蓝靛果组培微插育苗技术规程.docx

蓝靛果组培微插育苗技术规程1范围本标准规定了蓝靛果（LoniCeraCaerUlea）组培微插育苗的术语和定义、培养基制备、外植体选择与处理、诱导分化与继代增殖增壮、杆插、移植抚育和生产档案。本标准适用于蓝靛果组培微插育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则NY/T496肥料合理使用准则通则NY/T1276农药安全使用规范总则1.Y/T1882林木组织培养育苗技术规程3术语和定义组培微插育苗组培瓶苗经炼苗，去除培养基，截成1CnI2Cnl长的微小插X,经激素处理，杆插在配制的培养基上进行生根的苗木繁殖方法。4培养基制备4.1 培养基诱导分化培养基：MS+6-BA1.0mgL+IB0.2mg/L+X脂7.0gL+蔗糖30gL,PH值调至5.8；继代增殖培养基：MS+6-B2.0mg/L+lBA0.3mg/L+X脂7.0gL+蔗糖30gL,PH值调至5.8；增壮培养基：MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.1mg/L+X脂7.0gL+蔗糖30gL,PH值调至5.8。4.2 培养基制备按LY/T1882执行。4.3 培养基保存按LY/T1882执行。5外植体选择与处理5.1 外植体的选择选择生长健壮、无病虫害的优良母株，春季新芽长至ICm2cm时选用叶芽作外植体，休眠期可水培芽作外植体，也可在新枝长至半木质化时剪取2Cnl4Cm嫩茎作外植体。5.2 外植体处理外植体用洗涤剂作表面清洗，流水冲洗30min,放入消毒瓶中，消毒瓶用75%的酒精棉擦拭后放入超净工作台，打开装有外植体的消毒瓶，倒入75%酒精并摇晃，浸泡消毒5sIOs,倒去酒精，用无菌水冲洗外植体3次4次；再用5%次氯酸钠加几滴吐温20或吐温80浸泡10min12min,无菌水冲洗4次5次，无菌滤纸吸干外植体表面水分，两端各剪去2mm以上，保持茎段长度0.5Cm1.0cm,接种至诱导分化培养基中。6诱导分化与继代增殖增壮6.1 培养条件培养室的温度控制在25±2,空气相对湿度控制在70%80%,光照强度为27molm-2S-I36molm-2s-l,光照时间为12h/d14hd06.2 诱导分化将培养瓶的封口膜取下，培养瓶口倾斜在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒。用枪式镒子在酒精灯上灼烧消毒冷却后，将切割好的外植体放入不定芽分化诱导培养基中，每个培养瓶放2个3个外植体，盖上封口膜，标注日期。6.3 增殖培养外植体经诱导培养后，单株苗剪段，丛生芽分芽，转接至继代增殖培养基中培养。培养35d后再重复进行继代增殖培养。6.4 增壮培养增殖继代培养中部分丛生芽弱，将其接种到增壮培养基中，培养3周后继续继代增殖培养或瓶外生根杆插。7杆插7.1 炼苗将瓶苗移到日光温室中，自然散射光下炼苗，温度控制在1825,每天中午在培养瓶周围喷洒雾水，封口炼苗1d3d,松口炼苗1d2d,开口炼苗2h5h即可杆插。7.2 作基质床在温室内作基质床，床宽110cm,作床高10cm,步道40cm。床面上铺5cm7Cm厚腐殖土，上面再铺3Crn4Cm筛过的细河沙，床面整平，杆插前5d用0.5%高锌酸钾溶液消毒。7.3 杆插将瓶苗取出，剪去培养基，截成1Cm2Cm长的插X,在生根液中速浸捞出，用镣子轻轻夹着插X按3cm×2.5Cm的株行距划沟杆插到床面上，深度为插X长度的1/21/3,不能倒插，插后浇透水，用多菌灵800倍液喷施消毒。7.4 插后管理托插后搭设小拱棚覆膜加盖遮阳网，控制温度1528、湿度在70虹h90%rh、光照2500LX8000LXe适当通风、喷水，保持插X叶面湿润。每7d喷一次杀菌剂，生根后结合杀菌消毒7d喷一次0.1%磷酸二氢钾和硫酸铉肥，逐步撤除遮阳网和小拱棚，降低湿度到60%rh,增加光照。8移植抚育8.1 移植当托插苗长至8cm以上时可移植到室外培育大苗，春、秋两季均可移植。将托插苗木按培养要求以10Cnl20cmX20Cm30Cm株行距进行移植培育，移植后距地面5Cnl处剪去主茎。8.2 抚育管理定期浇水、除草、松土，施肥按NY/T496执行，防病虫，农药使用符合GB/T8321和NY/T1276规定。8.3 出圃株高230cm,主枝2个以上，根系发达即可出圃。9生产档案档案内容主要包括：材料来源、外植体类型、培养基配制、植物生长调节剂使用、诱导率、污染率、增殖系数、生根率、保存率和移栽成活率等。