DNA和蛋白质技术.ppt

专题5DNA和蛋白质技术,DNA的粗提取与鉴定多聚酶链式反应扩增DNA片段血红蛋白的提取与分离,课题1 DNA的粗提取与鉴定,课题目标:尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取;了解DNA的理化性质,理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。课题重点DNA的粗提取和鉴定方法。,本节问题：,1、DNA的粗提取和鉴定根据的原理是什么？,1）DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同。具体见P54图5-1。2）利用DNA不溶于酒精但细胞中某些蛋白质溶于酒精的性质可使DNA与蛋白质分离得到初步纯化的DNA。3）在沸水中DNA遇二苯胺呈现蓝色反应。,2、DNA粗提取的方法步骤怎样？有什么主要注意问题？,注意问题：1)材料要选用DNA含量较高的生物组织;2)整个实验中三次用到2mol/L的NaCl溶液;3)酒精最好用95%的冷酒精;4)二苯胺试剂最好现配现用,如果从冰箱取出,用时要先摇匀;5)加蒸馏水或加入酒精用玻棒搅拌时,动作要轻缓且朝一个方向。,3、解决教材其他练习题。,反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质的原因是：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶于低盐溶液中的物质。,练习巩固,1、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是A 减小;减小 B 增大;增大C 先减小后增大 D 减小;增大2、欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中的DNA析出，最有效的办法是A 加蒸馏水 B 加矿泉水C 加清水 D 加生理盐水,3、与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是A 操作时缓慢滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B 操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整C 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度D 当丝状粘稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可以认为是0.14mol/L,4、你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？,1）用甲基绿染液。结果丝状呈现绿色。详见（必修1P26）,