无菌药品检查要点-On-Line-QA.ppt

无菌药品GMP认证检查要点,无菌药品的概念及分类,无菌药品的概念无菌药品是要求没有活体微生物存在的药品，也就是法定药品标准中有无菌检查项目的药品。为了达到产品中没有活体微生物，在生产过程中，需要采取各种方法来去除制品中原有的微生物和防止制品受到微生物的污染。,无菌药品的概念及分类,无菌药品的分类 最终灭菌的无菌药品耐热的产品，能通过热处理的方式来去除制品中可能存在的微生物，通常采用湿热灭菌法。如，大容量注射剂、小容量注射剂非最终灭菌的无菌药品在工艺过程中，完成内包装后没有一个单独的灭菌过程，其无菌性主要依赖整个过程中保持对各个工序的无菌控制，避免生产过程中的微生物污染。如，粉针剂、冻干粉针剂、部分小容量注射剂、滴眼剂、无菌原料药等,无菌药品的概念及分类,无菌药品的生产方法的选择 首选最终灭菌以保证产品的无菌特性；当灭菌可能会造成副产物等问题时，尽可能从工艺上创造条件，使灭菌成为可行；由于热不稳定性，应使用一种替代方法：除菌过滤和/无菌生产。非最终灭菌无菌药品的基本特征低安全高成本,灭菌工艺的选择,产品能否121湿热灭菌15分钟,产品能否湿热灭菌F08分钟，达到SAL106,产品药液能否除菌过滤,无菌原料、无菌配制、无菌灌封,选用湿热灭菌12115分钟,药液除菌过滤和无菌灌封,否,是,否,是,否,是,使用湿热灭菌F08分钟,无菌药品生产中的污染来源,人员 人是无菌药品生产中的主要污染源，在管理比较到位，生产设备自动化程度较好，操作人员素质较高的企业，人员操作所致的污染率超过70%水源性微生物 绝大多数为革兰氏阴性菌，不会形成芽孢，不耐热。其代谢产物及细胞的尸体及碎片均属细胞内毒素的污染源空气中的微生物 基本为革兰氏阳性菌，有可能会形成芽孢使其耐热性增大,无菌药品生产的特殊要求,关键区域和关键表面：关键区域指无菌产品或容器/密封件所暴露的环境区域；关键表面是与无菌产品或容器/密封件相接触的表面。生产环境：通常应在100级洁净区或万级背景下的局部100级洁净区。操作人员：根据工艺规定的环境要求，穿着洁净工作服或无菌工作服,无菌工作服式样及穿戴方式,无菌药品生产的特殊要求,原料及内包装材料：进入无菌区前，应根据材料的性质对其采取除菌、灭菌和去热原处理。惰性气体、压缩空气等介质：直接接触药品的均应经除菌过滤达到无菌状态。生产设备与工器具：应能有效地进行在线或离线的清洗和灭菌。,无菌药品生产的特殊要求,清洁工具：无菌药品生产环境中的各种表面清洁中使用的器具工具，应能够根据工艺要求有效地清洁灭菌或消毒处理。消毒剂：应有相应的除菌或其他处理措施。如：无菌室内使用的75%酒精应经除菌过滤后使用。,厂房的检查要点,无菌药品厂房检查的基本内容,无菌药品生产厂房与设施是实施药品GMP、保证无菌药品质量的先决条件，其布局、设计和建造应有利于避免交叉污染、便于清洁及日常维护结合具体生产工艺，分清无菌操作区域与洁净区域的联系与区别 不同洁净级别区应设相应的洁具间，清洁用具不得跨区使用,厂房设计、建造的原则,无菌生产设计就是为了减少在生产中对暴露的物料的潜在污染 人、物流一定要合理，以减少不必要的活动对暴露产品、容器、包装材料和环境所造成的潜在污染。设备的设计安装安排应合理，使得操作简单易行。无菌室的人员数量应最少，人流的设计应能够减少人员在无菌室的穿越。设备的设计应尽能减少人员数量以及人员操作时的活动量对环境的污染,厂房设计、建造的原则,产品应在合理的洁净区条件下进行运输 无菌生产中各个相互联系的房间要维护好各个房间的独立性，减少动态条件下的相互干扰工艺设备和系统要装配有清洁用配件和阀门在100级无菌生产区域内设置地漏是不合适的,关键区域与关键表面的要求,洁净区的建筑材料应易于清洗和消毒，房间内表面应无裂缝，墙与地面的连接处应采用圆弧角。地面、墙壁、顶棚材质应坚硬、光滑、易于清洗。顶棚与HEPA过滤器边框之间的缝隙应能够保证严密，满足无菌条件，防止污染 不应该存放不必要的物料和设备 设备的水平面以及支架上应不易积聚灰尘，在关键区域内的设备不应影响气流的方向，应能确保气流的单向流,洁净度级别比较,WHO GMP 2002 标准,注：新标准分为动态及静态，差一个级别；A级没有要求连续微粒测试引自WHO技术报告902，2002,WHO GMP 2002 微生物指标,注：沉降碟的暴露时间，一般4小时，我国为0.5小时 引自WHO技术报告902，2002,FDA对洁净区划分的标准2004,所有级别均依据生产活动时在邻近暴露物料/物品处测试的数据浮游菌、沉降菌纠偏限度表示建议的环境质量水平。企业也可根据作业或分析方法的类型确定微生物纠偏措施标准引自Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing Current Good Manufacturing Practice,FDA,中国 GMP（1998 修订）,我国百级标准采用了国际标准中B级（乱流百级）的限度标准标准没有阐明对气流组织的要求,关键操作区空气流向控制要求比较,洁净区压差控制要求比较,洁净区环境监控要求比较,洁净生产区域的卫生设施,无菌操作区内不应设置清洗间和带水池的洁具间。清洁用具应定期清洗或消毒无菌操作百级区不得设置地漏，无菌操作万级区应避免设置水池和地漏。,洁净厂房卫生要求,无菌洁净室的送、回风过滤器的框架不得采用脱屑、产尘、长菌的材质。无菌操作区不得设置可开启式窗户。无菌检查室应按无菌操作区管理，应在万级环境下的局部百级超净工作台上进行，不得与生物检定、微生物限度检查、污染菌鉴别和阳性对照试验使用同一实验室。,工艺用辅助用房的要求,无菌原料药内包装材料的最终处理环境应为万级非最终灭菌的无菌原料药内包装材料的最终处理后的暴露环境应为百级或无菌万级背景下的局部百级。无菌操作区墙面与地面之间宜成弧形，便于清洁。万级无菌操作间不应设清洁间和清洁用具间,最终灭菌药品厂房检查要点,物料处理应在万级洁净度条件下进行，目的是使微生物和尘埃微粒数较低。配料可在10万级洁净度条件下进行，前提条件是在工艺过程的其他步骤中有降低污染可能的手段。灌装可在1万级洁净度条件下进行。,非最终灭菌药品厂房检查要点,严格体现出未经消毒灭菌处理的物料不可能进入无菌室内 经过消毒灭菌处理后的物料应直接出现在无菌操作区域内，不应该再经过非无菌操作区而受到再污染,设备的检查要点,工艺设备的基本要求,无菌药品工艺设备与药品直接接触部分的材质，表面应光洁、平整、易清洗或消毒、耐腐蚀、不应脱屑、生锈、发霉、长虫，不与药品发生化学变化，不得吸附和污染药品，耐于热灭菌、湿热灭菌或化学灭菌 压缩空气、氮气或真空设备应配备不得释放纤维物质的过滤器或除尘器设备、容器和工艺管道应有恰当的清洗、灭菌方法，不能移动的设备应有在线清洗和灭菌的设施,工艺设备的基本要求,安装位置应便于设备生产操作、清洗、消毒、灭菌、维护、保养，需要清洗和灭菌的零部件应易于拆装；塑料容器和胶塞在处理和贮存过程中应控制可能产生的热源污染，因此应作去热源处理。尽可能缩短清洗塑料容器和胶塞到灭菌之间的时间间隔。,设备的检查要点,适用于产品的生产、清洁、消毒或灭菌尽可能采用密闭系统合理布置和安装关键参数控制和记录仪表的校准设备的确认、维护和维修设备的清洁、消毒或灭菌共用设备应有防止交叉污染的措施,密闭系统示例,工艺用水的检查要点,水处理设施及其分配系统的设计、安装和维护应能确保供水达到适当的质量标准。水系统的运行不应超越其设计能力。注射用水的生产、贮存和分配方式应能防止微生物生长，例如，在70以上保持循环水源、水处理设施及水的化学和生物学污染状况应定期监测，必要时还应监测细菌内毒素。监测结果以及所采取纠偏措施的记录应予归档,生产工艺,生产工艺,配制过滤无菌灌装冻干灭菌工艺,配制工序的检查要点,操作区的设置和洁净度级别配料处方称量操作称量记录防止污染和交叉污染的措施,配制区域的洁净度级别,应单独设置，注意称量区的空气流向，防止粉尘扩散应根据产品的特性设定相应的洁净度级别欧盟无菌药品的GMP附录规定：原辅料和大多数产品的准备/配制应至少在D级区进行，以降低尘粒和微生物污染的风险，适于过滤及灭菌操作微生物污染风险比较高时，如容易长菌的产品、配制后要等相当长时间方可灭菌的产品或因故主要不在密闭容器内进行配制操作的产品，配制必须在C级环境中进行,称量,必须按照注册批准的处方配料称量中应特别注意防止交叉污染一次称量一种物料通常先称量辅料，后称量原料药活性炭应在单独区域中称量，称量后放在水溶液中衡器使用前应检查校准称量记录最好采用客观的记录如实记录衡器的读数复核,过滤工序的检查要点,过滤器的安装位置过滤器的相关信息过滤器完整性试验的方法过滤前后的完整性试验和记录过滤器的更换、消毒或灭菌发现过滤器出问题后的处理,过滤器的安装,除菌过滤用过滤器通常使用2只串联方式，确保过滤的可靠性可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用除菌过滤器将所有药液，特别是大容量注射剂进行除菌过滤采用无菌制造工艺时，除菌过滤操作区域不得设在无菌操作区内，可通过管道传送滤液,过滤器的完整性试验,过滤器的相关信息应具有可追溯性完整性试验的合格标准应参照供应商的说明书设定应在过滤前、过滤后分别测试测试方法起泡点试验前进流试验微生物挑战性试验由供应商做，以避免污染产品,无菌灌装检查要点,关键操作区和生产设备清洁、消毒或灭菌无菌灌装用各类物料、器具的准备或灭菌处理生产用气体人员的无菌操作装量控制培养基模拟灌装验证无菌检验样品的取样检查时应不能影响正常的生产,培养基模拟灌装验证,目的确定实际生产中（如开机前的调试、加入无菌原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染的概率基本思路应综合考虑生产线可能造成污染的各种因素，并能对工艺受控的状态做出准确的评估应尽可能模拟实际生产的无菌操作，可能时，应包括最差条件的相关活动，以挑战无菌操作,培养基模拟灌装验证,常规的工艺验证试验包括培养基模拟灌装验证试验，最少在线灌装三批，每批的批量见下表，每瓶产品均应进行无菌检查，判断该试验是否合格的标准见下表:培养基灌装试验的批量与判断合格的标准批量（瓶）3000475063007760允许染菌 0 1 2 3 的数量（瓶）,灭菌工艺的选择,湿热灭菌法干热灭菌法除菌过滤法环氧乙烷灭菌法辐射灭菌法,无菌药品常用灭菌工艺的比较,影响湿热灭菌效果的因素,待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的装载方式和装载数量湿热灭菌工艺条件湿热灭菌设备,无菌保证水平SAL,无菌保证水平（Sterility Assurance Level）表示物品被灭菌后的无菌状态按国际标准，湿热灭菌法的无菌保证值不得低于10-6，即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一。,灭菌工艺验证的必要性,灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的无菌保证体系灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺经过验证后，方可正式用于生产,国内企业灭菌工艺验证常见缺陷,无包装规格无装载方式未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证采用留点温度计监测温度无温度探头校准记录验证的灭菌工艺与实际工艺不一致未验证最差灭菌条件设定的验证合格标准达不到无菌保证水平（SAL）10-6生物指示剂使用不规范,灭菌工艺检查要点,生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数量研究和监控待灭菌产品的包装形式、装载方式和装载数量灭菌工艺条件灭菌设备关键控制参数的控制和记录仪表的校准设备维护和维修灭菌的记录灭菌工艺的验证选用的生物指示剂热分布试验，找出最冷点位置无菌检验样品的取样,无菌检查,无菌检查的局限性,无菌的定义理论上：无菌没有任何活的微生物实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在无法对整批产品进行100%检验无菌检验的结果只是一个基于“可能性”的判断无菌检验用培养基有其局限性只进行细菌和真菌的检验对实验结果的判定是基于“是否在培养基中生长”培养条件（如温度和时间）是有限的我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态,美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果,试验目的：不合格的可能性(%)试验批量：60,000支试验方法：按美国药典无菌测试方法,上述无菌测试结果的启示,含有少量微生物污染产品的批次也有可能“通过”无菌检验一批产品的染菌率越低，根据无菌检验的结果来判定整批产品的无菌，其风险就越大,如何用无菌检验来证明整批产品无菌,要求有一个取样计划来涵盖整个批号有足够的取样量和检验量选择适用的培养基采用经验证的无菌检验方法良好的环境监控,无菌检验的取样计划,何时取?如何取?何处取？无菌灌装产品批开始、结束及重大故障和调整后最多24小时为一批 USP 每天灌装的产品应分别做无菌检验最终灭菌产品从灭菌柜中最冷点取样对经不同灭菌柜灭菌的产品应分别进行无菌检验连续工艺产品被连续地单个灭菌，如：用电子束灭菌，一批不大于24小时,无菌检验的取样计划,取多少样品（检验数量）？取决于产品的批量 CP2005年版大于500：取2%或20支（取少），用于每个培养基检验小于等于100：取10%或4个（取多），用于每个培养基检验取决于产品的数量CP2005年版剂量小于1毫升，就要取40支同时要考虑检验耗损和复试的需要,无菌检验的取样计划,每个样品测试多少数量（检验量）？药典上规定了每次检验的供试品总量装量小于 1mlCP2005年版 每支样接入每个培养基为全量装量大于等于 1mlPh.Eur 半量，但不超过 20ml CP2005年版 半量，2-500ml,无菌检验用培养基,培养基的种类用于真菌培养的改良马丁培养基，培养温度23-28用于厌氧和需氧细菌培养的硫乙醇酸盐流体培养基，培养温度30-35培养基的适用性检查要有足够的灵敏度能够支持代表性菌种的生长培养基的储存和控制储存条件和有效期,USP29无菌检验阳性对照菌的选择,无菌检验方法,主要有两种方法直接接种法薄膜过滤法注意事项采用直接接种法时应考虑产品是否有抑菌性,无菌检验的方法学验证,验证目的：验证所采用的方法和条件是否适合于供试品的无菌检查。即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可以忽略不计。选用的培养基能够促进各种微生物的生长。消除供试品中抑菌的方法不能损害微生物，如冲洗、中和、酶处理等方法。,无菌检验的环境控制,应在无菌环境下进行洁净度（尘粒和微生物）应与无菌生产厂房一致控制要求与生产区域一致，如：空调、更衣、清洁、缓冲、定期验证应有环境监控程序并根据实际情况设定纠偏限度,隔离器,样品表面的消毒处理,在样品进入无菌区前应进行消毒处理在进行样品外表面消毒时，应确保样品的完整性 考虑所用消毒液渗透过样品容器的可能性，如：透过塑料容器消毒液应无菌,阳性检验结果的调查和处理,无菌检验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法要求回顾无菌检验过程，发现有可能引起微生物污染的因素阴性对照有菌生长供试品中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所用的物品和（或）无菌操作技术不当引起要有调查程序和记录,无菌检查的要点,取样计划取样量和检验量培养基和菌种管理无菌检验方法环境监控样品表面消毒处理阳性检验结果的调查和处理,物料的质量控制,应根据产品的特性、用途和工艺设定物料的质量标准用于无菌药品的物料应特别考虑安全性的指标任何物料的质量标准中一定要有鉴别WHO的GMP中要求对每一包装的物料进行鉴别试验物料的质量标准和（或）来源应符合注册批准的要求物料的取样应有代表性物料的检验应严谨、规范,物料供应商管理,对供应商进行识别、评估、验证、确认和管理是供应链管理中最关键的任务是最基本的质量工作之一应重点管理物料的生产商,物料供应商管理,批准供应商清单,业绩评估,供应商批准流程,供应商选择,供应商嘉奖,供应商需求,供应商分类,成品,服务,物料,确定风险等级,确定批准条件,发给供应商问询表和供应商质量要求,现场审核（如有要求）,评估是否批准,否决,批准,加入批准供应商清单,文件存档,确定批准分级,供应商批准流程示例,供应商变更,物料供应商应保持相对稳定改变原料药的生产商应补充申报，经药监部门批准不同物料的生产商可能采用不同的生产工艺，导致物料的质量标准不完全相同应评估对产品质量的影响至少检验三批样品必要时，还应进行小试和产品稳定性考察应按供应商批准的流程执行及时变更合格供应商清单,物料检查的要点,物料的质量标准物料的来源物料的取样和检验物料的供应商审计物料供应商的变更,中间产品的质量控制,无菌药品应特别注意监控中间产品微生物和细菌内毒素污染情况已配制的中间产品含量检测极为关键澄清度检查可见异物检查应100检查可制备含有可见异物的标准样品对操作人员进行培训,人员的监控,人员的监控,为降低微生物、微粒和热原污染的风险，无菌药品的生产应有各种特殊要求。这在很大程度上取决于生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度。,人员的检查要点,人员的培训人员的卫生习惯体检档案和汇总洁净区内人员的工作服无菌操作,谢谢,