志贺氏菌检验方法.ppt

志贺氏菌检验方法,志贺氏菌简介,志贺氏菌检验,1,2,生物学性状,志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌，菌体短小，长约2-3 m,宽0.5-0.7 m。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。为兼性厌氧菌，在有氧和无氧条件下均能生长；最适生长温度为 36，最适pH为7.27.4；36培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2mm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。,致病因素,志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素，外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌A群型及部分II型菌株还可产生外毒素，称志贺氏毒素。,志贺氏菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。可经由食物，水，日常接触，苍蝇等传播。,抵抗力,志贺氏菌属在外界环境中的生存力，对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱，对酸敏感。一般在潮湿土壤中能存活34天，37水中存活20天，在粪便内（室温）存活11天。日光直接照射30分钟，56-6010分即被杀死，对高温和化学消毒剂很敏感，1%石炭酸中15-30分钟即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。,志贺氏菌检验流程图,检样 25 g（或25 mL）样品+志贺氏菌增菌肉汤225 mL,检样25 g（或25 mL）样品+GN增菌液225 mL,XLD琼脂平板,志贺氏菌,沙门氏菌,菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。,粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径1 mm2 mm。,麦康凯琼脂平板,无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐，直径2 mm3 mm。,培养物中出现下述情况之一者即可弃去：a）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长；b）发酵乳糖或蔗糖的；c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的；d）产气的（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）；e）产生硫化氢的；f）有动力的培养物,2志贺氏菌 3沙门氏菌 4大肠杆菌,血清学分型,凡疑为志贺氏菌，挑取营养琼脂斜面上的培养物，做玻片凝集试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查；如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。,4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用115各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌312型多价血清及各型因子血清检查。,进一步的生化试验,1.VITEK GNI+(革兰氏染色，氧化酶)2.API 20E(革兰氏染色，氧化酶)3.志贺氏菌生化鉴定套装,Thank You!,