《真菌学概论》PPT课件.ppt

真菌学概论,P226,适用教材医学微生物学第五版 陆德源主编 人卫2002年8月,第21章 真菌学概述,病毒界原核生物界原生生物界真菌界植物界动物界,自然生物分类(6界),接合菌门担子菌门子囊菌门壶菌门(原半知菌亚门归入前3门中),分类:界、门、纲、目、科、属、种,真菌(fungus),真菌是一种真核细胞形微生物。有典型和完善的细胞器。不含叶绿素、无根、茎、叶的分化。广泛分布、种类繁多，多数无害、少数有益（食用蕈、生产抗菌素、酿酒）致病真菌：致病、条件致病、产毒、致癌等感染率上升原因：菌群失调（滥用抗菌素）、免疫低下（激素、抗癌药物）,第一节 真菌的生物学性状,真菌分单细胞和多细胞两类：单细胞真菌呈圆形或椭圆形，称为酵母菌（yeast）或类酵母菌（如隐球菌、念珠菌）。多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝分枝交织成团形成菌丝体,称丝状菌（filarmentous fungus），并长有各种孢子，这类真菌即一般称为霉菌（Mold)。,二相性真菌（dimorphic）,有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现两种形态，称二相性真菌。即在机体内或含动物蛋白的培养中37孵育，呈现酵母型菌落，而在沙保氏培养基上室温或25孵育，则形成丝状菌落。（如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。）,一、真菌的形态与结构,一、真菌的形态与结构,真菌比细菌大几倍至几十倍。细胞结构比细菌复杂，细胞壁缺乏肽聚糖，其坚韧性主要依赖于多聚N-乙酰基葡萄糖构成的甲壳质(Chitin)（75%）和蛋白质（25%）。由于不含肽聚糖，真菌不受青霉素或头孢菌素的作用。真菌的细胞膜与细菌的细胞膜区别在于前者有固醇(sterol)而后者无。细胞内有较为典型的核结构和细胞器。,一、真菌的形态与结构,A.单细胞真菌,单细胞真菌呈圆形或卵圆形，常见于酵母和类酵母菌，对人类有致病的主要有：新生隐球菌的白假丝酵母菌。这类真菌以出芽方式繁殖，芽生孢子脱落后形成新的 独立个体。,一、真菌的形态与结构,多细胞真菌能长出菌丝，菌丝延伸分枝，并可以长出孢子。菌丝和孢子的形 态不同，常作为 鉴别多细胞真菌 的重要标志。,B.多细胞真菌,一、真菌的形态与结构,1、菌丝（hypha）,真菌的孢子以出芽方式繁殖，在适宜的环境下由孢子长出芽管，芽管延长呈丝状，称菌丝。菌丝又可长出许多分枝，交织成团称为菌丝体。按功能分营养菌丝气生菌丝生殖菌丝,一、真菌的形态与结构,1、菌丝,按物理性状分有隔菌丝无隔菌丝按形态分螺旋状球拍状结节状鹿角状梳状,孢子系真菌的繁殖结构，按形成方式分为有性孢子和无性孢子两种有性孢子无性孢子真菌孢子与细菌芽胞的区别(P227/P24),2、孢子（spore）,一、真菌的形态与结构,由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。按形态分：大分生孢子小分生孢子,无性孢子(1)分生孢子,一、真菌的形态与结构,图示：石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子,由菌丝内细胞直接形成芽生孢子:菌丝体细胞出芽生成（假菌丝）厚膜孢子：菌丝体内胞浆浓缩，胞壁增厚，环境不利形成。环境转好，厚膜孢子又可以出芽生殖。关节孢子：陈旧的培养物中，菌丝细胞变厚，形成长方形的节段，呈链状排列。,无性孢子(2)叶状孢子,一、真菌的形态与结构,芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子,菌丝的末端膨大成孢子囊，内含许多小孢子，孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。,无性孢子(3)孢子囊孢子,一、真菌的形态与结构,二、培养特性,沙保弱培养基：皮肤癣菌生长较慢，1-4周，腐生性真菌生长较快，24小时。成分：1%蛋白胨 4%葡萄糖 2%琼脂 pH5.5抑菌剂：放线菌酮和氯霉素前者抑制污染真菌，后都抑制普通细菌但放线菌酮可以抑制部分致病性真菌如白假丝酵母菌、组织孢浆菌、新生隐球菌等的生长，故初次分离上述真菌，需使用不加放线菌酮的培养基。,二、培养特性,1、酵母型菌落,酵母型菌落，为单细胞真菌的菌落形态，菌落光滑湿润，柔软而致密。与一般细菌菌落相似，如新生隐球菌。酵母样菌落（类酵母菌落），部分单细胞真菌在出芽繁殖后，芽管延长不与母细胞脱落，形成假菌丝。假菌丝由菌落向下生长，伸入培养基中，这样的菌落称酵母样菌落，如白假丝酵母菌。,二、培养特性,酵母型菌落、酵母样菌落,是多细胞真菌的菌落形式，由许多疏松的菌丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状，菌落正背两面呈不同颜色。其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。丝状真菌有形成圆形菌落的倾向，所以临床癣类疾病常表现为环形或多环形。小培养,2、丝状菌落,二、培养特性,棉絮状菌落、环癣、小培养,三、抵抗力,真菌对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有较强的抵抗力。对常用的抗细菌感染的抗生素均不敏感。对部分消毒剂敏感。灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素、克霉唑、酮康唑、咪康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶等对多种真菌有良好的抑菌作用。,三、抵抗力,第二节 真菌的致病性与免疫性,致病条件1、毒力：具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白，烟曲霉、黄曲霉致组织出血坏死。2、粘附力：白假细酵母菌，芽管形成，粘附力增强3、抗吞噬作用：新生隐球菌荚膜可有效抵抗吞噬细胞的吞噬作用。4、改变宿主细胞功能：烟曲霉和白假细酵母菌的热休克蛋白HSP90可与宿主细胞和血清蛋白结合使之功能改变。,致病形式,1、致病性真菌感染：多见于外源性真菌感染。浅部真菌病如皮癣。2、条件致病性真菌感染：多见于内源性真菌感染。深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力下降患者。3、真菌超敏反应性疾病：食入或吸入某此真菌的孢子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变应性皮炎、哮喘等。,第二节 真菌的致病性与免疫性,皮癣、肺真菌病、荨麻疹,第二节 真菌的致病性与免疫性,4、真菌性中毒症：摄入真菌或其产生的毒素后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤，或造血系统抑制，或神经系统功能紊乱。5、真菌毒素与肿瘤的关系：黄曲霉 双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物，毒性强，与致癌有密切关系,致病形式,第二节 真菌的致病性与免疫性,1、固有免疫：主要指机体粘膜的天然屏障作用，如果屏障机制不完善或被破坏，则易引发真菌感染。如插管、破损、创伤免疫力低下菌群失调儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低，易患头癣；成人手足汗较多，且掌跖部缺乏皮指腺，故易患手癣。,免疫性,第二节 真菌的致病性与免疫性,头癣和手癣,第二节 真菌的致病性与免疫性,2、获得性免疫：因真菌细胞壁厚，所以感染后形成的抗体滴度较低，且很难发挥中和抗体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转为菌丝体从而提高吞噬率，并抑制真菌粘附于体表。主要是靠细胞免疫：抗原刺激特异性淋巴细胞增殖释放IFN-、IL-2 激活巨噬细胞、NK细胞、CTL细胞杀伤真菌播散性真菌病多见于T细胞功能抑制。,免疫性,第二节 真菌的致病性与免疫性,第三节 真菌的微生物学检验法(P231),各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,一般可用 直接镜检 分离培养 两种方法进行鉴定,一、标本采集,浅部真菌：75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、毛发、指（趾）甲屑等深部真菌：根据病情取痰、血液、脑脊液等,第三节 真菌的微生物学检验法,方法：,二、直接镜检和意义,皮肤癣菌：湿片，不染色；假丝酵母菌：革兰染色；隐球菌：墨汁染色,第三节 真菌的微生物学检验法,意义：1、直接阳性有诊断意义，但阴性并不能排除感染2、组织中的分隔分枝菌丝为曲霉；粗大不分隔或不分枝菌丝多为毛霉；假丝酵母菌有假菌丝表示有活动性3、皮肤癣菌菌丝肥大、粗长，提示活动状态4、酵母型和二相真菌在组织内常呈现为孢子,二、直接镜检和意义,第三节 真菌的微生物学检验法,刷子培养物的制备、头皮刷子样品的培养物，显示从刷子上每一点产生的菌落,受皮肤癣菌感染皮肤的KOH标本。菌丝的宽度是规则的，具有分隔并可有分枝,第三节 真菌的微生物学检验法,由犬小孢子菌引起的小孢子发外型和发内型感染的头发,第三节 真菌的微生物学检验法,被石膏样毛癣菌穿孔的毛发,在30%KOH中显示菌丝和酵母细胞的皮肤,第三节 真菌的微生物学检验法,短帚霉引起的甲感染和帚霉感染的典型厚壁分生孢子的甲的KOH涂片,第三节 真菌的微生物学检验法,多个出芽的酵母革兰染色和新生隐球菌墨汁染色,第三节 真菌的微生物学检验法,三、分离培养,皮肤、毛发、甲屑等标本经70%乙醇或2%石炭酸浸泡2-3min杀死杂菌，再用无菌生理盐水洗净后接种于沙保弱培养基中。阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。血液标本先增菌，脑脊液取沉淀物接种于血平板上。疑为假丝酵母菌，需先做芽管生成试验。,第三节 真菌的微生物学检验法,大部分真菌基本都是通过孢子传播，因此阻断孢子的传播途径，破坏孢子的萌发环境犹为重要。表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接接触。（黄曲霉的毒素作用）,第四节 真菌感染的预防(P232),真菌感染的治疗,局部用药（表浅局部感染）全身用药（深部或全身感染）皮肤科用药：5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑软膏、0.5%碘伏口服抗真菌药：二性霉素、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等（灰黄霉素对小鼠有致癌作用，需慎用。）,本学期我上课内容(所有powerpoint讲义)均已上传至下列网址，大家可以自由下载学习(5月20日后至考试结束)http:/（红色部分,不同课件解压码不同），因部分图片和文字内容来源于其它网站，请不要用于除学习之外的用途。谢谢同学们的合作！,