兴安杜鹃组培育苗技术规程.docx

杜鹃组培育苗技术规程1范围本标准规定了XX杜鹃(RhodOdendrondauricumL.)组培育苗技术的外植体采集制作、培养条件、培养基配制、组织培养、炼苗移栽和生产档案。本标准适用于XX杜鹃组培育苗。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版木(包括所有的修改单)适用于木文件。NY/T2306-2013花卉种苗组培快繁技术规程3外植体采集制作3. 1采集5月末至7月末的晴天，选择生长健壮的植株做采集母树，剪取当年生未木质化枝条水培备用，长度20Cnl30cm为宜。3. 2制作将枝条剪成带1个2个腋芽的幼嫩茎段，长度2cm3cm,去掉下端叶片，顶端叶片保留1/2。4培养条件3.1 分化诱导及继代增殖培养培养室的温度控制在25°C±3C,相对空气湿度控制在70%80%,光照强度为271ImOI加“”36molm2s',光照时间为12hd°4. 2生根培养光照时间为14hd,其他同4.1。5培养基配制4.1 培养基选择4.1.1 诱导分化培养基诱导分化培养基配方;1/4MS+GA,(1.0mgL)+TBA(0.5mgL)+蔗糖(30gL)+X脂(7gL),pH=5.4<,MS培养基配方参见NY/T23062013中附录F.1。4.1.2 继代增殖培养基继代增殖培养基配方：1/4MS+6-BA(1.0mgL)+IBA(0.5mgL)+蔗糖30g/L+X脂7.OgL,pH=5.44.1.3 生根培养基生根培养基配方：14MS+IBA(1.0mgL)+GA3(0.5mgL)+蔗糖30g/L+X脂7.0g/L,pH=5.4<,5. 2培养基制备将蒸储水、基木培养基、蔗糖、X脂混合加热溶解，再加入生长调节剂(IBA、6-BA.GA3),调节PH值，分装入水洗干燥后的培养瓶中，封口。生长调节剂配制方法参见NY/T23062013中附录H。6. 3培养基灭菌瓶装培养基应在IOh内完成高压灭菌，压力0.105MPa、温度121、灭菌20min.7. 4培养基保存灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下7d内使用，24。C条件下15d内使用。培养基应保存于洁净环境中，避光和防尘。6组织培养7.1 外植体消毒7.1.1 清洗用去污粉洗涤外植体2min3min,流水冲洗干净。7.1.2 1.2酒精处理用75%的酒精灭菌15s30s,无菌水冲洗3次。7.1.3 次氨酸钠处理用1%的次氯酸钠溶液浸泡经酒精处理的外植体，浸泡过程中不断轻摇培养瓶，浸泡IOmin15min后倒出次氨酸钠溶液，再用无菌水冲洗3次5次。8. 2接种外植体经过消毒，放在无菌滤纸上吸干水分，去掉两端损害部分，放入培养瓶中，每个培养瓶放3个4个外植体，盖上瓶盖儿，标注日期。9. 3分化诱导培养将消毒好的茎段接种到5.1.1分化诱导培养基上，待分化成高1.5Cm3cm的不定芽时进行继代增殖培养。10. 4继代增殖培养将不定芽接种到5.1.2继代增殖培养基上，待分化为3cm5cm高的丛生芽时进行生根培养。11. 5生根培养选取生长健壮的丛生芽，接种到5.1.3生根培养基上，待丛生芽基部长出3条5条主根且有二级根出现时即可进行炼苗移栽。7炼苗移栽7.1炼苗将培养瓶放置在散色光的温室内，温度控制在25°C±3°C,封口培养3d。7.2移栽7. 2.1基质准备将泥炭土+珍珠岩按1:1比例混合好装入育苗容器中，育苗容器宜选用高为8cm、口径为8cm的营养钵，用2%。的高钵酸钾溶液喷淋灭菌后备用。7. 2.2洗苗取出己生二级根的组培苗放入清水中，清洗干净根部培养基。7. 2.3移栽将洗净的组培苗移栽至已备好的营养钵中，保持根系舒展，幼苗直立，基质覆盖至组培苗基部，稍压实。7. 3管理7. 3.1温度苗期温度控制在18C28。宜用遮光度30%50%的遮荫网控制小拱棚内温度，当温度过高时，可适时通风降温。12. 3.2空气湿度采用薄膜小拱棚保持空气湿度在70%80%,当第一片新叶完全展开时，可逐渐打开薄膜降低湿度;30d后完全打开薄膜，空气湿度保持在60%70筑7.4露地栽植标准当幼苗生长健壮、株型饱满、具有完整而发达的根系、苗高在15cm25cm时，可进行露地移栽。8生产档案应建立生产档案，内容包括：材料采集、培养基配制、外植体消毒、培养条件、练苗移栽及管理等。