Transwell小室简介和应用.ppt

Transwell,简介,Transwell是一种实验技术，其主要材料是Transwell小室，其外形为一个可放置在孔板里的小杯子。其关键部分是杯子底层的通透性可支持物（滤膜），而杯子其余部分的材料与普通的孔板（聚苯乙烯）是一样。滤膜有三种材料：聚酯（PC）、聚碳酯（PET）和胶原包被的聚四氟乙烯（PTFE）。一般常用的是聚碳酸酯膜，膜上的孔径大小范围是0.112.0um。,使用方法,将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。,应用,共培养体系：小于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3.0um以下孔径。常用0.4、3.0um。将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。,趋化性实验：可用5.0、8.0、12.0um膜，上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室，计数进入下室的细胞量可反映下室成分对上室细胞的趋化能力。细胞B对细胞A的趋化作用：将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的趋化作用 趋化因子对细胞的趋化作用：将细胞种于上室，下室加入某种趋化因子，可研究该趋化因子对细胞的趋化作用。,肿瘤细胞迁移实验：常用8.0、12.0um膜，上室种肿瘤细胞，下室加入FBS或某些特定的趋化因子，肿瘤细胞会向营养成分高的下室跑，计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的迁移能力。肿瘤细胞侵袭实验：常用8.0、12.0um膜，原理与肿瘤细胞迁移实验类似。不同点在于，侵袭实验会在小室的滤膜上涂一层基质胶，增强细胞迁移的阻力，进一步确认肿瘤细胞的侵袭能力。,Thank you！,