各论技术篇鱼类繁殖生长养成的全过程.ppt

第二篇 各 论（技术篇）,本篇根据鱼类的生物学特性，为鱼类的繁殖、生长提供必要的条件，促进鱼类生长发育。即在上一篇了解鱼类生物学的基础上，掌握鱼类繁殖、生长、养成的全过程。鱼类增养殖技术包括：亲鱼通过人工繁殖获得鱼苗，将鱼苗培育成鱼种，最后将鱼种饲养成为食用鱼。,由于养殖水体的特点和条件不同，形成了各种不同的饲养方式。比如对于小水体（池塘、水泥池等），其环境容易控制，可进行全人工集约化养殖；对于大水体（湖泊、水库、海湾等），养殖的环境不易控制，则可在小范围（如网箱、网围养鱼）开展精养，也可利用进行天然水体实行半人工粗养或鱼类增殖。,本篇介绍主要经济鱼类的人工繁殖、苗种培育技术以及食用鱼在不同水体中的饲养、增殖、捕捞和运输等技术。由于各阶段养殖要求不同，各养殖环节的目的也有所差异。比如：鱼类人工繁殖阶段的目的是提高三率：催产率、受精率和出苗率；鱼苗鱼种培育的目的是提高成活率和培养大规格鱼种；食用鱼饲养的目的是提高单位面积产量和提高经济效益。,第一章 主要养殖鱼类的人工繁殖,草鱼、青鱼、鲢、鳙、鲤、鲫、鲂、鲮等鲤科鱼类是我国主要的养殖鱼类。半个世纪以来，我国的水产养殖工作者对这些鱼类的人工繁殖技术进行了长期的研究和实践，总结出一整套行之有效的鱼类人工繁殖技术，不仅推广至全国，从根本上解决了主要养殖鱼类的苗种供应问题。,而且这一整套技术应用于名、特、优水产品（海水和淡水鱼类）的繁殖和育苗中，同样取得良好的效果。因此，本章以这些鱼类为对象，阐明鱼类人工繁殖技术。鱼类人工繁殖技术包括：亲鱼培育、催情产卵、孵化等三个部分。,第一节 草鱼、青鱼、鲢、鳙、鲮的人工繁殖,草鱼、青鱼，鲢、鳙、是我国特产的经济鱼类，是我国水产养殖的“当家鱼”，俗称“四大家鱼”，也是世界性重要的养殖鱼类。鲢、鳙、草鱼的产量分别占我国淡水鱼产量的第一、第三、第二位。,它们都是敞水性产卵的类群，在长江、淮河、黑龙江等水域中，它们均能自然繁殖（黑龙江无鳙鱼产卵场），在南方珠江等水域中，除了四大家鱼外，还有鲮鱼。它的繁殖生态要求相似，故合并在一起介绍。,一、亲鱼培育,亲鱼指已达到性成熟并能用于人工繁殖的种鱼。培育可供人工催产的优质亲鱼，是鱼类人工繁殖决定性的物质基础。整个亲鱼的培育过程都应围绕创造一切有利条件使亲鱼性腺向成熟方面发展。,（一）亲鱼的选择,1种质选择 四大家鱼在我国已有数千年的养殖历史。然而，这些重要的养殖对象还尚未形成人工选育的优质品系；从育种角度看，它们还处于野生、半野生状态，只能称为种，而不能称为品种。,不少养殖场都面临着近亲交配、逆向选择以及由此而引起的经济性状（包括生长性能、抗病能力等）衰退和基因库萎缩等问题。因此，培育鲢、鳙、草鱼、青鱼的优良品种，建立我国水产养殖苗种的生产体系已刻不容缓。,为此，全国和各省市分别建立了水产原、良种审定委员会，在农业部的支持下，目前已批准在全国建设20多个水产原、良种场。鲢、鳙、草鱼、青鱼已利用长江故道（如湖北石首天鹅洲）或夹江（如江苏邗江长江家鱼原种场）进行选育、保护和开发原种。,并已提出了草鱼、青鱼、鲢、鳙的种质标准，经国家质量技术监督局批准由1999年7月1日起执行。其国家标准编号是：草鱼，GB 17715-1999；青鱼，GB 17716-1999；鲢，GB 17717-1999；鳙，GB 17718-1999。其判别标准可测量鱼体的比例性状（见表2-1-1）。鱼类比例性状值的大小反映了物种间的差异。,如鲢体长/头长为3.66，鳙为3.23；而比例性状值方差的大小则反映了个体间的差异，如草鱼全长/体长的方差为0.02，表明这比例性状的个体间的变异较小；体长/尾柄长的方差达1.29,表明这一比例性状的个体间变异较大；选亲鱼时应特别注意体长/尾柄长这一性状。,主要养殖鱼类种质标准的建立，为实现良种生产的科学化、标准化、系列化和产业化创造了良好条件。因此，用来繁殖的家鱼亲鱼必须从原种基地引进原种后备亲鱼（或鱼种）。为保持大量的有效群体，引进的后备亲鱼必须要有较大的数量，一般每种、每批至少在200尾以上（鱼种在1000尾以上），使遗传基因在群体内起到互补作用。,在培养过程中，还必须按种质标准对后备亲鱼作进一步筛选，以获得稳定的具有优良性状的纯系。此外，养殖场必须坚持定期引进原种后备亲鱼（或鱼种），坚持杂交种不留作亲鱼，不繁育后代，以确保优良种质。,2性成熟年龄和体重 在同一水体中，年龄和体重在正常情况下存在正相关关系，即年龄越大，体重也越大；相反，年龄越小，体重也越小。但由于水域的地域气候、水质、饵料等因素的差异，同一种鱼在不同水域的生长速度就存在差异，达到性成熟的时间也不同，体重标准也不一致。,例如，生长在湖泊水库环境中的青鱼、草鱼同生长在池塘环境的青鱼和草鱼相比，同龄鱼的生长存在较大差异。湖泊3龄4龄的青鱼，体重可达5kg12kg，卵巢发育为第期，而池塘3龄4龄的青鱼，体重仅3kg8kg，卵巢发育也为第期。,从中可以看出，同种同龄鱼由于生长的环境不同，生长速度明显有差异，但性腺发育的速度却基本是一致的，证明性成熟年龄并不受体重的影响，而主要受年龄的制约。掌握这些规律，对挑选适龄、个体硕大、生长良好的亲鱼至关重要。,我国幅员辽阔，南北各地家鱼性成熟年龄相差颇大。南方成熟较早，个体较小，北方成熟较迟，个体较大；不论南方北方雄鱼较雌鱼早成熟一年（表2-1-2）。,3体质选择,选择的亲鱼要求：在已达性成熟的年龄的前题下，体重越重越好。从育种角度看，第一次性成熟不能用作产卵亲鱼，但年龄又不宜过大。,生产上可取最小成熟年龄加1至10作为最佳繁殖年龄（李思发，1997）。要求体质健壮，行动活泼，无病、无伤。鲢、鳙、草鱼和青鱼的肥满度分别为：2.180.24、2.120.36、1.960.22及2.170.31（李思发，1997）。,4雌雄鉴别,在亲鱼培育或人工催产时，必须掌握恰当的雌雄比例，因此要掌握雌雄鉴别的方法。家鱼雌雄鉴别的依据，主要从性腺发育的外观特征和副性征来判别。所谓副性征（第二性征）是指达到性成熟年龄的亲鱼体外表所显示的雌雄特征。,副性征在雄鱼体表比较明显，带有季节性的变化。但有些副性征终生存在。如在繁殖季节鉴别雌雄，最简单的方法是观察体形，成熟得较好的雌鱼腹部明显比雄鱼膨大；雄鱼腹部小，有时可挤出精液。,四大家鱼亲鱼，雄鱼的胸鳍鳍条背面特别是第一鳍条都有锥形的表皮角质化突起，用手触摸有刺手的感觉；雌鱼胸鳍无角质状突起。雄性草鱼、青鱼除了胸鳍上有副性征外，鳃盖和鳞片也有副性征的反映，形成所谓的“追星”，“追星”用手抚摸也有轻微的粗糙感。,非生殖节的雌雄鉴别主要是依据胸鳍的形状和长短来判别。一般而言，雄鱼的胸鳍狭长，雌鱼胸鳍相对较短而呈扇形。有关草鱼、青鱼、鲢、鳙、鲮的雌雄鉴别方法参见表2-1-3。,（二）亲鱼的培育,只有培育出性腺发育良好的亲鱼，注射催情剂才能使其完成产卵、受精过程。因此，发育良好的性腺是内因，注射催情剂是外因。外因必须通过良好的内因才能起作用。如果在生产过程中忽视亲鱼培育，而片面强调注射催产剂的作用，势必会由于不符合事物发展的客观规律而导致失败。因此，亲鱼培育是鱼类人工繁殖的首要技术关键，不可忽视。,1亲鱼培育池的条件,（1）位置 要靠近水源，水质良好，注排水方便；环境开阔向阳；交通便利。亲鱼培育池、产卵池和孵化场所的位置应靠近。（2）面积 以3亩5亩的长方形为好，便于饲养和捕捞。过大，水质不易掌握，且由于鱼多，往往只能分批催产，多次拉网捕鱼会影响催产效果。,（3）水深1.5m2.0m为宜。（4）底质 池底平坦，便于捕捞；并具良好的保水性；鲢、鳙鱼池以壤土并稍带一些淤泥为佳；草鱼、青鱼池以沙壤土为好，鲮鱼池以沙壤土稍有淤泥较好。,2亲鱼培育的一般要点,（1）产后及秋季培育（产后到11月中下旬）生殖后无论是雌鱼或雄鱼，其体力损耗都很大。因此，生殖结束后，亲鱼经几天在清水水质中暂养后，应立即给予充足和较好的营养，使其体力迅速恢复。如能抓紧这个阶段的饲养管理，对性腺后阶段的发育甚为有利。,越冬前使亲鱼有较多的脂肪贮存，这对性腺发育很有好处，故入冬前仍要抓紧培育。有些生产单位往往忽视产后和秋季培育，平时放松饲养管理，只在临产前一二月抓一下，形成“产后松，产前紧”的现象，结果亲鱼成熟率低，催产效果不理想。,（2）冬季培育和越冬管理（11月中下旬至翌年2月）水温5以上，鱼还摄食，应适量投喂饵料和肥料，以维持亲鱼体质健壮，不使落膘。,（3）春季和产前培育,亲鱼越冬后，体内积累的脂肪大部分转化到性腺，而这时水温已日渐上升，鱼类摄食逐渐旺盛，同时又是性腺迅速发育时期。此时期所需的食物，在数量和质量上都超过其他季节，故这是亲鱼培育至关重要的季节。,（4）亲鱼整理和放养,亲鱼产卵后，应抓紧亲鱼整理和放养工作，这有利于亲鱼的产后恢复和性腺发育。亲鱼池不宜套养鱼种。,3鲢、鳙亲鱼培育,（1）培育方式和放养密度 鲢、鳙亲鱼的培育可采取单养或混养。一般采取混养方式。以鲢为主的放养方式可搭养少量的鳙或草鱼；以鳙为主的可搭养草鱼，一般不搭养鲢，因鲢抢食凶猛，与鳙混养对鳙的生长有一定影响。,但鲢或鳙的亲鱼培育池均可混养不同种类的后备亲鱼。放养密度控制的原则是既能充分利用水体又能使亲鱼生长良好，性腺发育充分。一般的亩放养重量以150kg200kg为宜。为抑制亲鱼池内小杂鱼、克氏螯虾的繁殖，可适当搭养少量凶猛鱼类，如鳜鱼、大口黑鲈等。,主养鲢亲鱼的池塘，每亩水面可放养16尾20尾（每尾体重10kg15kg），另搭养鳙亲鱼2尾4尾，草鱼亲鱼2尾4尾（每尾重10kg左右）。主养鳙亲鱼的池塘，每亩可放养10尾20尾（每尾重10kg15kg）。另搭养草鱼亲鱼2尾4尾（每尾重10kg左右）。主养鱼放养的雌雄比例以1:1.5为好。,（2）水质管理和施肥,看水施肥是养好鲢、鳙亲鱼的关键。整个鲢、鳙亲鱼饲养培育过程，就是保持和掌握水质肥度的过程。亲鱼放养前，应先施好基肥；放养后，应根据季节和池塘具体情况，施放追肥。,其原则是“少施、勤施，看水施肥”。一般每月施有机肥750kg1000kg。在冬季或产前可适当补充些精饲料，鳙每年每尾投喂精饲料20kg左右，鲢15kg左右。现以长江流域的培育方法为代表，简述如下：,产后培育,产后天气逐渐转热，水温不稳定，这时亲鱼的体质又没有复原，对缺氧的适应能力很差，极易发生泛池死亡事故。因此要专人加强管理，每天注意观察天气和池水水色的变化情况，看水施肥，做到少施、勤施分散施，同时多加新水，勤加新水的方法。即采用“大水、小肥”的培育方式。,秋、冬季培育,入冬前要加强施肥（每周500kg左右），使水色较浓；入冬后，再少量补充施肥。如遇天气晴暖，可适当投喂精饲料。即采用“大水、大肥”的培育方式。,春季强化培育,开春后，最好换去一部分池水，将池水控制在1m左右，以利于提高培育池水温，易于肥水。适当增加施肥量，每天或2d3d泼洒一次，并辅以投喂精饲料，使鲢、鳙亲鱼吃饱、吃好。即采用“小水、大肥”的培育方式。,产前培育,临近产卵季节，鲢、鳙亲鱼性腺发育良好，对溶氧的要求更高，一旦溶氧下降，极易发生泛池事故。因此在催产前15d20d，应少施或不施肥，并经常冲水，这对防止泛池和促进性腺发育有很好的效果。即采用从“大水、小肥”到“大水、不肥”的培育方式。,总之，应根据产后补偿体力消耗，秋冬季节积累脂肪和春季促进性腺大生长的特点，采取：产后看水少施肥，秋季正常施肥，冬季施足肥料，春季精料和肥料相结合并经常冲水的措施。,4草鱼、青鱼的亲鱼培育,（1）放养密度和雌、雄比例 主养草鱼亲鱼的池塘，每亩放养7kg10kg的草鱼亲鱼15尾18尾；主养青鱼的亲鱼池，每亩放养20kg以上的青鱼8尾10尾。此外，还搭配鲢、或鳙的后备亲鱼5尾8尾以及团头鲂的后备亲鱼20尾30尾，合计总重量200kg左右。雌、雄比例为1：1.5，最低不少于1：1。,（2）草鱼的培育,采用“青料为主、精料为辅相结合投喂，定期冲水”是培育好草亲鱼行之有效的方法。无论是从生殖细胞生长发育、成熟的营养学原理还是生产实际的结果，对草亲鱼的培育，强调以青饲料为主是科学而有实际意义的，特别是在春季雌性草亲鱼卵巢中的第时相卵母细胞卵黄开始形成到时相卵母细胞卵黄积累完毕时期，投喂青饲料尤为重要。,因为青饲料中包含的各族维生素和矿物质成分，精饲料不能完全代替，恰好这些维生素和矿物质又是生殖细胞在成熟阶段所必须的。青饲料的种类主要有麦苗、莴苣叶、苦麦菜、黑麦草、各类蔬菜、水草和旱草。精饲料种类有大麦、小麦、麦芽、豆饼、菜饼、花生饼等。具体的培育方法是：,产后培育 每天午后每尾亲鱼投喂精饲料100g（干重）。青饲料每天上午9：0010：00投放，到下午4：00吃净，数量以食足不过剩为原则。秋季和冬季培育 此段时间全部用精饲料，每天每尾25g左右，每隔2d3d投喂一次。,春季强化培育,春季来临，换去一半池水，加注新水，使池塘水位保持1.5m左右。3 月开始投喂麦芽、豆饼，每天每尾50g100g。同时应尽早使用青饲料，青、精结合使用，以避免亲鱼摄食精料过多，长得过肥，影响产卵。,一般青、精料的比例以17：1为好。同时，日投饵料量也应满足亲鱼的需要。在临近催产时，草鱼亲鱼性腺发育良好时，其摄食量明显减少，此时即可停食。在整个草鱼亲鱼培育过程中，要注意经常冲水。冲水的数量和频率应根据季节、水质肥瘦和摄食情况合理掌握。,一般冬季每周冲水一次；天气转暖后，每隔3d5d冲水一次，每次3h5h；临产前15d，最好隔天冲一次，催产前几天，最好天天冲水。经常冲水，保持池水清新是促使草鱼亲鱼性腺发育的重要技术措施之一。在秋季和春季应有专人管理，加强巡塘，防止泛池事故。,（3）青亲鱼的培育,青亲鱼培育应投喂活螺蚬和蚌肉为主，辅以少量豆饼或菜饼。要四季不断食。每尾青鱼每年需螺、蚬500kg，菜饼10kg左右。其水质管理方法同草鱼。,5鲮亲鱼的培育,以施肥为主，精饲料为辅。主养鲮亲鱼的培育池每亩可放养1kg左右的鲮亲鱼（雌雄混养）120尾130尾，另搭养鳙亲鱼和部分食用鳙、草鱼，每亩放养量大约130kg左右。鲮亲鱼培育池不可搭养鲢，因两者食性相同，搭养鲢，在一定程度上会影响鲮的生长发育。,鲮的培育类同于鲢、鳙亲鱼的培育方法，以施肥为主，培养浮游生物、附生藻类等。有机肥料的一部分可作为鲮的直接饵料被利用。施肥尽量采取少施、勤施。一般每天每亩亲鱼池施放熟粪肥50kg左右，每尾亲鱼投喂豆饼或花生饼等3.5kg5kg。其水质管理同鲢、鳙亲鱼培育。,二、催情产卵,（一）催产的基本原理 池塘培育成熟的家鱼亲鱼，只有雄鱼能产生成熟的精子，雌鱼的卵巢虽然能发育到第期，但不能向第期过渡，进而在池塘里产卵。亲鱼不能在池塘里产卵，却能在自然江河里繁殖后代的原因何在？,经调查研究，实验证实，性成熟的鲢、鳙、草鱼、青鱼、鲮亲鱼一到生殖季节就成群上溯到水流湍急、宽窄相间的江（河）段，随着江河里水位突然猛涨，流速加快，形成泡漩水等自然生态条件水域产卵。,这些外界综合生态条件，通过亲鱼的外部感受器（视觉、触觉、侧线）作用于鱼的中枢神经系统，剌激下丘脑释放GnRH，进而触发雌雄鱼的垂体分泌大量GtH，经血液循环到达性腺，性腺受到GtH的作用后，迅速发育成熟，开始排卵；与此同时，分泌性激素，促使亲鱼发情而进入性活动产卵、排精，精卵结合而受精。,鲢、鳙、草鱼、青鱼、鲮亲鱼不能在池塘里产卵的原因，是因为在池塘环境条件下缺乏象自然界那样的综合生态条件的刺激，从而影响下丘脑GnRH合成和释放。当注射外源的 LRH或者LRH-A就能诱导它们发情产卵。这说明池塘饲养的家鱼其内源GnRH释放量不足。,再说，雌鱼既然能在池塘里发育，说明垂体GtH分泌细胞充实,GtH供应量能满足性腺发育的需求，但要在池塘里产卵，可能需要GtH大量分泌，达到一定的产卵阈值，方能实现产卵活动。这已被实验（姜仁良等1980；潘家秀等1981）所证实。,例如，鲢、草鱼注射LRH-A前，血清中GtH激素含量不很高，为10ng/ml左右，而在产卵时血清中GtH含量显著升高，出现一个峰值（图2-1-1），可称为产卵阈值（300ng左右/ml）。所以说，在池塘条件下，家鱼性腺不能从相对静止状态的第期迅速过渡产卵状态的第期，是由于缺乏适当的综合生态环境的刺激，因而下丘脑和脑垂体各自分泌GnRH和GtH不足所致。,由此，可采用生理生态相结合的方法，即对鱼体直接注射垂体制剂或HCG，代替鱼体自身分泌GtH的作用，或者将人工合成的LRH或LRH-A注入鱼体代替鱼类自身的下丘脑释放的GnRH的作用，由它来触发垂体分泌GtH。,总之，对鱼类注射催产剂是取代了家鱼繁殖时所需要的那些外界综合生态条件，而仅仅保留影响其新陈代谢所必须的生态条件（如水温、溶氧等），从而促使亲鱼性腺发育成熟，排卵和产卵。,（二）催产前的准备,家鱼人工繁殖生产季节性很强，时间短而集中，因此，在催产前务必做好各方面的准备，才能不失时机地进行催产工作。,1.产卵池 产卵池的设备包括产卵池、排灌设备、收卵设备（收卵网、网箱）等。产卵池一般与孵化场所建在一起，且靠近亲鱼培育池，有良好的水源，排灌方便。面积一般60m2100m2，可放4组10组亲鱼（约60kg100kg）。,形状可为椭圆形或圆形（图2-1-2，图2-1-3）。椭圆形产卵池池内往往有洄水，故收卵较慢，而圆形产卵池收卵快，效果好。目前大多数的养殖场均采用圆形产卵池。圆形产卵池用三合土结构，或单砖砌成。,直径8m10m。池底由四周向中心倾斜，一般中心较四周低10cm15cm。池底中心设圆形或方形出卵口一个，上盖拦鱼栅。出卵口由暗管（直径25cm 左右）与集卵池（长2.5m、宽2m）相连。集卵池底面比出卵口低0.2m。出卵暗管伸出池壁0.1m0.15m，便于集卵绠网的绑扎。,集卵池末端的池墙设3级5级阶梯，每一阶梯设排水洞一个，上有水泥镶橡胶边缘压盖，以卧管式排水和控制水位。进水管道一个，直径10cm15cm，与池壁切线成40角左右，沿池壁注水，使池水流转。放亲鱼前，在池的顶端装好栏网。防止逃鱼。,2催产剂的种类、功能和保存,目前用于鱼类繁殖的催产剂主要有绒毛膜促性腺激素（HCG）、鱼类脑垂体（PG）、促黄体素释放激素类似物（LRH-A）等。,（1）绒毛膜促性腺激素（Hormone Chorionic Gonadotropin，简称HCG）,HCG是从2个月4个月的孕妇尿中提取出来的一种糖蛋白激素，分子量为36000。由于它是从人类尿液中提炼而成，因此它对温度的反应较敏感。由于它是分子量大的蛋白质激素，因此反复使用，易产生抗药性。,在物理化学和生物功能上类似于哺乳类的促黄体素（LH）和促滤泡素（FSH），生理功能上似乎更类似于LH的活性。HCG直接作用于性腺，具有诱导排卵的作用；同时也具有促进性腺发育，促使雌、雄性激素产生的作用。,HCG是一种白色粉状物，市面上销售的鱼（兽）用HCG一般都封装于安培瓶中，以国际单位（I.U.）计量。HCG易吸潮而变质，因此要在低温干燥避光处保存，临近催产时取出备用。储量不易过多，以当年用完为好，隔年产品影响催产效果。,（2）鱼类脑垂体（Pituitary Gland，简称PG）,鱼类脑垂体内含多种激素，对鱼类催产最有效的成分是促性腺激素（GtH）。GtH是一种大分子量的糖蛋白激素，分子量30000左右。因此，如反复使用，也易产生抗药性。但它直接从鱼类中取得，因此对温度变化的敏感性较低。,GtH含有两种激素（即FSH和LH），它们直接作用于性腺，可以促使鱼类性腺发育；促进性腺成熟、排卵、产卵或排精；并控制性腺分泌性激素。在采集鱼类脑垂体时，必须考虑以下因素：,脑垂体中的GtH具种的特异性 不同鱼类的GtH，其氨基酸组成和排列顺序不尽相同，这种结构上的差异，导致鱼类GtH种的特异性是完全可能的。因此，一般采用在分类上较接近的鱼类，如同属或同科的鱼类脑垂体作为催产剂，效果较显著。所以在家鱼人工繁殖生产中，广泛应用鲤科鱼类如鲤、鲫鱼的脑垂体，效果显著。,脑垂体中GtH的含量，与鱼是否性成熟有关 只有性成熟的鱼类，其脑垂体间叶细胞中的嗜碱性细胞才含有大量的分泌颗粒，其GtH的含量高；反则反之。脑垂体中GtH的含量和季节密切有关 成熟鱼类脑垂体的GTH含量随生殖周期的变化呈现出极大的差距。脑垂体中GtH含量最高的时间，是在鱼类产卵前的两个月内。鱼类产过卵后，脑垂体中的GtH就基本排出，垂体也萎缩软化。,因此，摘取鲤、鲫鱼脑垂体的时间通常选择在产卵前的冬季或春季为最好。成熟雌雄鱼的脑垂体均可用于制作催产剂。脑垂体位于间脑下面的碟骨鞍里，用刀砍去头盖骨，把鱼脑翻过来，即可看到乳白色的脑垂体，用镊子撕破皮膜即可取出（图2-1-4）。,取出的脑垂体应去除粘附在上的附着物，并浸泡在20倍30倍体积的丙酮或乙醇中脱水脱脂，过夜后，更换同样体积的丙酮或无水乙醇，再经24h后取出，在阴凉通风处彻底吹干，密封干燥4下保存。常用鲤鱼的脑垂体制成催产剂。,（3）促黄体素释放激素类似物（Luteotropin Releasing Hormone-Analogue，简称LRH-A）,哺乳类的下丘脑能分泌一种作用于脑垂体的激素-促黄体素释放激素（LRH），分子量约1182，其结构为焦谷-组-色-丝-酪-甘-亮-精-脯-甘酰胺十个氨基酸组成的多肽。,目前已成功地人工合成了LRH，应用于牛、羊、猪等哺乳动物均呈现出很高的生物活性，但对鱼类的催产效果并不理想，用量要高出一般哺乳动物几百倍。虽然有大量的资料表明哺乳类的LRH结构与鱼类的 LRH 有相似性，但毕竟有差异。哺乳动物结构的 LRH对鱼类作用效率低的原因可能有以下两个方面。,第一，鱼类下丘脑LRH的一级结构与哺乳动物存在差异；第二，LRH的半衰期甚短，这是因为脑中存在破坏LRH的可溶性酶系。另外，当 LRH随血液体内循环时，又会被内脏酶系水解进一步破坏。一旦LRH构型被破坏，就随即失去活性。由于LRH不能在体内久留，从而影响了催产效果。,为了提高LRH对鱼类的催产效果，1975年我国科学工作者对哺乳类结构的LRH进行改型，将LRH第六位的甘氨酸残基和第十位的甘氨酰胺改变，分别以D-丙氨酸和乙基酰胺取代，成为一个九肽的结构，改为LRH-A。LRH通过上述改型后，生物活性提高了数十倍以上，催产效果明显改善。,LRH-A是一种人工合成的九肽激素，分子1167。由于它的分子量小，反复使用，不会产生抗药性。并对温度的变化敏感性较低。由于它的靶器官是脑垂体，即作用于脑重体，由脑垂体根据自身性腺的发育情况合成和释放适度的GtH，然后作用于性腺。因此，不易造成难产等现象发生，不仅价格比HCG和PG便宜，操作简便，而且催产效果大大提高，亲鱼的死亡率也大大下降。,LRH-A有以下功能：,剌激脑垂体释放LH和FSH 实验证明，LRH和LRH-A对人和各种动物（大白鼠、猴、鸡、羊、猪、牛、马、水貂、蟾蜍、鱼等）都有反应。微克量的外源LRH在60s之内就能引起人类的反应，一般在注射16min后，血液中LH就升至高峰，30min后血液中FSH升至高峰。血液内LH及FSH的水平增高可达注射前的l5倍20倍。,LRH-A的药效较长，高峰往往在注射后2h3h出现，LH及FSH水平维持一定的高峰可达4h6h，在体内的活性效价为LRH的10倍20倍。鱼类作LRH-A心脏灌注，2min3min之内，就能引起鱼类的反应；30min后，血液中GtH就升至高峰，血液内GtH的水平增高可达注射前的20倍左右；1 h之内效应明显下降。,LRH及LRH-A都有释放LH和FSH的双重作用，而且生物活性的指标往往是平行的，并无选择性或强弱悬殊地释放LH或FSH。这些结果有利于说明LRH是控制LH和FSH释放的同一因子。更直接的证据是，由LRH与大分子蛋白载体结合后免疫化的抗血清注射到正常大白鼠体内阻遏排卵，同时使LH和FSH高峰消失。,剌激脑垂体合成LH和FSH 以组织培养的动物垂体为材料，加入微克量的LRH就能观察到LH及FSH的释放量明显增加，垂体组织和它的培养液中的这两种激素总量超过了对照组。在培养液中加入氟标记氨基葡萄糖，显示出新合成的激素。,此外，用电子显微镜观察，在LRH作用下，大白鼠垂体促性腺激素分泌细胞的分泌颗粒增加，这也表明它的合成作用。实验证明，LRH不仅剌激LH和FSH的释放，而且还能诱导LH和FSH的合成。,剌激排卵 当天然的LRH和人工合成的LRH和LRH-A，给予各种动物（睾酮不育鼠、兔、羊、鸡、水貂、鱼等）都有明显的诱导排卵作用。,低剂量的LRH-A，能激发脑垂体合成和释放GtH，促使性腺进一步发育成熟 在催产季节，对性腺发育较差的青鱼、鲢、鳙，采用极低剂量的LRH-A进行注射预备针，具有良好的催熟作用：雌鱼卵球核象显著偏位，趋向成熟；雄鱼则精液明显增加。,这种催熟作用的效果比采用鲤、鲫脑垂体或HCG好得多。因为LRH-A能剌激自身垂体分泌GtH有关，不会造成过量分泌GtH而使卵球过熟现象出现。近年来，我国又在研制LRH-A的基础上，研制出LRH-A2和LRH-A3。,实践证明，LRH-A2对促进FSH（促滤胞成熟激素）和LH（促黄体生成激素）释放的活性分别高于LRH-A 12倍和16倍；LRH-A3对促进FSH和LH释放的活性分别高于LRH-A 21倍和13倍。故LRH-A2的催产效果显著，而且其使用的剂量可比LRH-A低10倍；LRH-A3对促进亲鱼性腺成熟的作用比LRH-A好得多。,（4）地欧酮（DOM）地欧酮是一种多巴胺抑制剂。研究表明，鱼类下丘脑除了存在促性腺激素释放激素（GnKH）外，还存在相对应的抑制它分泌激素，即“促性腺激素释放激素的抑制激素”（GKIH）。它们对垂体GtH的释放和调节起了重要的作用。,目前的试验证明，多巴胺在硬骨鱼类中起着与GRIH同样的作用。它既能直接抑制垂体GtH细胞自动分泌，又能抑制下丘脑分泌GnRH。采用地欧酮就可以抑制或消除促性腺激素释放激素抑制激素（GRIF）对下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）的影响，从而增强脑垂体GtH的分泌，促使性腺的发育成熟。,生产上地欧酮不单独使用，主要与LRH-A混合使用，以进一步增加其活性。地欧酮运用于鱼类的繁殖时间不长，对其催产效果的稳定性和安全性还有待进一步研究和实践。,（三）催产季节,在最适宜的季节进行催产，是家鱼人工繁殖取得成功的关键之一。因为雌鱼卵巢发育到能够有效催产期后，它有一段“等待”的时期，这段时期就个体来说大约是半个月，若就鱼群来说大约为一个半月。,不到这一时期，雌鱼卵巢对催产剂敏感度不高，催产效果不佳；过了这一时期，雌鱼得不到产卵的适合条件，卵巢就逐渐退化，催产效果也不会好。雌鱼等待催产这一段时期，就是最适宜的催产季节，必须集中力量，不失时机地抓好催产工作。长江中、下游地区适宜催产的季节是5月上中旬至6月中旬。华南地区约提早一个月。,鲮的催情产卵时期相对比较集中，每年5月上中旬进行，过了此时期卵巢即趋向退化。华北是5月底至6月底。东北地区是至7月上旬。催产水温1830，而以2228最适宜（催产率、出苗率高）。生产上可采取以下判据来确定最适催产季节：,根据当年的气候、水温回升情况 如果当年气温、水温回升快，催产日期可提早些。反之，催产日期相应推迟。根据当地的物候 当年当地的积温高低，对植物生长发育影响最大，因此以当地农作物生长情况作为物侯指标，能比较可靠地确定适宜催产日期。如上海地区大麦黄、青蚕豆大量上市季节，一般正是人工繁殖最适宜的时候。,根据鱼的种类特点 草鱼、青鱼、鲢、鳙的催产程序，一般是先进行草鱼和鲢，再进行鳙和青鱼的催产繁殖。根据亲鱼性腺发育情况 亲鱼培育工作做得好，亲鱼性腺发育成熟就会早些，催产时期也可早些。通常在计划催产前一个月至一个半月，对典型的亲鱼培育池（通常选择一级池）进行拉网，检查亲鱼性腺发育情况。根据亲鱼性腺发育，推断其它培育池亲鱼性腺发育情况，确定催产季节和亲鱼催产先后。,（四）亲鱼配组,1亲鱼捕捞和运送 保护亲鱼完好无伤是促使亲鱼顺利产卵受精的重要一环。因此，捕捞时必须不伤鱼体。最好用尼龙网，网目2cm左右，可避免亲鱼鳍条破裂。捕捞时网上要加盖网，盖网宽1.5m左右，以防鲢、草鱼跳出网外。拉网快慢要适中，动作要协调迅速，下水人员不宜过多，一般可由2人3人捉鱼和选鱼。捉鱼时一手轻托鱼体，一手托头部，顺水送入布夹内。,布夹应略比鱼体宽长一些，提送时布夹后端要略为提高，防止鱼从布夹后面滑出。运鱼要轻快，防止亲鱼受伤或窒息致死。性腺发育良好的草鱼亲鱼经3d以上连续的捕捞，会有性腺退化，催产效果极差的现象。故对草鱼亲鱼要尽量可能减少捕捞次数，最好一池的草鱼亲鱼一次捕尽，全部催产。,2亲鱼的选择和配组,经人工培育的亲鱼并非都能用于人工繁殖生产，必须经过选择。选择首要条件是性腺发育良好，其次是无病无伤。生产上判断亲鱼性腺发育良好与否，主要依据经验从外观上来鉴别，对雌鱼也可直接挖卵观察。,（1）外形观察,雌亲鱼可根据腹部的轮廓、弹性和柔软程度来判断。腹部膨大、柔软略有弹性且生殖孔红润的亲鱼性腺发育良好。如性腺发育好的鲢、鳙鱼，仰翻其腹部，能隐见肋骨，抬高尾部，隐约可见卵巢轮廓向前移动。,选择雌草鱼时，应停食两天。因草鱼食量大，容易给人造成腹部饱满性腺发育良好的错觉。发育良好的草亲鱼腹部较松软，腹部向上可见体侧卵巢块下垂的轮廓，腹部中间呈凹瘪状。成熟好的雌鲮鱼，腹部外观也较膨大柔软。,性腺成熟好的雄鱼，用手轻挤生殖孔两侧，即有精液流出，入水即散。若流出的精液量少，入水后呈细线状不散，说明还未完全成熟；若精液量少且很稀，带黄色，说明精巢已退化。亲青鱼的情况稍有些特别。青鱼个体大，性腺发育良好的雌鱼腹部外观不如草鱼或鲢、鳙典型。就亲青鱼而言，雌鱼只要腹部膨大或略膨大而柔软即可选用。雄鱼一般精液较少，常将精液吸出或挤出后，供人工授精用。,（2）挖卵观察,利用挖卵器直接挖出卵粒观察其发育状况。该方法直观，也比外形观察可靠。挖卵器长约20cm，直径0.3cm0.4cm，可用不锈钢、塑料或羽毛等制作而成。挖卵器头部开一长约2cm的槽，槽两边和前端锉成刀口状，便于切割卵巢。挖卵器表面要光滑，顶端钝圆形，以免取卵时损伤卵巢（图2-1-5）。,使用时，将挖卵器正确而缓缓地插入生殖孔内，然后向左或向右偏少许，稍稍用力插入卵巢4cm左右，将挖卵器旋转几下，轻轻抽出即可得到少量卵粒。挖出的卵粒可用肉眼直接观察或用透明液处理后观察。,直接观察：,将卵粒放在玻璃片上，观察其大小、颜色及核的位置。若卵粒大小整齐，大卵占绝大部分，有光泽，较饱满或略扁塌，全部或大部分核偏位，表明性腺成熟较好。若卵粒大小不齐，相互集结成块状，卵不易脱落，表明尚未成熟；若卵粒过于扁塌或糊状，无光泽，表明亲鱼卵巢已退化。,药物处理后观察：,主要用于观察卵核的偏位情况。将挖取的卵粒放在玻璃器皿或小瓷盘上，加入少许固定透明液，2min3min后，即可观察。透明液能使卵子的细胞质和卵黄先呈半透明状态，而不透明的核就很容易被区别。如果卵核偏向于卵膜边缘，称为“极化”，这是卵母细胞发育到第IV时相末的重要标志，说明已成熟，可以进行催产。过分成熟或退化卵，无核象，则催产效果差。,透明液的配方有三种：,A.85%酒精；B.95%酒精85份，福尔马林（40%甲醛）10份，冰醋酸5份；C.松节油透醇（松节醇）75份，75%酒精 50份，冰醋酸25份。,雌雄鱼配组，如果采用催产后由雌雄鱼自由交配产卵方式，雄鱼要稍多于雌鱼，一般采用1:1.5比较好；若雄鱼较少，雌雄比例也不应低于1:1。如果采用人工授精方式，雄鱼可少于雌鱼，1尾雄鱼的精液可供2尾3尾同样大小的雌鱼受精。同时，应注意同一批催产的雌雄鱼，个体重量应大致相同，以保证繁殖动作的协调。,（五）催情剂的注射,1催产剂的剂量和注射次数 准确掌握催情剂的注射种类和数量，既能促使亲鱼顺利产卵和排精，又能促使性腺发育较差的亲鱼在较短时间内发育成熟。剂量应根据亲鱼成熟情况、催情剂的质量等具体情况灵活掌握。一般在催产早期和晚期，剂量可适当偏高，中期可适当偏低；在温度较低或亲鱼成熟较差时，剂量可适当偏高，反之可适当降低。,催产剂有单一使用的，也有混合使用的。注射的剂量和混合比例以经济而有效地达到促使亲鱼顺利产卵和排精，又不损伤亲鱼为标准。注射次数应根据亲鱼的种类、催情剂的种类、催产季节和亲鱼成熟程度等来决定。如一次注射可达到成熟排卵，就不宜分两次注射，以避免亲鱼受伤。,成熟较差的亲鱼，可采用两次注射，尤以注射LRH-A为佳，以利于促进性腺进一步发育成熟，提高催产效果。如采用两次注射，第一次注射量只能是全量的10%左右，第一次注射量过高，很容易引起早产。各种催情剂的剂量和注射次数如下：,（1）促黄体激素释放素类似物（LRH-A、LRH-A2和LRH-A3）,对鲢、鳙、草鱼、青鱼、鲮等都有明显的催产效果。由于LRH-A作用于鱼类脑垂体，使脑垂体间叶释放促性腺激素，从而导致产卵排精（并非直接作用于鱼类性腺）。即使选鱼不当，也不会发生象注射脑垂体抽提液或HCG那样，因鱼不产卵而卵巢吸水膨胀而死亡的现象，故对保护不产亲鱼有良好的作用。,鲢、鳙：单一使用LRH-A 剂量为10g/kg（以每kg鱼体重为计算单位，下同）。但使用二次注射效果更好。具体方法有三种：第一次注射LRH-A或LRH-A3 1g2g/kg，放回原池或预产池经1d3d后进行第二次注射，注射量为10g/kg。此法可较好地起到催熟（核极化）的作用，催产率高而稳定。,LRH-A与HCG（或脑垂体）混合使用，剂量为LRH-A 10g/kg+HCG 800I.U./kg1000I.U./kg（或脑垂体0.51.0mg/kg）。第一次注射LRH-A 1g/kg2g/kg，针距12h；第二次注射LRH-A 8g/kg9g/kg+HCG 800I.U.1000I.U.（或脑垂体 0.5mg/kg1.0mg/kg）。,第一次注射LRH-A 5g/kg+DOM 0.5mg/kg体重，针距8h，再注射HCG 800 I.U./kg）。雄鱼在均为末次注射,注射时剂量减半。草鱼：对LRH-A反应灵敏，效应时间稳定；故一次注射LRH-A 5g/kg10g/kg，效果很好，不需要采用二次注射。雄鱼剂量减半注射。,青鱼：由于其个体大，要求饵料条件较高，性腺发育成熟度往往较差。故一般采用二次或三次注射。二次注射 第一次注射采用LRH-A3 1g/kg3g/kg，针距24h48h；第二次注射LRH-A 20g/kg+DOM 5mg/kg或LRH-A 7g/kg9g/kg+垂体1mg/kg2毫克/kg。雄鱼如性腺发育欠佳，可用同一剂量。,三次注射 在催产前15d左右每尾注射LRH-A3 5g（生产上称打预备针）；第二针注射LRH-A 5g/kg；12h20h后注射第三针，剂量为LRH-A 20g/kg+DOM 5mg/kg或LRH-A 10g/kg加脑垂体1mg/kg2mg/kg体重。雄鱼在末次注射,注射雌鱼的一半剂量。如果雄鱼成熟度较差，挤不出精液，可与雌鱼同样打预备针，剂量与雌鱼相同。鲮：亲鱼为LRH-A 30g/kg50g/kg，雄鱼减半。,（2）鱼类脑垂体（PG）,对鲢、鳙、草鱼、青鱼、鲮催产效果都很显著，其剂量为脑垂体干重3mg/kg5mg/kg，相当于体重0.5kg左右的鲤脑垂体3个5个，或体重1kg2kg的鲤脑垂体1个2个或鲫脑垂体8个10个（鲫体重约0.15kg）。,（3）绒毛膜促性腺激素（HCG）,对鲢、鳙催产效果好，其剂量为800I.U./kg1200I.U./kg。在繁殖早期剂量可适当提高，繁殖盛期剂量应稍低。剂量过高既浪费药物，同时易产生HCG抗体，会影响以后的催产效果，对鱼有害无益。,在两广地区，产过卵的亲鱼经40d70d的良好培育，还可进行第二次繁殖。第二次催产以采用脑垂体抽提液或脑垂体与LRH-A混合剂效果较佳。剂量同上述。,2.注射液的配制,鱼类脑垂体、LRH-A和HCG，必须用注射用水（一般用0.6%氯化钠溶液，近似于鱼的生理盐水）溶解或制成悬浊液。注射液量控制在每尾亲鱼注射2ml3ml为度，亲鱼个体小，注射液量还可适当减少。应当注意不宜过浓或过稀。过浓，注射液稍有浪费会造成剂量不足；过稀，大量的水分进入鱼体，对鱼不利。,配制HCG和LRH-A注射液时，