【教学课件】第二节蛋白质的越膜运输.ppt

第二节 蛋白质的越膜运输,一.蛋白质的定位装置 蛋白分检（Protin sorting）蛋白质的运输（trafficking）二.导肽(（Leader sequence）)核糖体可分为游离的和膜结合的两类翻译后转运（post-translation translocation）共翻译转运（co-translatonal rtanslocation）信号肽(signal sequence)整合膜蛋白（integral membrane protein）,三导肽的结构和功能,导肽通常是疏水的，20aa由非电负性氨基酸构成，中间夹有碱性氨基酸，而没有酸性氨基酸，羟基氨基酸含量高易形成双亲螺旋轮（amphiphilic helix）;不同的前导顺序缺乏同源性，意味什么？这意味着和识别有关的信号不是一极结构的序列，而是氨基酸的性质。,四导肽在线粒体叶绿体中决定蛋白位,(一)线粒体的蛋白转运 基质导向信号（matrix-targeting signal）膜导向信号（membrane-targeting sigmal）(二)叶绿体蛋白的转运 基质（stroma）类囊膜（thylakoid membrane）腔（lumen）(三)核蛋白的转运 输入和输出,(基质),（类囊体）,五信号肽的结构和功能,(一)信号假设的建立1972年Milstein等发现IgG 轻链前体比成熟的Ig N-端多20 aa美国Bloble完成三项实验支持了以上推测：（1）将IgG的mRNA在无细胞系统中，以游离核糖体在体外合成的是IgG前体；若在无细胞系统中加入狗胰细胞的RER，就能产生IgG成熟蛋白。成熟的IgG轻链蛋白和前体蛋白相差疏水性20aa，说明什么？,（2）加入蛋白水解酶不能使正在合成的IgG水解，而同时加入去垢剂就可以使其水解。此表明什么?（3）用去垢处理骨髓瘤后所获得的多核糖体与膜分离，然后在离体的条件下继续进行新生肽的合成。经短时温育得到的是成熟的IgG，而长时温育得到的是前体IgG，此表明什么?,5 3,SRP 7S RNA的两个功能域,细菌中蛋白质的越膜转运,核蛋白的转运,入境：Histones Nonhistones Ribosomal proteis(核蛋白体蛋白)出境：Ribosomal subunit mRNA,出入核的多种途径1.自由途径2.渗透途径3.信号途径,核定位信号,帽接合复合体,核输出信号,具有输出和输入信号的蛋白,载体,载体,载体蛋白和底物结合，带底物穿过核孔，然后返回核中，循环使用。,核定位信号,多形瘤 T 抗原,核定位信号（NLS）具有碱性的残基,卵核质蛋白,NLS的特点：,1.无保守序列；2.有一段短的碱性氨基酸序列；3.常存在Pro,可抑制碱性氨基酸的上游形 成螺旋；4.有的NLS有两个分开的短的簇5.所有的NLS序列都可被“入境”系统所识别。,“入境”分二步：停泊，移位,转位的成分,核蛋白,核孔,胞质成分,入境蛋白,核相关蛋白-GTP,核孔,停泊,入境蛋白-结合核蛋白,入境蛋白-结合底物,移位,核孔,GTP和Ran的结合状态控制核蛋白是“进”还是“出”,Nuclear export signal,Nuclear localization signal,从核转移到胞质中的蛋白的共同特点是存在一NES(10aa的信号),一个亚基上的NES可使另一个蛋白从核中转运出,带有一个NES的蛋白可使一个RNA从核中转运出,cAMP依赖性蛋白激酶,