《Waters液相》PPT课件.ppt

Waters液相色谱系统,基本配置,配套一：最简单系统,部件号 部 件 名 称 数量207000515 泵 1025248Rheodyne 7725进样器（组件）1081110 2487双通道可调波长紫外检测器 1096146 起动工具包 1*086344 NovaPak 碳18柱1054100 746 积分仪 1*选件，可以不要*可配其他种类数据处机,配套二：简单梯度系统,部件号 部 件 名 称 数量062710 600 泵 1024838 Rheodyne 7725 进样器（600用）1081110 2487双通道可调波长紫外检测器 1096146 起动工具包 1*086344NovaPak 碳18柱1054100746 积分仪 1*选件，可以不要*可配其他种类数据处理机,配套三：高压梯度系统,部件号 部 件 名 称 数量207000 515 泵 2025248 Rheodyne 7725 进样器（组件）1 051518 梯度混合器 1081110 2487双通道可调波长紫外检测器 1086344 Nova-Pak 碳18柱1042990 Millennium 32 色谱管理系统 1 Add-On Kit（单系统）需要另配计算机200314PCM（泵控制器）1,配套四：低压梯度系统,部件号 部 件 名 称 数量062710600 泵 1024838 Rheodyne 7725 进样器（600用）1086344 Nova-Pak 碳18柱1081110 2487双通道可调波长紫外检测器 1042990 Millennium 32 色谱管理系统 1 Add On Kit（单系统）需要另配计算机,Millennium32 对计算机的要求,带软驱（1.44M）及光驱（8倍以上），鼠标及键盘的计算机。CPU要求在：Pentium III 800以上，最好是Pentium II 233 以上内存要求：对于Windows NT 操作系统，128M 或以上对于Windows 2000 操作系统，128M 或以上显示卡及荧光屏要求：分辨率1024 768（至少 800 600），256色硬盘要求：10G以上,配套一至四：配其他检测器,配2414时可直接加在上述所有配套中，但是在配套一及二中（要共用数据处理系统）432，464及2475等检测器可直接配在配套一及二中（共用数据处理系统）432及464等检测器配在配套三及四需加SAT/IN（P/N=WAT200415）2996（光电二级管矩阵检测器，PDA）可加在任何配套中，但是需要配置 Millennium32用低反压色谱柱时（如离子色谱、GPC）需要配高灵敏度噪声滤除器（P/N=025200），但是：515及2690除外,配套一至四：配自动进样器,717plus自动进样器可以直接取代7725i进样器。717plus标准配置中：有4ml样品盘、样品瓶。标准配置：不锈钢、1600L体积，还可选配：P/N 55872PEEK Std Vol.Tubing Kit、620 LP/N 55858PEEK Low Vol.Tubing Kit、400 LP/N 55886S.S.Low Vol.Tubing Kit、620L微量进样（如作氨基酸分析）需在4ml样品瓶内加小内瓶（选一种）及弹簧：015199 小瓶（Glass Conical Inserts，250L）072704 小瓶（250L），比上一种的死体积更小072708 弹簧（Compression Springs）,常用的配件（一）,075215 TEE 三通可取代梯度混合器（051518），但效果不好。085102溶剂过滤装置，带滤膜及真空泵如不想要真空泵，用：085124026865水溶性样品过滤装置（带膜）单配膜：水溶性样品过滤膜（026872）026870 脂溶性样品过滤装置（带膜）单配膜：脂溶性样品过滤膜（026874）,常用的配件（二）,用于Rheodyne 7725的进样针：10l-(033380)，50l-(033382)，100l-(033383)250l-(033384)，500l-(033385)用于Rheodyne 7725的定量环：5l-(096223)，10l-(007041)，20l-(096224)50l-(096225)，100l-(096226)注-Rheodyne 7725的基本配置025248-（独立式，一般用于515泵）带启动装置，预装20l定量环，独立支架，5l/50l/200l定量环各一个，25l进样针一只024838-（600泵用）带启动装置，预装20l定量环，600泵面板，5l/50l/200l定量环各一个，25l进样针一只,常用的配件（三）,1升溶剂瓶-032750柱塞杆清洗装置100l泵头用：031870225l泵头用：030852（510、600用）,配套五：Alliance系统,包括溶剂及样品管理（即泵及自动进样器）系统，只需加检测器及数据处理。注意其他选件需根据不同的部件号一次配齐，不能单独配部件号2695+柱塞杆清洗2708802695+柱塞杆清洗+柱温箱2710092695+柱塞杆清洗+脱气机2708862695+柱塞杆清洗+柱温箱+脱气机271013 2695+柱塞杆清洗+进样器控温270008 2695XE 270012,配套六：650蛋白提纯系统,M650非金属蛋白提纯系统 0883522487双通道可调波长紫外检测器 081110650的自选部件：SE120 双笔记录仪 040307Waters馏份收集器 II 725000126馏份收集器的切换阀（可选件）7250001422487惰性池 0811572487半制备池（作制备时用）081158相应的色谱柱（玻璃）：离子交换柱（HR：DEAE/SP/Q/CM）凝胶柱（分子量不同）,650的特点,生命科学特殊用途的配套全流路非金属，其优点在于：可用腐蚀性较强的缓冲液，如NaCl等，一般来说，金属HPLC系统(包括不锈钢及钛合金)不能用卤素作为流动相可防止有生物活性的样品失活因系统耐压较低（500750psi），一般不用反压较高的（如C18）色谱柱，适合于做蛋白分析因其流速可以较大（045ml/min），常用于作蛋白的纯化,配套七：M626非金属系统,M626非金属系统 055383 Rheodyne 9725进样器(626专用)055030 2487双通道可调波长紫外检测器 081110 特点应用范围与650相近，但是可以耐较高的反压，可使用反压较高的色谱柱，如C18注意626的流量小（05ml/min），不适合大量的提纯蛋白的在客户要求。626是低扩散系统，可用于窄柱及微柱的分析，如应用于多肽分析、肽谱、核酸分析等领域。,配套八：Carbohydrate分析,配套七(不必用紫外检测)加以下部件后可成为碳水化合物分析仪。主要用于高灵敏度碳水化合物(糖)的分析，比普通示差检测器高20倍左右。一般用在生命科学中糖蛋白中糖的分析。464电化学检测器 WAT031444SS分析池及抽屉组件 WAT031930碳水化合物分析电极组件 WAT031926包括：金电极，耐碱性参比电极SSI柱后衍生泵系统 725000108碳水化合物分析系统启动组件 WAT031928包括：NOVA-PAK C18柱（3.975mm），RXN1000反应管及手册等。,临床及血药浓度测定,医院的血药浓度测定，按实际情况可使用除配套七（650）外的其他配套一般用紫外检测器有时需要M2475荧光检测器，以提高灵敏度多数情况下不需要梯度医院使用的特殊配套（见后面）：配电化学检测器（464）做儿茶酚胺做生理（游离）氨基酸,配套九：Catecholamine,用等度HPLC系统，再加上以下部件：464电化学检测器031444SS分析池及抽屉组件031930神经传递物质分析电极组件031927包括：玻璃碳电极，标准Ag/AgCl参比电极Symmetry C8 柱，3.9150mm046980Catecholamine（儿茶酚胺）分析常用于：医院，是电化学检测器的主要应用之一,生理及蛋白水解氨基酸分析,Waters推荐使用AccQ-Tag方法做蛋白水解氨基酸的分析。因为：AccQ-Tag对仪器及实验者的要求都相对较低而且灵敏度较高，如用474扫描荧光检测器（配16l流动池的那种）灵敏度会更高而Pico-Tag法仅作为生理氨基酸分析的方法对仪器及实验者的要求较高，特别是衍生较费事但是其分析速度极快：水解氨基酸仅12分钟，生理氨基酸65分钟衍生剂（PITC）相对便宜各种氨基酸分析的方法均建议用自动进样器,配套十：生理（游离）氨基酸,配套三（高压梯度系统）或Alliance加以下部件后可成为PICO-TAG生理氨基酸分析仪。007600 PICO-TAG 衍生工作台（只能衍生）1需用户自配真空泵（4升以上）015772 PICO-TAG 管组件（真空泵用）1 038039 柱控温系统 1 084560在线过滤器 1097332Union 2接下页,生理（游离）氨基酸分析-续1,010950 PICO-TAG FAA 柱1*088120 PITC试剂1*088121 三乙胺1*010948 酸性/中性氨基酸标样1*010949 碱性氨基酸标样1*007363 反应瓶（配007370用）1 007571 试管（75支）1 088140 PICO-TAG 手册 1 第一次购买时需要订购分析套件，WAT091681有*号的部件已包含在组件（WAT091681）中，第一次购买时不需要,生理（游离）氨基酸分析-续2,Waters要求第一次购买做生理（游离）氨基酸分析的配套时用一个组件（Kit）：“Pico-Tag Free Amino Acid Analysis Chemistry Package”的部件号为：WAT091681便于安装调试及验收。因其流动相的配制精度要求极高，万一用户的pH计不好，会造成验收不通过注：在美国，流动相（Eluent 1及 Eluent 2）的配方保密。在中国我们可以提供给用户。在以后的分析时，我们也推荐用户尽量使用Waters提供的这两种流动相。注意：Pico-Tag方法在开发时用的标准氨基酸与现在所提供的不同，新的标样多了几种氨基酸，其中Anserine（鹅肌肽）的峰夹在1-MT及2-MT峰中，很难完全分离，因此不能保证这三个色谱峰的完全分离,配套十一：AccQ-Tag氨基酸,配有紫外检测器的梯度系统加以下部件后可成为AccQ-Tag氨基酸分析仪。部件号 部 件 名 称 数量 038039 柱控温系统（用于515系统）1或062079 柱温箱（用于600系统）1038121 金属板（用于加热箱038039内，选件）1 084560 在线过滤器1097332 Union2047400 474扫描荧光检测器（配16l流动池）1推荐配置，以提高灵敏度072215 0.009”3 SS管（红管）1如用手动进样器（7725 w/200l loop），需配 2 根,AccQ-Tag Chemistry Package,第一次购买要求配用AccQ-Tag化学品包，以后可分别购买，其中流动相可自己配制WAT052875，最多可分析250样品，包括：052880AccQ-Fluor Reagent Kit1052885AccQ-Tag 柱，3.9mm150mm1052890 950mL AccQ-Tag 流动相A浓液2007571 Sample Tubes，72/pkg.4088122水解蛋白氨基酸标样1052874AccQ-Tag 手册1,配套十二：Pico-Tag氨基酸分析仪,配有紫外检测器的梯度系统加以下部件后可成为Pico-Tag氨基酸分析仪，分析蛋白水解氨基酸007370 PICO-TAG 水解衍生装置 1需用户自配真空泵（4升以上）015772 PICO-TAG 管组件（真空泵用）1 038039 柱控温系统（用于515系统）1 038121 金属板（加热箱内用，选件）1 062079 柱温箱（用于600系统）1084560 在线过滤器1097332 Union2088131 PICO-TAG 柱 1,配套十二：Pico-Tag（续）,088123 PICO-TAG 试剂组件，包括三种试剂1088120 PITC试剂088121 三乙胺088122 水解蛋白氨基酸标样007363 反应瓶1在007370中已有4只，可作为备件用007571 试管（75支/包装，可多配一些）1 088140 PICO-TAG 手册 1 如用手动进样器，加配兰管及红管，如用600E泵不用兰管，要两只红管072214 0.040”3 SS管（兰管）1072215 0.009”3 SS管（红管）1,环保,环保领域包括很广，除中央及各省专门的环境监测中心、环保研究所外，各部、委及各大型企业也都有自已的环保机构例如：大油田、炼油厂、大钢厂、电厂等分析内容基本一样以离子和有机多环芳烃为主分析离子时，应强调一定要有高纯水的来源，否则要配超纯水器,配套十三：离子色谱系统,普通液相色谱（推荐非金属系统：M626），加以下部件即可为离子色谱 部件号 部 件 名 称 数量043061 M432 电导检测器1007355 IC-PAK 阴离子交换分析柱1推荐用026770，高容量柱（HC）036570IC-PAK CM/D 阳离子分析柱1007357IC-PAK 阴离子保护柱芯1044250IC-PAK CM/D 阳离子保护柱芯1需配用保护柱套：088141，Guard-Pak Holder025200高灵敏度噪声消除器1626、515及2690除外,配套十三（续）：离子样品的浓缩,如果要求灵敏度较高（ppb级），需要做浓缩，在离子色谱的基础上再加088719柱切换阀(非金属)1或用：060057柱切换阀(金属)022986独立式痕量富集泵1088141保护柱支架(装富集柱用)1007358IC-PAK 阴离子富集柱1010565阳离子富集柱1注：除高灵敏度分析NO2及NO3外，可不用紫外检测器,配套十四：过渡金属分析,配置紫外检测器的色谱系统，加柱后衍生可分析Cu+2/Pb+2/Zn+2/Ni+2/Co+2/Cd+2/Fe+2/Mn+2，达到低ppm级水平柱后衍生泵系统 725000108 Delta-Pak C18，5分析柱 WAT011795配置紫外检测器的色谱系统，加色谱柱及试剂可分析Cu+2/Ag+/Fe+2/Co+3/Fe+3/Au+/Pd+2/Pt+2的腈络合物（Cyano），达到微克级（g）水平Nova-Pak C18，4 分析柱WAT086344PIC 试剂（LOW UV A），5 Vial/pkg WAT084189,配套十五：稀土元素的分析,配置紫外检测器（检测波长658nm）的梯度色谱系统，加柱后衍生可分析镧系元素，达到低ppm级水平柱后衍生泵系统 725000108 Resolve C18，5 径向加压柱 WAT084624810 Holder，径向加压装置 WAT082887,配套十六：多环芳烃分析（PAH）,要求：配有紫外检测器、带有梯度的液相色谱系统。如果需要高灵敏度分析，应再选用2475荧光检测器色谱柱 选专用PAH柱，可分析EPA所要求的全部16种PAH化合物 选Spherisorb ODS2柱(4.6250mm，PSS831915)分析其中部分的PAH化合物，如国内要求的3,4-苯并芘等7种化合物,样品前处理小柱（Sep-Pak）,做PAH一般都需要Sep-Pak C18小柱做浓缩 可选SepPak C18 Classic(P/N=051910)，国内用户多用此种，这是传统的SepPak小柱，或选SepPak Vac C18，即针管式，使用方便、价格相对较低，填料量从小(50mg)到大(10g)可选择 或选新型三键键合tC18小柱，适用于酸性样品(如酸雨等环境样品)的前处理，空白本底低而灵敏度高036810，SepPak tC18 Plus，普通样品分析，填料量400mg036805，SepPak tC18 Light，小量样品分析，填料量145mg036800，SepPak tC18 Environment，大量样品分析 填料量900mg新型三键键合tC18小柱同样提供Vac型小柱,Sep-Pak样品前处理装置,20位置SepPak样品制备装置，带不同大小收集样品试管架的部件号不同带13mm75mm试管架WAT200606带13mm100mm试管架WAT200607带16mm75mm试管架WAT200608带16mm100mm试管架WAT200609不带试管架WAT200677除Oasis外均需加配Needle ValvesWAT200685 接头(Adapter)，用不同类型的SepPak，要配不同的接头配Classic SepPak小柱，WAT024310配针筒式(1，3及6毫升)Vac SepPak小柱，WAT054260配针筒式(12，20及35毫升)Vac SepPak小柱，WAT048160Plus型SepPak小柱不需要配Adapter,配套十七：Carbamate分析,氨基甲酸酯专用分析系统包括在2695E泵基础上改进的流路，控制器RXN 1000反应管，CHEX 热交换器，试剂连接件，启动套件Carbamate Analysis Column 3.9mm x 150mm(035577)柱温控制系统(Column Temperature Control System)2475荧光检测器，带5L流动池需另配数据处理系统做实际样品时，需要配Nova-Pak C18保护柱及相应的柱套。,配套十八：GPC Cleanup系统,用于环境样品的前处理，是EPA的标准方法。样品经该系统处理分类之后，用于GC、GC-MS、HPLC等的分析207000 515 泵 1078900*717 Plus 自动进样器1077342*2500L Syringe 进样针组件(717用)1036212*5mL Sample Loop 定量管(717用)1以上三项（717自动进样器）可用3725i手动进样器代替0811102487双通道可调波长紫外检测器 1725000126Waters Fraction Collector II1725000142Diverter Valve(WFC II)1036555*Envirogel GPC Cleanup(19 x 150mm)1036554*Envirogel GPC Cleanup(19 x 300mm)1两根色谱柱串联使用,食品、饲料、化妆品分析,一般仪器配套都可满足有两个方面的工作：营养氨基酸（同生化）糖有害物质金属（同离子色谱）黄曲霉素有时，在食品、饲料等的分析中会用到荧光检测器（M474）测定微量成份,配套十九：糖的分析,在一般液相色谱（不需梯度）上，加0539582414示差折光检测器1038040 柱温箱（由2414控制）1097332Union2色谱柱（1）：分析单糖、糖醇、乙醇等。主要用于药厂中维生素C的原料分析（山梨醇、甘露醇），酒厂（葡萄酒、啤酒等）的糖及乙醇含量分析。要求用户另置超纯水系统。Sugar-Pak I085188Sugar-Pak 保护小柱(10只)015209Guard Pak 保护柱套088141,配套二十：糖的分析(续),色谱柱（2）：同Sugar-Pak I，柱是Shodex产品。要求用户另置超纯水系统。SC1011 Shodex034238SC1011 保护柱 034244色谱柱（3）：分析单糖、多糖及三糖等多糖的分析，最大到DP10。主要用于食品中糖的分析。High Performance Carbohydrate cartridge 044355*Carbohydrate Guard 保护柱（2只装）046895*需要Cartridge柱套，P/N=037525*需要Sentry Guard保护柱套（整体式），P/N=46905,配套二十一：黄曲霉毒素分析,在一般液相色谱（不需梯度）上，加2475扫描荧光检测器（w/16L Cell）反应管（RXN 1000）030844Union（需要两个）097332柱后衍生泵系统 725000108Nova-Pak C18 086344Sep-Pak C18 051910Sep-Pak Amino Propyl（NH2）010830,石油、化工,有三大类 石油主要是烃分析仪 高分子凝胶色谱（GPC）聚合物添加剂的分析 精细化工染料、试剂、农药等除GPC外，通用型液相色谱即能满足要求,配套二十二：烃分析仪,用单泵系统，加示差折光检测器及柱温箱2410示差折光检测器053958柱温箱038040数据处理系统任意色谱柱氨基柱084040或/及硅胶柱010025有些情况下要配柱切换阀060057用做族组成分析,凝胶色谱仪的配置,常温GPC用单泵、带柱温箱及控制的系统，GPC对流速精度要求极高，因此2695是最好的选择示差检测器（2414）凝胶色谱柱Millennium32数据处理系统，加GPC选件作标准曲线用的标样，取点越多越好。至少多于标准曲线次方数一个点Breeze GPC 系统高温GPC-只需加色谱柱及标样,配套二十四：GPC分析,在一般配有Millennium32的液相色谱（不需梯度及紫外检测器）上，加2414 示差折光检测器P/N=053958 柱加温箱（室温-150）P/N=038040高灵敏度噪声滤除器P/N=025200Breeze、515及2695不需要 Millennium32 GPC选件P/N=2800702695作GPC用时要带脱气机的，P/N=270886不能用2695的柱温箱（因太小），而应该用2414的柱温箱，同上面的配置一样另外2695还需要专用的GPC选件，P/N=270943,*Alliance GPC 2000 系统，带有监视器，键盘和鼠标，系统控制软件，Millennium32基本软件，GPC或GPCV软件选件，操作者文件和启动包,配套二十五：高温GPC配套,普通高温GPC系统 176806001Alliance GPC 2000 System包括Millennium32 GPC s/w*带粘度检测器的高温GPC系统 176806002Alliance GPCV 2000 System包括Millennium32 GPCV s/w*,