《嗜酸粒细胞计数》PPT课件.ppt

嗜酸性粒细胞计数P36,临床检验基础教研室程杨艳,嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细胞，为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒细胞祖细胞（CFU-EO）所产生。功能：（1）微弱的吞噬作用，基本无杀菌力；（2）主要作用是限制过敏反应的作用：抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞；吞噬其释放颗粒；分泌组胺酶破坏组胺；（3）参与蠕虫的免疫反应。,嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源,从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺；从补体来的C3aC5a；从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋化因子；从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子；某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子；从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋化因子。趋化因子E,嗜酸性粒细胞绝对数=WBCE%其中E%（嗜酸性粒细胞分类的比值）不准，进推算的绝对值误差较大；故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目的，须做嗜酸性粒细胞直接计数。,原理 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时使红细胞和大部分其他白细胞被破坏，并将嗜酸粒细胞着色，充入计数板，低倍镜下计数2个计数池共10个大方格内的嗜酸粒细胞数，经换算求得每升血液中的嗜酸粒细胞数。,器材 采血针、干棉球、75%酒精棉球 试管、吸量管 计数板、显微镜,试剂 特点：为低渗溶液，可使红、白细胞溶解破裂；含对E的保护剂，如乙醇、乙二醇、丙酮；并使E颗粒染色而被识别。,下列试剂任选一种:1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液 3.Hinkelman稀释液 4.乙醇-伊红稀释液 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液,操作 0.38ml稀释液20l血混匀RBC溶解后混匀充池（2个）静置2-5min镜下计数10个大方格E的数目。计算 E/L=10大方格E的数20106=0.02N109/L参考值 109/L,注意事项,1.本实验必须在1h内完成，否则细胞被破坏，结果偏低；2.及时混匀，不能过分振荡，以免细胞破坏；3.统一采血时间，以免受生理变化；,4.注意与N区别，以免结果偏高；（N着色浅，颗粒小）5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发，应注意其变化；6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色，在碱性显蓝，故器具要防酸。,方法学评价,1显微镜计数法 所需设备简单，简便易行；求得的嗜酸粒细胞绝对值，比用白细胞总数和分类计数间接推算出的来的准确。但重复性差，精确性不如血液分析仪法。所采用的稀释液多种，其优缺点见表2-47,2血液分析仪法 五分类血液分析仪是目前最有效的嗜酸粒细胞计数的筛检方法，分析速度快，准确性较高。但仪器昂贵；当仪器提示嗜酸粒细胞增多伴直方图或散点图异常时，应采用显微镜直接计数法复检。,临床意义,生理变化 肾上腺皮质激素的作用:阻止骨髓释放E;使血中E到组织中去。1）劳动、寒冷、饥饿、各精神刺激等 交感神经兴奋ACTH肾上腺皮质激素 E。,2）年龄：5岁以下（0-0.8）109/L 5-15岁（0-0.5）109/L3）日间变化：上午波动大，下午较恒定。与糖皮质激素脉冲式分泌有关。,2.病理变化 1）增高：轻度（0.5-1.5）109/L 中度（1.5-5）109/L 重度 5109/L 见于：寄生虫病：可达10%或更多。变态反应性疾病：支气管哮喘、药物过敏反应、荨麻疹。某些皮肤病：如湿疹、银屑病等。,血液病：如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除术后等；嗜酸性粒细胞白血病；霍奇金病。某些恶性肿瘤：如肺癌伴嗜酸性粒细胞增高。某些传染病：感染期嗜酸性粒细胞常减低，猩红热急性期嗜酸性粒细胞增高。恢复期暂时性增高。,2）减少：长期使用肾上腺皮质激素；急性传染病早期：如伤寒、副伤寒；大手术、烧伤。,3）其他临床应用(1)观察急性传染病的预后(2)观察手术和烧伤患者的预后(3)测定肾上腺皮质功能和垂体前叶功能：促肾上腺皮质激素（ACTH）使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素，造成嗜酸性粒细胞减低。,直接刺激肾上腺皮质：嗜酸性粒细胞直接计数后，随即肌注或静脉滴注ACTH 25mg。间接刺激肾上腺皮质：注射0.1%肾上腺素0.5ml，刺激垂体前叶分泌ACTH。,结果判断：正常情况：比注射前应减低50%以上。肾上腺皮质功能正常，而垂体前叶功能不良者：则直接刺激时减低50%以上，间接刺激时不减低或减低很少。垂体功能亢进：直接和间接刺激均可减低80%l00%。垂体前叶功能正常，而肾上腺皮质功能不良者：直接和间接刺激减低均不到50%。艾迪生(Addison)病，平均仅减低4%。,