《黄酮类化合物》PPT课件.ppt

第六章 黄酮类化合物Flavonoids,第一节 结构与分类,（一）基本结构1、定义：泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。6C3C6C,一、黄酮苷元的结构分类,天然黄酮类化合物母核A、B环上常有羟基、甲氧基等取代基。根据黄酮母核中C环氧化的程度、是否开环、B环连接特点，可将黄酮类化合物分为以下几类：,黄酮及黄酮醇类,二氢黄酮与二氢黄酮醇类,查耳酮和二氢查耳酮类,异黄酮和二氢异黄酮,橙酮类,双黄酮类,花色素类,黄烷-3-醇类,其他黄酮类,（一）黄酮及黄酮醇类flavones flavonols,结构特点：C环为吡喃酮结构，B环与C2位相连，黄酮醇C3位有羟基取代。,如：金银花,木犀草素（luteolin）：存在于忍冬藤、菊花、金银花、浮萍中，具有抗菌作用。,如：黄芩,黄芩为清热解毒类中药，抗菌成分主要有黄芩苷（baicalin)、次黄芩素（wogonin）等。,槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用。,芦丁(rutin)是槲皮素的-O芸香糖苷。用于治疗毛细管脆弱引起的出血病，并用作高血压的辅助治疗剂。,豆科植物槐米中含有芦丁和槲皮素,（二）二氢黄酮与二氢黄酮醇flavanones flavanonols,结构特点：C环C2、C3上的双键被氢化饱和。,甘草苷（liquiritin）：具有溃疡抑制作用；,橙皮苷（hesperidin）是治疗高血压和心肌梗塞的药物，医药工业中用作制药的原料，是中成药脉通的主要组成之一。,水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的黄酮木脂素类成分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。,（三）查耳酮类（chalcones）,结构特点：C环开环，为苯甲醛缩苯乙酮衍生物，碳原子编号也与其他黄酮类不同。,查耳酮主要分布于菊科、豆科、苦苣苔科植物中，其邻羟基衍生物（2-OH查耳酮）是二氢黄酮的异构体，在酸、碱或酶催化下能相互转化，故在植物界查耳酮往往与相应的二氢黄酮共存。,菊科植物红花,红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植物成分。,红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠呈深黄色；开花后期或采收干燥过程中由于酶的作用，氧化成红色。,（四）异黄酮和二氢异黄酮类,结构特点：B环连接在C3位上，为3苯基色原酮，C2、C3以单键相连的为二氢异黄酮。（主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。）,葛根主要含有下列几种异黄酮类成分：,葛根中黄酮类化合物的作用：葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头痛等症状。,具有抗癌活性的中药广豆根中含有的紫檀素、三叶紫檀素苷和高丽槐素属于二氢异黄酮类衍生物。,（五）橙酮类,结构特点：可看作是黄酮的C环分出一个碳原子变成五元环，其余部位不变。是黄酮的同分异构体，属于苯骈呋喃的衍生物，又名奥弄。,橙酮在中药中不多见，主要存在于玄参科、菊科、苦苣苔科及单子叶植物莎草科中。如在黄花波斯菊花中含有的硫磺菊素就属于此类。,（六）双黄酮类,结构特点：二分子黄酮衍生物通过CC键或COC键聚合而成的二聚物。多分布于裸子植物中。银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。,（七）花色素类(anthocyanidins),又称花青素，是一类以离子形式存在的色原烯的衍生物。是形成植物蓝、红、紫色的色素。,植物中存在的花色素有矢车菊素、飞燕草素、天竺葵素等以及相应的苷。,（八）黄烷-3-醇类,结构特点：黄烷醇类生源是由二氢黄酮醇类还原而来，可看成是脱去C4位羰基氧原子后的二氢黄酮醇类。,黄烷-3-醇在植物界分布很广，大多是缩合鞣质的前体，如：儿茶素类，具有一定的抗癌活性。黄烷-3、4-二醇衍生物又称为无色花色素类，这类化合物常可聚合而具有鞣质的性质。,（九）其他黄酮类,1、讪酮：基本结构为苯并色原酮（双苯吡酮），是一种特殊类型的黄酮类化合物，如石韦、芒果叶及知母叶中都含有的止咳祛痰成分芒果苷和异芒果苷。,2、高黄酮类：基本结构为苯甲基色原酮，C环与B环间多了一个-CH2-；如中药麦冬中的麦冬高异黄酮A。,三、黄酮类化合物的生物活性,1.对心血管系统的作用 Vp样作用：芦丁、橙皮苷等有Vp样作用，能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。降血脂及胆固醇：木樨草素,芦丁片 芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化妆品。,2.抗肝脏毒作用 从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。（+）-儿茶素(catergen)也可抗肝脏毒作用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝损伤。,水飞蓟片 本品为菊科植物水飞蓟（紫花）Silybum marianum(L)Gacntm的果实，经提取精制所得的淡黄色粉末，或结晶性粉末。无味、无臭、易溶于丙酮、模酸乙酯、乙醇及由醇、难溶于氯仿，不溶于水，主要化学成份为水飞蓟宾（Silybin)C25H22O10及其异物等黄酮类物质。功能与主治：本品具有保肝及降血脂作用，用于治疗慢性肝炎，早期肝硬变、代谢中毒性肝损伤及高血脂症。,3.抗炎 芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具抗炎作用。4.抗菌及抗病毒作用 如木樨草素、黄芩苷、黄芩素,5.解痉作用 异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛；大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羟基芫花素：止咳祛痰。,6、雌性激素样作用 大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。7.清除人体自由基作用 黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧特点。另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样硬化及抗癌抗突变等作用。,第二节 理化性质,一、性状1、多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）无定形粉末。2、旋光性（1）游离的各种苷元母核中，除二氢黄酮（醇）、黄烷（醇）有旋光性外，其余无光学活性。（2、3位无双键时，具有旋光性）（2）苷类具有糖分子，均具有旋光性，一般为左旋。,二旋光性：,旋光性 取决于 不对称碳原子的有无 有 无 所有黄酮苷（糖）游离黄酮 游离黄酮 黄酮 二氢黄酮 黄酮醇 二氢黄酮醇 异黄酮 二氢异黄酮 查耳酮（二氢）黄烷醇类 橙酮 花色素类等（2-位）（2，3-位）（无）,3、颜色：与分子中是否存在交叉共轭体系及助色团（如-OH、-OCH3等）的种类、数目以及取代位置有关；色原酮部分原本无色，但在2位引入苯环后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。,交叉共轭体系：两组双键互不共轭，但分别与第三组双键共轭。,有 交叉共轭体系 无黄酮（灰黄黄色）二氢黄酮黄酮醇（灰黄黄色）二氢黄酮查耳酮（黄橙黄色）二氢查耳,花色素类（颜色随pH而改变）黄烷醇类 异黄酮（无或微黄色）红色（pH 8.5）,二、溶解性,黄酮类化合物的溶解度因结构及存在的不同而有很大差异。1）苷元：难溶于水，易溶于有机溶剂（甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮）及稀碱水中；1、黄酮（醇）、查耳酮等平面性强的分子，使分子与分子间排列紧密，分子间引力较大，更难溶于水；,2、二氢黄酮及二氢黄酮醇等，无交叉共轭体系，由于吡喃酮环已被氢化成为类似于半椅式结构，破坏了分子的平面性，为非平面型分子。分子与分子间排列不紧密，分子间引力下降，溶解度稍大；3、异黄酮类B环由于受吡喃酮环羰基的立体障碍，分子的平面性降低，故亲水性比平面型分子增加；4、花色苷元（花色素类）虽为平面结构，但离子形式存在，具有盐的通用性，水溶度较大；,二、溶解性：符合苷的溶解性规律,水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀碱水1.游离黄酮-+（酚羟基)取决于 分子的立体结构 取代基团的性质、数目、连接位置 引入羟基，数目多，7、4-位，水溶度较大 羟基甲基化（-OCH3）,水溶度降低R=H 平面型分子 非平面型分子 黄酮 二氢类（C-环半椅式结构）黄酮醇 异黄酮（羰基与B-环立体障碍）查耳酮 分子间排列不紧密，（交叉共轭）水分子易于进入 水溶度小 水溶度大,R=H 二氢黄酮,R=OH 二氢黄酮醇,黄酮类苷元溶解度大小：花色素苷元二氢黄酮（醇）异黄酮黄酮（醇）、查耳酮,2）苷：黄酮苷一般溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。糖链越长，则水溶度越大。二糖链苷单糖链苷；多糖苷单糖苷；C3-羟基苷C7-羟基苷（C3-羟基苷与C4-羰基的立体障碍使分子平面性降低）,水 甲醇乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀碱+-+,黄酮类化合物溶解性（极性）规律:,三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元3-O-糖苷 7-O-糖苷（平面性分子）花色素(平面性分子,离子型)非平面性分子 平面性分子,黄酮苷(亲水性),三、酸碱性,（一）酸性 因分子中多具有酚羟基，显酸性，可溶于碱性水溶液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺中。由于酚羟基数目及位置不同，酸性强弱也不同。以黄酮为例：7，4，-OH7或4，-OH一般酚-OH3或5-OH 此性质可用于提取、分离及鉴定工作。,酸性强弱规律：7，4，-OH7或4，-OH一般酚-OH3或5-OH 原因：羰基的吸电子效应，使处于对位上7，4，-OH在P-共轭效应的影响下，酸性较强；其他位置上的羟基其次；C3、C5位上羟基因能与C4位羰基形成分子内氢键，故酸性最弱。,（二）碱性：,-吡喃酮环1-氧原子,微弱碱性（孤对电子，接受质子）,仅溶于强的、浓酸+水（浓硫酸）,烊 盐（呈色）应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 黄橙色，并有荧光 二氢黄酮 橙红（冷）、紫红（热）查耳酮 橙红洋红 异黄酮（二氢）黄色 橙酮 红洋红,第三节 检识方法,（一）还原反应1、HCl-Mg粉反应：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）类在盐酸-镁粉作用下，易被氢化还原，迅速生成红-紫红（个别有绿-兰色）；将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2分钟内（必要时微热）即可出现颜色。B环有-OH或-OCH3取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙酮、儿茶素类则不反应。,四显色反应一、显色反应（一）还原反应,反应类型 鉴别特征 鉴别意义 备注,盐酸-镁粉 黄酮、二氢黄酮、红紫红 黄酮类特征性 假阳性 反应 黄酮醇、二氢黄酮醇 红紫红 鉴别反应（花色素）（最常用）查耳酮、橙酮、（-）儿茶素类、异黄酮（-）,四氢硼钠 二氢黄酮、二氢黄酮醇 红紫红 二氢黄酮类特有 还原反应 其它黄酮类（-）,钠汞齐反应 黄酮、二氢黄酮 红 异黄酮、二氢异黄酮 红 黄酮醇类 黄淡红色 二氢黄酮醇类 棕黄色,（二）与金属盐类试剂的络合反应,黄酮类化合物分子中含有下列结构单元，常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物。,与金属盐类试剂络合反应,反应类型 鉴别特征及鉴别意义 备 注,锆盐 枸橼酸 锆盐-枸橼酸 3-OH或3，5-二OH 黄色 黄色不褪 PPC,(ZrOCl2)5-OH 黄色褪去 示,氨性氯化锶(SrCl2)邻二酚羟基 绿、棕乃至黑色 三氯化铁(FeCl3)酚羟基 紫、蓝、绿,三氯化铝 3-OH，4-C=O 黄色（AlCl3）5-OH，4-C=O 鲜黄色荧光 PPCTLC 邻二酚羟基（4或7，4黄酮醇，天蓝色荧光）,示,（三）硼酸显色反应,硼酸 5-羟基，4-羰基黄酮 黄色，绿色荧光（草酸液）,（H3BO3）6-羟基，4-羰基查耳酮 黄色，无荧光（枸橼酸）,反应类型 鉴别特征及鉴别意义 备 注,黄酮醇 黄色 O 棕色,稀氢氧化钠 邻三酚羟基黄酮类 暗绿蓝绿色纤维状 邻三酚羟基鉴别,氨蒸气或碳酸钠溶液 颜色变化 TLC、PPC,（四）碱性试剂反应,氢氧化钠溶液 黄酮 黄 橙色 查耳酮、橙酮 红 紫红 二氢黄酮 黄橙色（冷）深红 紫红（较长时间或加热）,母核类型鉴别,五氯化锑(SdCl5)：查耳酮特征性显色反应(红或紫红色沉淀)黄酮、二氢黄酮、黄酮醇类呈橙色。,Gibbs反应：酚羟基对位活泼质子的特征（蓝 或蓝绿色）,（五）与五氯化锑反应,（六）其他显色反应,二.色谱检识（一）纸色谱（PPC）原理：分配原理适用范围：游离黄酮（苷元）及黄酮苷的分离鉴别,方法：双相色谱,第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂（BAW、TBA、水饱和正丁醇）（28%HAc、3%NaCl、1%HCl）,正相色谱 反相色谱固定相（水）极性 流动相（*有认为是吸附原理）？,Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大,苷元（0.7以上）单糖苷 双糖苷（0.7以下）苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf规律与左边相反母核相同，2-OH 3-OH 4-OH 5-OH黄酮,主要应用：苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类的分离鉴别,（二）薄层色谱（TLC）1硅胶薄层色谱 主要用于极性较小的黄酮类化 合物（黄酮苷元）的分离鉴别，其色谱行为可参 考硅胶柱色谱。2聚酰胺薄层色谱 可用于黄酮苷及游离黄酮的分离 鉴别，其色谱行为可参考聚酰胺柱色谱。3纤维素薄层色谱分配原理，其色谱行为可参考纸色谱。各种色谱的检识顺序：日光下观察多数黄酮有黄色斑点 紫外光下观察多数黄酮呈黄绿色荧光斑点 氨蒸气熏多数黄酮有颜色变化 喷显色剂（2%AlCl3甲醇液）多数黄酮黄色变深，荧光 加强,第四节 提取与分离方法,一、提取 黄酮类化合物在花、液、果等组织中，多以苷的形式存在；在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在；根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不同溶剂提取。,1.苷元 多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶剂提取；对于多-OCH3化的成分，用苯、石油醚提取；对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。,2.苷类 水或热水提取，（多糖苷在热水中溶解度较大，在冷水中溶解度小）；也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。3.含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。4.提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮类化合物则应避免。,二、粗提物的精制处理,1 溶剂萃取法去杂 石油醚：除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素 水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性物质 逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚 在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。,2 碱水提酸沉淀法 适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。注意事项：酸碱度不宜过大 邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护 石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质,3 炭粉吸附法适用于苷类的精制工作。植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。大部分苷类可用7%酚/水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。,4、离子交换法 用阳离子交换树脂从水提液中吸附黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。RSO3-H+ArOH（黄酮）无法交换，故实际上树脂仅起到吸附作用。,一提取方法 溶剂法,溶剂法 关键 溶剂的选择 选择依据 黄酮类成分的存在状态（游离、苷）及溶解性,溶剂的溶解性能 提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择,溶剂 提取原理 游离黄酮 黄酮苷 备 注,乙醇 溶解范围广+（甲醇）苷、苷元均可溶（9095%）(60%）甲醇毒性大,沸水 多糖苷易于水+成本低、安全,水溶性杂质多,碱性水或 稀氢氧化钠溶出能力强,碱性乙醇 酚羟基的酸性+石灰水除杂质效果好,二.分离方法,（一）溶剂萃取法 黄酮与杂质 分离依据：成分之间 苷与苷元 之间的极性（分配系数K）差异 苷元与苷元 分离工艺：原料的提取浓缩液（水溶液）,依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,石油醚液 乙醚液 乙酸乙酯 水饱和正丁醇 母液,（脂溶性杂质）回收 回收 减压回收（水溶性杂质)苷元 单糖苷 多糖苷,（二）pH梯度萃取法 分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异（见黄酮酸性规律）分离工艺：总游离黄酮的乙醚液,依次以5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取,5%NaHCO3液 5%Na2CO3液 0.2%NaOH液 4%NaOH液 母液,酸化（脂溶性杂质）,7，4-OH黄酮 7或4-OH黄酮 一般-OH黄酮 5-OH黄酮,（三）柱色谱法,吸附原理 异黄酮、二氢黄酮（醇）、氯仿-甲醇不同比例（105，活化）高度甲基化或乙酰化黄酮（醇）混合溶剂洗脱（极性小）,分配原理 多羟基黄酮醇或黄酮苷类 氯仿-甲醇-水,（加水失活或不活化）（极性大）（80：20：1）等比例,1硅胶柱色谱,2、聚酰胺色谱,（1）聚酰胺色谱分离原理 酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢键缔合力大小有关。,黄酮类化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律：苷元相同，洗脱先后顺序一般为：三糖苷双糖苷单糖苷苷元 母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢 羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮具有对位（或间位）羟基黄酮 不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇 分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查耳酮往往较相应的二氢黄酮难于洗脱。,洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越难洗脱（薄层Rf越小）（2）“双重色谱”原理主要用于解释黄酮苷与苷元聚酰胺色谱现象,正相色谱 反相色谱,聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小）含水溶剂（甲醇-水，极性大）先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）苷（极性大）（柱色谱分离）Rf值：苷元 苷 苷元 苷（TLC色谱鉴别）*上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。,3氧化铝柱色谱 很少应用 具有3-OH或5-OH、4-羰基及邻二酚羟基黄酮类化合物与铝离子络和而被牢固吸附，难于洗脱。4.葡聚糖凝胶柱色谱 类型：Sephadex G型（亲水性凝胶）Sephadex LH-20型(羟丙基葡聚糖凝胶，水及极性有机溶剂均可)原理：“双重色谱”原理,分子筛作用 吸附原理（按分子大小分离）（按极性大小分离）,应用：黄酮苷及苷元的分离 苷元的分离 洗脱顺序：分子由大到小被洗脱 极性由小到大被洗脱叁糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5-OH黄酮,常用洗脱剂：碱水（0.1mol/L NH3.H2O）；盐水（0.5mol/L NaCl）；醇或醇水不同比例。,5根据分子中某些特定官能团进行分离 醋酸铅沉淀法 硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄酮与硼酸络合，生成物易溶于水的性质与其它类型黄酮分离。通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，用硼酸液萃取，水相即为邻二酚羟基类黄酮。,第四节 黄酮类化合物的检识与结构测定,目前主要采用的方法有：与标准品或与文献对照PPC或TLC得到的Rf或hRf值（Rf100）分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的UV光谱 1H-NMR 13C-NMR MS,第四节 结构测定,一般鉴定程序：与标准品或与文献对照PPC或TLC得到的Rf或hRf值（Rf100）分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的UV光谱 如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱1H-NMR13C-NMRMS 将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。,一、紫外光谱,可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。一般程序：测定样品在甲醇中的UV谱以了解母核类型；在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测UV谱和可见光谱以了解3,5,7,3,4有无羟基及邻二酚羟基；苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元的UV谱以了解糖的连接位置。,黄酮（醇）：带 II、带I均强母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断（甲醇）查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强,取代基：OH等，为助色团 依红移规律推断取代基团,甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠：碱性弱，酸性强的酚羟基解离 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和 相应吸收峰红移,三氯化铝：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 络和 邻二酚羟基,黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征,苯甲酰系统 桂皮酰系统（带II 220280nm）（带1 300400nm）黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系,多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：带I在300-400nm区间，由B环桂皮酰系统的电子跃迁所引起；带II在240-285nm区间，由A环苯甲酰系统的电子跃迁所引起。,图1 黄酮和黄酮醇类木犀草素（黄酮）；槲皮素（黄酮醇）图2 异黄酮及二氢黄酮类7-羟基异黄酮；7，4，-二羟基二氢黄酮图3 查耳酮及橙酮类2，3，4-三羟基查耳酮；3，4，-二羟基橙酮,1、黄酮及黄酮醇类：主要特征为峰形相似（、皆强）。带峰位相似，带峰位不同：其最大吸收波长为黄酮黄酮醇。2、异黄酮和二氢黄酮（醇）类：主要特征为带为强吸收峰（都有苯甲酰基），带均为弱（肩）峰（B环未与C环羰基共轭）。带峰位：异黄酮二氢黄酮（醇）类。3、查耳酮及橙酮类：主要特征是带为强吸收峰，而带则较弱，为次强峰。带峰位：橙酮查耳酮。,（2）取代基团对共轭吸收的影响,黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相 应的吸收峰红移。一般，A环引入 OH，带II红移，B环引入 OH带I红移。羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力下降，引起相应的吸收峰紫移。3-OH甲基化或苷化，带I紫移，5-OH（与羰基形成分子内氢键）甲基化，带I、带II均紫移515nm，4-OH甲基化，带I紫移310nm。羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消失。,2加入诊断试剂后引起的位移及结构测定,诊断试剂可使黄酮类化合物的酚羟基解离或形成螯合物，导致光谱的特征性改变，根据这些变化可以推断酚羟基等取代基的位置或数目。以下以黄酮、黄酮醇类为例介绍其对黄酮类化合物紫外光谱的影响及其在结构测定中的意义。,第六节 实例,一、黄芩1、功效：清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎的功能。2、化学成分：黄芩苷主主要有效成分，具有抗菌作用，还含有黄芩素、汉黄芩素、汉黄芩苷、千层纸素、千层纸素苷等30余种黄酮类化合物。有些还具有抗癌作用。3、理化性质：黄芩苷在黄芩酶的作用下水解成黄芩素，黄芩素含有邻三酚羟基，易被氧化成醌类化合物而显绿色，主是保存或炮制不当黄芩变绿的主要原因。4、提取分离过程中应注意防止酶解和氧化。,二、槐米,1、功效：凉血止血，清肝泻火。2、化学成分：芸香苷、槲皮素、另皂苷等。3、理化性质：芸香苷为槲皮素-3-O-芸香糖。在冷水中的溶解度很小，在沸水中可溶等。,黄酮类化合物思考题：1葡聚糖凝胶（Sephadex G 型和Sephadex LH 20型）柱色谱用于分离黄酮类化合物（苷及苷元）的原理、方法及洗脱规律。2聚酰胺柱色谱用于分离黄酮类化合物（苷、苷元）的原理、方法及洗脱规律。如何理解黄酮类化合物聚酰胺色谱分离的“双重色谱”性能。3简述黄酮类化合物的酸性规律及在黄酮苷元分离中的应用。4何谓交叉共轭体系，它与黄酮类化合物颜色的关系如何？,