《血涂片的制备》PPT课件.ppt

,血涂片的制备和细胞大小的测量,目的要求,1.掌握血涂片的制备方法；2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态；3.掌握显微测微尺的使用方法。,实验原理,涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。,实验用品,1.器材:医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片、双凹片（推片）。2.试剂:Wrights染液：Wrights色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。,方法与步骤,一.血涂片的制备与血细胞的观察二.显微测微尺的使用,采血前用70酒精棉球消毒人的指腹,采血,由于第一滴血中含单核白细胞较多，因此弃去第一滴血。,推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧,再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。,3045,两玻片的角度以3045为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。,染色,待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wrights染液盖满血膜为止，染色13 min。然后滴加等量蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置1015 min。用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。,结果显示,淋巴细胞,单核细胞,嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,显微测微尺的使用,显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、目镜测微尺两部分。在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的实际长度。目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的测量。,每个大格又可分为10个小格，每小格的实际长度为0.01mm,总长0.1mm,镜台测微尺,总长1mm,共分为10格,目镜测微尺,可以通过旋转旋钮移动目镜测微尺中交叉线的位置,使用方法,1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜；2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜台测微尺的刻度；3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。,目镜测微尺的标定,naX=M,X:目镜测微尺每格的实际长度a:镜台测微尺每格的实际长度n:镜台测微尺的刻度数。M:目镜测微尺的刻度数。,4.移去镜台测微尺，换血涂片，目镜测微尺测量细胞所占小格数X目镜测微尺每小格代表的实际长度=被测细胞的实际长度。,实验报告,绘制各种不同类型的血细胞,并说明它们的主要作用；任选20个红细胞，测量其直径，并计算出平均值。,