《蛋白质溶解度》PPT课件.ppt

蛋白质溶解度,在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白质质量占试样中总蛋白质量的百分数。通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白质分散指数（(PDI)来表示。,原理,用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸滴定测出试样中可溶性蛋白质含量；同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算出试样的蛋白溶解度。,试剂,a)氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲酚绿、硫酸铵；b)浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、蒸馏水。,仪器和设备,a)感量为0.0001 g分析天平；b)磁力搅拌器；c)离心机；d)样品粉碎机；e)60目分析筛；f)电炉；g)100 mL或250 mL凯氏烧瓶；h)凯氏蒸馏装置；i)250 mL锥形瓶；j)1000 mL容量瓶；k)微量滴定管。,分析步骤,10.042 M氢氧化钾溶液称取2.360 g氢氧化钾，加水溶解后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。2混合催化剂称取6 g硫酸钾和0.4 g硫酸铜，磨碎混匀。3氢氧化钠溶液称取400 g氢氧化钠，加水溶解后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。4硼酸溶液称取20 g硼酸，加水溶解后，转移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。50.1M盐酸标准溶液量取8.3 mL浓盐酸，注入1000 mL水中混匀，按GB 601-88要求进行标定即可。6混合指示剂称取1 g甲基红和5 g溴甲酚绿，加入乙醇溶解后，转移至1000 mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。,试样处理,称取试样1.5 g（准确至0.0002 g）置于250 mL烧杯中，准确移入 0.042 M氢氧化钾溶液75 mL，磁力搅拌20 min，然后将试样转移至离心管中，以2700 r/min的速度离心10 min。,测定,吸取上清液 15 mL,放入消化管中,按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白质的含量。,分析结果计算,15/75=x/1.5g=0.3gxps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋白含量100%,注意事项,不同样品的粒度应相同。不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应一致。,Over谢谢观看,