病性肾病等。医学决定水平500mg/24h：高于此水平的持续性蛋白尿是肾病的明显证据，在排除良性病因后，建议作肾脏活组织检查，以求确诊。3000mg/24h：等于或高于此水平，并有浮肿和低蛋白血症者，多可考虑作肾病综合症诊断，若孕妇又合并高血压，则可诊断为子痫前期，之后应密切注意胎儿情况，母体的凝血功能及有否痉挛。8000mg/24h：达到或高于此值，说明有大量的白蛋白丧失，在肾活检的基础上，应考虑激素治疗，在紧急情况下，静脉输注白蛋白有利于缓解症状。,肾功能试验,尿微量白蛋白（MALB）参考范围：30mg/24h或20mg/L 在早期肾损害时,微量白蛋白可通过损害的肾小球滤出而排出尿中。糖尿病人尿中如有微量白蛋白排出,则很大可能性已经是糖尿病性肾病。对于确诊的肾脏疾病患者来说,大量白蛋白尿(300mg/天)是肾脏转归不良的较强预测因子。,肾功能试验,2-微球蛋白(2-MG)参考范围：血清 0.80-2.80mg/L；尿液 0-300g/L,血2-微球蛋白升高而尿2-微球蛋白正常，主要由于肾小球滤过功能下降，常见于急、慢性肾炎，肾功能衰竭等。血2-微球蛋白正常而尿2-微球蛋白升高主要由于肾小管重吸收功能明显受损，见于先天性近曲小管功能缺陷，范科尼综合征，慢性镉中毒，Wilson病，肾移植排斥反应等。血、尿2-微球蛋白均升高主要由于体内某些部位产生过多或肾小球和肾小管都受到损伤，常见于恶性肿瘤（如原发性肝癌、肺癌、骨髓瘤等），自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、溶血性贫血），慢性肝炎，糖尿病肾病等。老年人也可见血、尿2-微球蛋白升高。此外，使用卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素等药也可增高。糖尿病中应用:血B2-MG能准确反映肾功能情况，有助于早期发现糖尿病肾病。血液系统疾病中的应用:多种血液疾病如慢性淋巴性白血病，淋巴瘤、多发性骨髓瘤均可见到B2-MG升高。肿瘤疾病中应用:恶性增生性疾病有B2一MG增高，播散性病变较局限性明显。肿瘤病人B2-MG增高与疾病分期、疗效、病程和预后明显相关，故对疗效估价和预后判断有重要意义。,肾功能试验,胱抑素C（Cys-C）参考范围：0.51-1.09mg/LCys-C是反映肾小球滤过功能的理想指标，可广泛应用于所有与肾功能受损相关的疾病GFR的评价与监测：用于评价GFR的功能用于肾移植术的监测用于糖尿病肾病的监测用于高血压肾病的监测用于心血管病肾功能监测用于儿童肾病的判断用于癌症化疗肾功能监测用于急性心衰肾功能监测用于肝硬化的肾功能监测,ALT 丙氨酸氨基转移酶/谷丙转氨酶 AST 天门冬氨酸氨基转移酶/谷草转氨酶ALP 碱性磷酸酶GGT-谷氨酸氨基转移酶TBIL 总胆红素DBIL 直接胆红素TP 总蛋白ALB 白蛋白PA 前白蛋白TBA 总胆汁酸AFU-岩藻糖苷酶ADA 腺苷脱氨酶,肝功组合,丙氨酸氨基转移酶/谷丙转氨酶（ALT）参考范围：男性：540U/L女性：535U/LALT非特异性：ALT在心、肝、肾、肌肉中的比例是7.1:44:19:4.8。在肝损害时，血中ALT增高明显，故是肝损害的一个敏感指标。急性肝损害诊断建议,认为ALT参考上限10倍可诊断急性肝损害。在ALT300U/L时诊断为急性肝损害的敏感性96%，特异性94%。另外，在肝胆疾病、传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎时血清中ALT活性增高。,肝功能试验,天门冬氨酸氨基转移酶/谷草转氨酶(AST）参考范围：8-40U/LAST和ALT一样广泛存在于心（156），肝（142）,肾（99），肌肉（91）中，在人体肝脏中81%AST是线粒体酶，故此酶的释放，表明有组织损害。急性肝病AST升高不如ALT明显。慢性肝病AST升高比ALT明显。中毒性肝炎AST升高更为显著。,肝功能试验,肝功能试验,碱性磷酸酶(ALP)ALP升高是阻塞性肝病的一个敏感指标。在急性肝损伤时很少超过3倍的参考值。所以急性肝损伤是ALT10倍参考值上限，同时ALP3倍参考值上限。肝胆疾病、阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝癌时血清ALP活性增高。但因为骨病时ALP活性也升高，是非特异性的指标。参考范围:女性：112岁 500U/L 15岁以上 40150U/L男性：112岁 500U/L 1215岁 750U/L 25岁以上 40150U/L,肝功能试验,-谷氨酰氨基转移酶(GGT)参考范围：男性：1150U/L女性：732U/L在各肝胆疾病时，如原发性肝癌，胰腺癌等GGT显著升高。恶性肿瘤肝转移和肝癌手术后复发时，阳性率可达90%。嗜酒，安替比林，苯巴比妥，避孕药会使GGT轻度升高。但是，GGT作为肝癌标志物特异性较差。急性肝炎、慢性肝炎活动期、阻塞性黄疸、胆道感染、胆石症、急性胰腺炎时都可以升高。,胆红素（TBIL&DBIL）参考范围：TBIL:5.128.0mol/L DBIL:0.010.0mol/L 均被广泛应用于肝功能的筛选检查中，对鉴别黄疸有很大的作用。,肝功能试验,总蛋白（TP）参考范围：60.085.0g/L 浓度增高，见于血清中水分减少，（呕吐、腹泻、高热、休克，慢性肾上腺皮质功能减退）；或血清蛋白合成增加（骨髓瘤）；浓度降低，血浆中水分增加，血浆被稀释，营养不良，消耗增加，合成障碍（肝功受损），体内蛋白丢失（烫伤，肾病综合征等）,肝功能试验,白蛋白（ALB）参考范围：35.055.0g/L 单纯ALB增高少见（严重失水，血浆浓缩）。ALB降低原因与TP相同，急性浓度降低主要是急性大量出血或严重烫伤时血浆大量丢失。慢性由于肝脏合成障碍，腹水形成时血浆丢失，肾病时尿液丢失。,肝功能试验,肝功能试验,前白蛋白（PA）参考范围：200400mg/L 由肝细胞合成，生理功能是作为组织修补材料和运载蛋白，还具有运载维生素A的作用。临床意义：作为营养不良的指标作为肝功能不全的指标，具有较高的敏感性。在急性炎症，恶性肿瘤，创伤等任何急需合成蛋白的情况下，血清PA迅速下降，PA是负性急性时相反应蛋白。,总胆汁酸（TBA）参考范围：0.010.0mol/L 一旦肝细胞发生病变，血中胆汁酸浓度极易升高。一般认为胆汁酸的测定对肝胆疾病的灵敏度和专一性都较高。血清胆汁酸升高常见于急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌、胆汁淤积酒精肝和中毒性肝胆疾病。急性黄疸性肝炎：TBA、ALT、AST异常率100%;慢性重型肝炎：TBA、AST异常率100%;肝硬化：TBA、ALT、AST分别为100%、40%、94%;慢性乙型肝炎：TBA异常率重度中度轻度。,肝功能试验,肝功能试验,-岩藻糖苷酶(AFU)参考范围：40U/L 新生儿遗传性AFU缺乏的鉴别诊断AFU诊断原发性肝癌特异性90%,阳性率64%-84%AFU的升高幅度与肿瘤大小无明显关系,病灶3cm病组血清AFU升高的阳性率70-80%,明显高于AFP肝硬化和急性肝炎病人血清AFU也可升高,但升高的幅度较低,可用ALT的活性鉴别AFU升高的原因,肝功能试验,腺苷脱氨酶（ADA）参考范围：25U/L ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。活性升高，常见于肝炎、肝硬化、血色素沉着症、肿瘤。阿米巴肝脓肿（ALA），ADA活性明显减少,心肌疾病检测,急性心肌梗塞(AMI)在西方社会是最为常见的一种疾病，在发展中国家也正以惊人的速度增长着。对患者进行成功的治疗、尽量减少心肌细胞损伤的前提是早期的精确诊断，尤其是溶栓治疗发展以后。一直以来，患者的心肌损伤的诊断和评价都依赖于实验室的检验结果。根据何大一教授的报告,2004年心血管疾病疾病死亡占我国中老年人死亡的33.29%。急早检测有利于AMI的诊断。,WHO制定的AMI诊断标准,二十年前，世界卫生组织(WHO)制定了AMI的诊断标准，下列三组情况必须同时存在两组才能诊断为AMI：1.有剧烈而持久的胸痛史：2.明确的心电图改变，包括ST段抬高和异常的Q波出现：3.系列酶的水平的改变，早期浓度升高，随后恢复正常浓度。起初选用肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、和乳酸脱氢酶(LDH)作为心肌梗死的标志物，后来则选用特异性更高的标志物如CK的同工酶CK-MB和LDH的同工酶LDH1。,心肌组合,CK 肌酸激酶CKMB 肌酸激酶同工酶LDH 乳酸脱氢酶-HBDH-羟丁酸脱氢酶AST 天门冬氨酸氨基转移酶IMA 缺血修饰白蛋白,肌酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)CK的参考范围：男性：38174 U/L 女性：26140 U/LCK-MB的参考范围：7-25 U/LCK由3种同功酶组成:CK-MM(肌)、CK-MB(心肌)、CK-BB(脑)。心肌主要是CK-MB，而其它组织不含CK-MB，故特异性较高。CK-MB升高是公认的AMI的诊断指标。急性心肌梗塞后36小时就开始增高，可高达正常上限的1012倍（824h）。但此酶增高持续时间短，24天就恢复正常。病毒性心肌炎时CK（CK-MB）也明显升高，对诊断和预后有参考价值。,心肌酶谱,乳酸脱氢酶(LDH)由5种同功酶组成，每种同功酶 由H亚基（心)和M亚基（骨骼肌）组成。LD1（H4），LD2（H3M），LD3（H2M2），LD4（HM3）LD5（M4）。H亚基增高主要是心肌疾病，M亚基增高主要是各种肿瘤，所以乳酸脱氢酶增高主要见于心肌梗塞肝病和某些恶性肿瘤。如能测同功酶，即可区别疾病种类。参考值：109-245 U/L,心肌酶谱,心肌酶谱,-羟丁酸脱氢酶(-HBDH)参考值：72-182 U/L。-羟丁酸脱氢酶(-HBDH)作为LDH同功酶测定的一种方法，代表LDH1和LDH2的活性，心肌梗塞时患者血清-HBDH增高。LDH/a-HBDH用于区分肝病还是心机疾病：LDH/a-HBDH 正常人：1.21.6 心肌梗塞：0.81.2 肝实质病变：1.62.5,心肌酶谱,天门冬氨酸氨基转移酶/谷草转氨酶(AST)参考范围：8-40 U/L谷草转氨酶(AST)：心肌细胞中AST含量在各组织中最高，当心肌梗塞时612小时AST增高，48小时达高峰，约35天正常。肌炎、胸膜炎、肾炎、及肺炎等也可以引起血清AST轻度增高。,心肌酶谱,缺血修饰白蛋白(IMA)参考范围：78.1 U/ml作为诊断急性心肌缺血的早期生化标志物用于急性心肌缺血的辅助诊断。IMA是一个缺血标志物，而不是一个坏死诊断标志物。IMA在心肌缺血的6-10分钟內就开始上升，1-3h达高峰。缺血持续则IMA持续上升，在停止心肌缺血的6小时内可降回基础浓度。阴性IMA+阴性ECG+阴性cTn的阴性预测值可达99%。,高脂血症,2003年中华医学会血脂专家委员会血脂异常防治建议中提出联合监测、综合分析的项目:甘油三脂(TG)总胆固醇(TC)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)载脂蛋白(apoA1,apoB)脂蛋白a（LP(a)）,同型半胱氨酸（HCY）参考范围：成年人：15.0mol/L老年人：25.0mol/LHCY与疾病的关系：独立的心脑血管疾病的强危险因子发生缺血性卒中和再发卒中的强预测因子与多种常规危险因子具有协同放大作用高血压者Hcy水平与动脉壁硬度具有很强的独立正相关与糖尿病联合作用可使死亡率呈指数上升肾病患者心血管疾病发生率和死亡率的独立危险因子会产生或引发多种妊娠危害会产生或引发神经与精神系统疾病,心血管疾病检测,心血管疾病检测,高敏-C反应蛋白（HS-CRP）用超敏感检测技术检测的低浓度10mg/L的CRP称之为高敏C-反应蛋白(HS-CRP)参考范围：3.0mg/L 在各种炎症、组织损伤细菌感染和肿瘤等疾病中,HS-CRP是一种很好的检测和监测指标。已被广泛应用于自身免疫性和感染性疾病的诊断和监测HS-CRP作为独立的心血管危险因子:3 mg/L 高风险:预示为CHD易患人群,应 采取预防性措施可适用于儿科感染疾病的诊断。新生儿体内CRP的水平通常比较低,常规的CRP测定不能检测出微小的变化。,甘油三脂(TG)参考范围:1.70mmol/L 作为冠心病危险因子分析和评价的一部份；确定高密度脂蛋白胆固醇降低是否是血液TG过高的结果（TG2.78mmol/L)；作为急性胰腺炎的危险（TG5.55）;确定爆发性黄疸，肝大，脾大和脂血性视网膜炎是否为TG升高的结果（TG55.5mmol/L);确定使用降压药，降胆固醇药和其它药时，它们的副作用有无继发性升高血液TG。,高脂血症,总胆固醇（TC）高TC血症是冠心病的主要危险因素之一。高TC血症有原发和继发两种:原发有遗传性高TC(低密度脂蛋白受体缺乏);继发见于肾病综合症、甲状腺功能减低、糖尿病、妊娠等。国际划分标准（40岁以上）：正常：6.47mmol/L严重高TC血症：7.76mmol/L,高脂血症,高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）参考范围：0.831.96mmol/LHDL-C是一项极具重要临床意义的检测指标,其浓度与冠心病发病成负相关。美国胆固醇教育计划认为成人HDL-C低于1mmol/L是冠心病的主要危险因数;高于1.6mmol/L被认为是冠心病“负”危险因数。有报道,HDL-C每升高0.026mmol/L,冠心病危险度降低2-3%。HDL-C降低常见于心、脑血管病，肝炎、肝硬化等。高TG血症往往伴随低HDL-C。肥胖者HDL-C也多偏低。,高脂血症,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)参考范围：3.12mmol/L。LDL-C是冠心病的主要危险因素,美国全民胆固醇教育计划成人专家组认为降低LDL-C为首要治疗目标。LDL-C被认为是动脉粥样硬化因子，所以在美国国家卫生研究所是把75百分数作为LDLC的正常值上限可能是慎重与可靠的。也就把25%的人群作为可疑而严密观察。,高脂血症,载脂蛋白A1（apoA1）参考范围：1.00-1.60g/L。apoA1的浓度与冠心病和动脉粥样硬化程负相关。apoA1与HDL-C正相关，但在病理条件下HDL脂类与组成往往发生变化，二者的降低不一定成比例。同时测定apoA1与HDLC对病理诊断和疗效观察更有效。冠心病患者apoA1偏低。脑血管病患者apoA1也明显偏低。家族性高TG血症患者HDL-C偏低，但apoA1不一定低。家族性混合型高脂血症患者二者都低。,高脂血症,载脂蛋白B（apoB）参考范围：0.60-1.30g/L。大约90%的apoB分布在LDL中，故血清apoB主要代表LDL水平，是冠心病的危险因数，与LDL-C正相关。多数临床研究指出，apoB是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化指标。当高TG时，apoB也相应增高。在冠心病高apoB血症的药物干预实验中表明，降低apoB可以减少冠心病发病及促进粥样斑块的消退。,高脂血症,脂蛋白a（Lp(a)）参考范围：300 mg/L。Lp（a）水平主要决定于遗传因素，家族性高Lp（a）与冠心病发病倾向相关。Lp（a）是公认的冠心病和动脉粥样硬化独立的危险因子。因为它与高血压、吸烟、高VLDL-C、低LDL-C等因素无明显相关。在LDL-C高时，伴Lp（a）高危险性就更高。在动脉粥样硬化病形成中Lp（a）和apoB起协同作用。,高脂血症,GLU 血糖HbA1c 糖化血红蛋白,血糖组合,临床必查血糖者 住院者 手术前 妊娠者 健康体检者（上海社区筛查发现：40%的糖尿病者没有临床症状，仅由筛查而确诊。查出的T2DM患者已经过了几年或十几年病程）。,糖尿病,血糖浓度（GLU）参考范围：3.90-6.10mmol/L。GLU测定是当时血糖浓度的直接反映，对于高血糖或低 血糖监测一目了然。血糖是糖尿病诊断和监测的最重要指标。测定血糖要注意标本时间性，血液细胞离体后也要用糖，血糖随时间延长而降低。便携式血糖仪种类繁多（25种以上），质量差异很大，只能作为病人监测，绝对不能作为医院报告。,糖尿病,糖化血红蛋白（HbA1c）参考范围：3.8-5.8%糖化血红蛋白反映病人过去1-2月的平均血糖浓度，了解前段时间的平均血糖浓度。与当时的血糖浓度无关。“隐性”糖尿病的早期诊断指标。列为糖尿病的普查和健康检查项目。用于糖尿病人的用药疗效监测,评估病情发展。美国和英国的糖尿病研究组织证明：糖化血红蛋白每降低10%（如从8%降到7.2%）,其糖尿病并发症的危险降低45%。美国糖尿病学会(ADA)建议，糖尿病的治疗目标是HbA1C7%；如果高于8%，应重新修订治疗计划。鉴别昏迷原因或正在输葡萄糖的的抢救者。,糖尿病,胰腺类,-淀粉酶（-AMY）参考范围：血清/血浆：135U/L尿液：900U/L不仅可以从胰酶逸脱现象的增减上进行胰脏病的筛选、早期诊断和观察治疗过程，还可以用于诊断腹部疾病，是诊断巨淀粉酶血症等疾病时的重要指标。,自身免疫类,免疫球蛋白（IgG&A&M）参考范围：IgG:7.0016.00g/L IgA:0.704.00g/L IgM:0.402.30g/L 对慢性肝病、感染性疾病、淋巴细胞增多症、多发性骨髓瘤、原发性和继发性免疫缺陷等疾病的诊断、监控和预后判断是非常重要的。,自身免疫类,抗链球菌溶血素“O”(ASO)参考范围：成人200U/ml 儿童150U/ml 为早期链球菌感染、早期被怀疑有急性风湿热或者急性链球菌性肾小球肾炎、偶见咽炎和其他急性感染等提供依据。这个抗体对抗原的应答在链球菌感染后三周内达到最高峰，并将保持在最高水平约3-4个月，然后逐渐恢复到正常水平。类风湿因子（RF）参考范围：30U/ml 对风湿性关节炎的临床诊断和预后的判断与帮助。,自身免疫类,C反应蛋白（CRP）用于器质性疾病的筛查，如细菌感染引起的急，慢性炎症自身免疫性疾病或免疫复合物病组织坏死和恶性肿瘤。并发感染的鉴别 CRP 100mg/L为细菌感染，病毒感染50 mg/L,革兰阴性菌感染可高达500mg/L。评价疾病活动性和疗效监控 CRP 10-50mg/L表示轻度炎症,CRP 100mg/L表示较为严重的细菌感染。,自身免疫类,补体C3&C4参考范围：C3:0.791.80g/L C4:0.100.40g/L 属于急性时相反应蛋白，故在全身性感染，风湿热，皮肌炎，心肌梗死，严重创伤以及妊娠时血清C3，C4含量均可升高在活动性免疫复合物性疾病（如狼疮性肾炎，慢性活动性肝炎，系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎等）C3，C4水平应于CH50同时降低,离子组合,Ca 钙Mg 镁IP 无机磷CO2 二氧化碳,离子类,钙（Ca）参考范围：成人：2.032.54mmol/L 儿童：2.252.67mmol/LCa是诊断和治疗骨结核、副甲状腺机能障碍、抽搐、佝偻病等钙代谢异常疾病所必须的临床生化检查。镁（Mg）参考范围：成人：0.601.10mmol/L 儿童：0.500.90mmol/L当Mg含量过高，见于吸收过多，肾功能降低，阿迪森病，含量过低可产生摄取不足，肠道吸收障碍，低蛋白血症，酒精中毒。,离子类,无机磷（IP）参考范围：成人：0.901.34mmol/L 儿童：1.452.10mmol/L血清磷的水平，在甲状旁腺功能减退、维生素D摄入过多、肢端肥大症、脱水和治疗骨折时异常增高。血清磷的水平的下降，与甲状旁腺功能亢进、维生素D缺乏、原发性磷酸盐血症、范可尼综合征、吸收不良综合症、过多的口服制酸剂、骨软化、佝偻病、胰岛素分泌过多、糖尿病有关。二氧化碳（CO2）参考范围：23.029.0mmol/L 其变化主要反映代谢性酸碱平衡紊乱。,试剂评价概念-实验方法的评价,误差：是指测定值与真值之间的差距。系统误差：是一系列分析测定的结果对真值或靶值存在有同一倾向的偏差。随机误差：又称偶然误差，由某些偶然因素引起，事先难于预料。基质效应：指检测系统在分析样品中的分析物时，处于分析物周围的基质对分析物测定结果的影响。,试剂评价概念方法学评价指标,准确度：测定值与真值之间的符合程度。目前是以不准确度的偏差和偏差系数表示，系数越小，准确度越好，反之越差。精密度：表示对同一样本在规定条件下多次重复测定结果之间或各次结果与均值之间的符合程度。它反映的是随机误差的大小。目前是以标准差（S）和变异系数（CV）表示。灵敏度：指化学反应中能检出的最小量。方法的灵敏度越高，检测限就越低，检测能力就越强。特异性：是指分析测定中只对某一成分能起反应，其他物质对反应毫无影响或基本无影响。主要通过干扰实验进行评价。检测限：是指在给定的置信水平上能够检出被测物的最小浓度或最小质量。线性范围：是指检测信号与被测物浓度呈线性时的被测物浓度范围。参考范围：从某一参考个体或参考人群中获得的测定范围。医学决定水平：是一限值，用来除外或确定某一临床情况或预告将会出现某一生理变化现象。若高于或低于该值，就应采取一定的治疗措施，如决定或改变治疗方案，决定诊断或增加其他试验以确定诊断和估计预后等。,试剂评价概念-评价试验,批内重复性实验：在一个相当短的时间间隔内，用同一份样品，在较稳定的条件下，进行重复测定（一般为20次），计算出均值（X）、标准差（SD）和变异系数（CV）。批间重复性试验：将同一样本每天上下午两个批次随机插入常规样本中测定，每次重复测定2次，连续测定5个工作日，计算均值（X）、标准差（SD）和变异系数（CV）。回收试验：用来考核某实验方法检测加入到常规标本中纯分析物的能力，就是将不同浓度的被分析物的标准溶液加入病人样品中，与原病人样品中加入相同量的无分析物的溶剂的基础样品。同时对此两种样品进行分析测定，分析两者差值的比例。该实验目的是检测比例系统误差，以衡量分析方法的准确度。,试剂评价概念-评价试验,干扰实验：用来检测某物质加到样品中产生的系统误差，方法同回收实验一样，只是加入的不是被分析物，而且估计会对测定引入分析误差的物质。该实验也是用来衡量分析方法的准确度。方法比对实验：对一组病人样品用实验方法和对比方法同时进行分析测定，对测定结果进行相关或回归分析。该实验用于检测实验方法的系统误差。开瓶稳定性：校标后的试剂，开瓶置于2-8中保存，以测定同一样品的值与开瓶当日测定结果偏差超过10%为止的天数为开瓶稳定天数实际储存条件下稳定性实验：试剂置于2-8密闭避光贮存以测定同一样品的值与第一天测定值相比偏差不超过10%为限，如偏差超出10%允许范围，重新校准后再次测定质控。,试剂基本参数,分析方法反应时间监测时间（测光点）波长反应温度延迟时间及孵育时间样品/试剂比校准类型/曲线拟合方式试剂空白/空白速率线性范围/检测范围校准值,校准品,校准：通过校准品将仪器和试剂联系起来，建立一条浓度和吸光度的关系曲线（标准曲线），用于进行未知浓度标本的测定。,校准品,校准品是含有已知量的待测物，用以校准该测定方法的数值，它与该方法及试剂、仪器是相关联的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差。冻干/液体;单点/多点;水溶基质/血清性基质;复合校准品/单项校准品 可提供校准品的专业厂家：朗道、罗氏、伯乐,量值溯源,通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准(通常是国家计量基准或国际计量基准)联系起来的特性，称为量值溯源。,完整的校准等级和向SI单位的计量学溯源,量值溯源,与NIST、IRMM、IFCC、CAP、CCCLS等组织建立了长期联系与业务合作。先后对大部分小分子代谢类、血脂类、酶类、蛋白类、HbA1c、CysC、HCY等项目进行了量值溯源传递。不能溯源到上一级参考物质和/或参考方法的项目也与国内外知名品牌如Roche、Wako、Diasys等公司的试剂进行过临床比对实验。,量值溯源,IFCC Primary Reference ProceduresNIST SRM909bIRMM SRM DA470IRMM SRM DA471WHO SP1-03、SP3-07NIST SRM 916aJDS lot2,量值溯源,交叉污染,部件间化学污染.试剂针污染：目前大多数全自动生化分析仪采用双试剂检测样本，试剂、的吸取与吐出，一般分别只配有一套试剂针。当试剂 针在清洗不完全，或黏附力增加时，残留试剂可能会对下一相临检测结果造成影响。.搅拌棒污染：在试剂与样本混合后，往往需要搅拌棒加以混匀，而搅拌绑若清洗不完全，或黏附力增加时，残留试剂可能会对下一相临检 测结果造成影响。.比色杯污染：生化分析仪的比色杯一般是循环使用的，每个比色杯检测完毕后，进行清洗，然后继续下一个检测项目的检测。当某个比色 杯清洗不完全时，吸附在比色杯上的上一个项目的残留试剂，可能会对在这个比色杯中进行的下一个项目的检测结果造成影响。以上种可能的污染，以比色杯污染最为严重，因此比色杯最难以清洗干净，且在实际工作中难以判断该比色杯上一测试的项目；试剂针 吸量较大，亦难以清洗干净。,试剂间化学污染（一）,试剂成分的直接污染：上一测定试剂中含有下一测定所需要测定的物质，直接干扰下一检测的测定结果。如：AMY试剂中含有较高浓度的Ca2+；ALP（IFCC法）、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、CO2（PEPC法）、AMY（EPS法）、TG等试剂中含有Mg2+；GLU（氧化酶法）、TP、ACP试剂中含有较高浓度的K+；ChE、CHOL、GLU（GOD法）、UA（尿酸酶法）、LDH（IFCC法）、HBDH（DGKC法）等试剂中含有磷酸缓冲液；CHOL、TG、HDL-C试剂中含有胆酸钠；AST（IFCC法）、ALT（IFCC法）、试剂中含有高活性LDH；以上试剂的交叉污染就会分别对Ca2+、Mg2+、K+（紫外酶法）、P、TBA、LDH的测定结果造成干扰。试剂成分参与反映：上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用，因而干扰下一反应的测定结果。如：（1）镁测定试剂的络合剂亦能与铁结合，影响铁（有铁络合剂的结合）；（2）直接胆红素（重氮法）试剂含EDTA，镁试剂中含有EGTA，均能与Ca结合，从而Ca的测定；（3）以甘油作为酶保护剂的试剂，回对TG的测定带来干扰；（4）钙（MTB法）试剂对钾有负干扰；（5）CHOL试剂中含有胆固醇酯酶，可水解胆固醇酯形成游离胆固醇，而引起对游离胆固醇测定的干扰。,试剂间化学污染（二）,反应进程相同：上一试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰，下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。如：（1）当上一个反应产物为H2O2时则对以Trinders反应产生颜色的测定结果引起干扰。如UA对CHOL结果的影响；CHOL对CREA（酶法）测定结果的影响；GLU（氧化酶法）对CREA测定结果的影响。（2）CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）试剂中含GLU成分，其分析方法的原理中GLU的已糖激酶（HK）反应过程，因此可能对GLU的测定带来干扰。影响反映条件：影响下一项目的反应条件如pH等，从而改变反应速率。如：（1）直接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂中含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活性，对测定结果有负干扰。（2）CREA（苦味酸速率法）反应条件为碱性，果糖胺（动力学法）反应条件为酸性，受到污染后反应速率会减慢。（3）CREA（酶法）试剂中含有抗坏血酸氧化酶，影响了氧化还原反应的进程，回对 TBA（酶循环法）测定结果有影响。,交叉污染确认实验,交叉污染初试：假设有3个项目 A，B，C，以一混合血清作为标本按以下顺序测试：A，A，A，A，A，B，A，C，A，B，B，B，B，B，C，B，C，C，C，C，C。得到的结果