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生化教研室 肖建英,第四章,DNA的复制、突变、损伤与修复,第一节DNA的复制第二节基因突变第三节DNA的修复系统,主要学习内容,复制(replication)是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。,第一节 DNA的复制,半保留复制(semi-conservative replication)复制的高保真性(high fidelity)双向复制(bidirectional replication)半不连续复制(semi-discontinuous replication),一、DNA复制的一般特征,概念：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。,1、半保留复制(semi-conservative replication),（一）半保留复制、复制子、复制叉、双向复制,按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。,半保留复制的意义,遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。,密度梯度实验,实验结果支持半保留复制的设想。,含重氮-DNA的细菌,第一代,第二代,梯度离心结果,AGGTACTGCCACTGG,TCCATGACGGTGACC,CCACTGG,GGTGACC,AGGTACTG,TCCATGAC,TCCATGAC,AGGTACTG,AGGTACTGCCACTGG,TCCATGACGGTGACC,AGGTACTGCCACTGG,TCCATGACGGTGACC,+,母链DNA,复制过程中形成的复制叉,子代DNA,复制的基本规律,2、复制起点（origin of replication，ori 或 O）,DNA复制时总是从一个特定的位置开始，这一位置称为复制起点。多数是富含A T配对的区域。,富含A T配对的区域经常处于开发与闭合的动态平衡之中，称为DNA的呼吸作用。,4、复制叉（replication fork）,真核生物每个染色体上形成多个复制子。,大多数原核和真核生物复制时，DNA都是从固定起始点开始向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。,5、复制方向,（1）双向复制（bidirectional replication）,（2）单向复制 从特定的位置开始，单方向进行复制。,（3）不对称的双向复制,6、复制终点,（1）环状DNA复制终点固定的复制终点（2）线状DNA复制终点形成一个大分子 串联体（多联体）。如噬菌体病毒。,A.环状双链DNA及复制起始点B.复制中的两个复制叉C.复制接近终止点(termination,ter),（二）DNA复制的酶系,1、使DNA链解离的酶,解旋酶 单链DNA结合蛋白 DNA旋转酶（拓扑异构酶）,（1）解螺旋酶(helicase)（DnaB 蛋白）：利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链（2）单链DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein,SSB)在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整 E.Coli中的SSB 以四聚体形式存在，与DNA结合具有协同作用。,DNA复制的酶学,（3）DNA拓扑异构酶(DNA topoisomerase),DNA复制的酶学,解链过程中正超螺旋的形成,拓扑异构酶作用特点既能水解、又能连接磷酸二酯键,拓扑异构酶 拓扑异构酶 拓扑异构酶 拓扑异构酶,分 类,DNA复制的酶学,拓扑异构酶,切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。,拓扑异构酶,切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端，DNA分子进入负超螺旋状态。,拓扑异构酶作用机制,DNA复制的酶学,2、DNA聚合酶,全称：依赖DNA的DNA聚合酶(DNA-dependent DNA polymerase)简称：DNA-pol,（1）原核细胞中的DNA聚合酶,DNA-pol DNA-pol DNA-pol,功能：对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补，切除引物。,DNA-pol（109kD）,53 聚合活性,35外切活性53外切活性,DNApol 利用35外切活性切除错配的碱基，同时利用53聚合活性补回正确的核苷酸，这种功能称为即时校读(proof read)。,DNApol 的53外切酶作用可以与其聚合作用同时发生，产生缺口平移(nick translation)、链的置换及模板转辙现象。,DNApol的即时校读功能,5,5,5,5,5,5,5,5,5,3,3,3,3,3,3,带有切刻的双链,切口平移,链的置换,链置换,模板转辙,323个氨基酸,小片段,5 核酸外切酶活性,大片段/Klenow 片段,604个氨基酸,53聚合活性 5 核酸外切酶活性,N 端,C 端,DNA-pol,Klenow片段是实验室合成DNA，进行分子生物学研究中常用的工具酶。,DNA-pol（120kD）,DNA-pol II基因发生突变，细菌依然 能存活。它参与DNA损伤的应急状态修复。,功能是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶。,DNA-pol(900kD),DNApol 分子量为900KD，全酶由10种(、)22个亚基构成不对称二聚体；核心酶包含、亚基；亚基分别催化领头链与随从链的合成；亚基有35外切酶活性及对碱基的选择功能，亚基为装配所必需；亚基起着夹住模板又能使酶延模板滑动的作用。,DNA-pol DNA-pol DNA-pol分子数/细胞 400？20比活性 低于pol？比pol大10倍以上分子量(kD)109 120 900分子组成 单一肽链,有A至R？10种、22个亚基 共18-螺旋肽段 不对称二聚体53聚合活性 53外切活性 35外切活性 基因突变后致死性 可能 不可能 可能功 能 校读 不清楚 在复制延长中 填补空隙 修复合成 催化新链合成 切除引物,原核生物的三种DNA聚合酶比较,（2）真核细胞中的DNA聚合酶,DNA-pol,起始引发，有引物酶活性。,延长子链的主要酶，有解螺旋酶活性。,参与低保真度的复制。,在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。,在线粒体DNA复制中起催化作用。,DNA-pol,DNA-pol,DNA-pol,DNA-pol,真核生物的DNA聚合酶比较,3、DNA连接酶,连接DNA链3-OH末端和相邻DNA链5-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。,DNA连接酶(DNA ligase)作用方式,DNA连接酶在复制中起最后接合缺口的作用。在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。也是基因工程的重要工具酶之一。,DNA连接酶的功能,领头链(leading strand),随从链(lagging strand),半不连续性复制,（三）DNA的复制过程,顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为前导链（领头链）。另一股链因为复制的方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为后滞链（随从链）。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。,参与DNA复制的物质,底物(substrate):dATP,dGTP,dCTP,dTTP聚合酶(polymerase):依赖DNA的DNA聚合酶，简写 为 DNA-pol模板(template):解开成单链的DNA母链引物(primer):提供3-OH末端使dNTP可以依次聚合 其他的酶和蛋白质因子,二、原核生物的DNA复制,（一）复制的起始（二）复制的延长（三）复制的终止,复制过程：,需要解决两个问题：,1.DNA解开成单链，提供模板。,2.合成引物，提供3-OH末端。,（一）大肠杆菌基因组复制的起始,原核生物的DNA复制,E.coli复制起始点 oriC,1.复制起始点,Dna A,Dna B、Dna C,DNA拓扑异构酶,引物酶,SSB,3,5,3,5,2.复制的引发形成引发体和引物,含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。,3,5,3,5,引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子。,引物,引物酶,原核生物DNA复制的起始DNA拓扑异构酶在复制起始部位将DNA引入 负超螺旋。DnaA蛋白辨认、结合于起始位点，并促使解链。DnaB与DnaC复合物进入，生成引发前体，然后 DnaB继续发挥解链的作用。SSB与解开的单链结合，稳定和保护单链。引物酶(DnaG)进入并与引发前体结合生成引发体（解螺旋酶、DnaC 蛋白、引物酶和DNA起始区）。引发体中的引物酶催化NTP聚合，生成引物。DNA拓扑异构酶(型为主)在解链前方理顺DNA 链，松弛正超螺旋。,（二）复制的延长,复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。,原核生物的DNA生物合成,OH 3,3,复制的化学反应,(dNMP)n+dNTP(dNMP)n+1+PPi,聚合反应的特点,以亲代DNA单链为模板DNA 新链生成需引物；遵循碱基配对规律（A=T，GC）dNTP为原料5 3方向延长,领头链的合成,随从链的合成,复制的延长,原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。,（三）大肠杆菌基因组复制的终止,（一）真核细胞DNA复制的起始点,三、真核生物的DNA复制,1、猴病毒SV40 的复制起始点,SV40基因组为5kb，双链环状DNA。只有一个复制原点，包括几个必要的元件：四个5-GAGGC-3序列，是大T抗原结 合位点。一个15bp的回文结构，最早解链区域。一个只有A-T组成的17bp区域，促进解链。,2、酵母的复制起始点自主复制序列，11bp。,真核生物染色体有多个起始点，是多复制子复制。1、解链复制的起始需要：DNA-pol（引物酶活性）；DNA-pol（解螺旋酶活性）；拓扑酶；单链DNA结合蛋白 复制蛋白(replication protein A，RPA)。,（二）真核细胞DNA复制的过程,3,5,5,3,领头链,3,5,3,5,亲代DNA,随从链,引物,核小体,2、复制的延长需要：,DNA pol催化新链延长；增殖细胞核抗原（PCNA）提高DNA pol在模板上的行进能力。,染色体DNA呈线状，复制在末端停止。复制中岡崎片段的连接，复制子之间的连接。染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。,（三）真核细胞DNA复制的终止,5,3,3,5,5,3,3,5,+,5,3,3,3,3,5,5,复制的终止,端粒(telomere)：指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。,1、端粒的复制：,端粒酶(telomerase),端粒酶RNA(human telomerase RNA,hTR)端粒酶协同蛋白(human telomerase associated protein 1,hTP1)端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTRT),组成,端粒酶的催化机制,爬行模型,DNA聚合酶复制子链,进一步加工,2、端粒酶与药物,（1）针对端粒酶RNA或端粒酶逆转录酶的mRNA设计反义寡核苷酸药物 阻断端粒DNA的合成或端粒酶逆转录酶的表达。如：肽核酸（PNA）是一种非常有前途的药物。,肽核酸的用途：抗癌研究显著抑制永生化的肿瘤细胞 端粒酶活性；病原体检测的分子杂交、原位杂交、突变分析等；基因芯片的制备，是基因芯片的升级产品；定量PCR，实时检测PCR的扩增反应。,（2）核酶：直接作用于端粒酶RNA的锤头状核酶。,（3）逆转录酶抑制剂：如：3-叠氮胸苷,（4）其它：核苷类似物、端粒酶蛋白抗体等。,四、线粒体DNA的复制,（一）线粒体DNA结构,闭环双链DNA，一条重链，一条轻链。不同生物线粒体 基因组大小不同，人 16569bp。细胞器中有多个类核区，各含多拷贝的DNA分子。与核DNA相比，mt DNA所占的比例很小，仅为1。mtDNA结构紧凑，几乎没有重复序列。mtDNA上某些基因可以重叠，但没有内含子。有一个D环（非编码区），2个复制起始点。动物细胞mt DNA编码2个rRNA、22个tRNA和 多种酶蛋白，如细胞色素氧化酶、ATP酶等。,（二）线粒体DNA的复制过程,D环复制（D-loop replication）方式,（三）线粒体基因与疾病,1、勒伯尔遗传性视神经病 2、神经源性肌软弱、共计失调伴视网膜色素变性3、阿尔茨海墨病4、氨基苷类抗生素致聋5、帕金森氏病6、糖尿病7、心机病8、衰老与肿瘤,mtDNA几乎没有重复序列；没有内含子；某些区域基因重叠；没有蛋白质保护；所以mtDNA基因突变频率高于核DNA。引发许多疾病：,五、噬菌体和病毒DNA的复制,（一）单链环状DNA病毒的复制,1、第一阶段：以亲本单链（）为模板，合成 互补链（），形成闭合的双链环状复制形。2、第二阶段：滚环复制。一个负链可以合成许多 正链，正链用于噬菌体包装。,（二）线状DNA病毒的复制,1、双链线状DNA的复制 有两种起始类型：从DNA分子的中间起始 从DNA分子末端起始,腺病毒DNA的复制：从DNA分子末端起始，以单链置换形式进行。,2、双链线状DNA复制的终止：形成一个大分子的串联体（多联体）。,图 p116页,3、单链线状DNA的复制：微小病毒的复制,图 p118页,（三）逆转录病毒,1、逆转录病毒的复制：从单链RNA到双链DNA的生成分三步,逆转录酶有三种活性：RNA指导的DNA聚合酶活性；RNase活性；DNA指导的DNA聚合酶活性。,逆转录过程：,逆转录病毒RNA与宿主tRNA分子互补形成局 部双链，以tRNA为引物，合成DNA负链5端。,由RNaseH水解去除杂化双链中的RNA 5端。,新合成DNA负链的3端跳到模板RNA的3端，并通过两条链上共同的R序列形成杂交链。,DNA负链向5端延伸。,RNaseH去除杂化双链中的绝大部分RNA。,RNaseH去除RNA和tRNA引物。,DNA正链的3端跳到DNA负链的3端，以两条链共有的PBS序列杂交，形成局部双链。,双向延伸完成DNA双链合成。,以剩余的一段RNA作引物合成DNA正链的3端。,2、逆转录病毒与疾病：,逆转录病毒感染宿主细胞后，通过反向转录 整合到宿主基因组中形成相应的前病毒，这 些逆转录病毒及前病毒的基因产物可以致癌。,逆转录病毒大都是致癌RNA病毒。在人类，逆转录病毒的插入会引起某些肿瘤的发生。,ALV病毒插入到 c-myc基因座位后，可以不 同的方式激活这个癌基因，造成c-myc基因 的过渡表达，产生肿瘤。,3、HIV与药物,HIV 也是逆转录病毒，其复制过程及生活 周期类似于RNA肿瘤病毒。,HIV 一般不会将宿主细胞溶解，但HIV是 一种慢病毒，可以导致宿主细胞发生病变。,（一）突变（mutation）的概念：是指DNA碱基序列发生的可遗传的任何永久性的改变。,第二节 基因突变,一、突变概念和类型,自发突变：spontaneous mutation诱发突变：induced mutation 突变生成作用：mutagenesis突变基因：mutant gene突变体：mutant,相关概念：,（二）突变类型,（1）点突变（point mutation）：即碱基错配,点突变的重要特点之一是具有很高的回复突变率。,1、根据DNA碱基序列改变进行分类：,点突变：又分为单点突变和多点突变,（2）碱基插入（base insertion）,是指一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸插入到DNA大分子中间。,5 G C A G U A C A U G U C,丙 缬 组 缬,G A G U A C A U G U C,谷 酪 蛋 丝,实线：原来的密码读法虚线：缺失C后的密码读法,同义突变(synonymous mutation)：是指没有改变产物氨基酸序列的密码子变化，即与密码子的简并性相关。,3、根据对遗传信息的改变情况进行分类：,错义突变(missense mutation)：指碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的变化。有些错义突变严重影响蛋白质的功能，会产生致死性突变。有些错义突变基本不影响蛋白质功能，称为中性突变。中性突变与同义突变一起被称为无声突变。,无义突变(nonsense mutation)：是指某个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子变为蛋白质合成的终止密码子，使肽链合成过早终止。因而蛋白质产物一般没有活性。,回复突变（back 或 reverse mutation）：突变体失去的野生型性状可以通过第二次突变得到恢复，第二次突变叫回复突变。,5、根据突变效应是否背离野生型进行分类：,正向突变（forward mutation）：指改变了野生型性状的突变。,回复突变可以使原来的突变基因序列回复 正常，这是真正的回复突变，此情况很少。如：GGAGUAGGA,抑制突变可以发生在正向突变的基因之中，叫作 基因内抑制突变；,大多数是第二次点突变并没有改变正向突变 的DNA碱基序列，只是其突变效应被抑制了，这种第二次回复突变称为抑制突变(suppressor mutation)。,也可以发生在其它基因之中，叫作基因间抑制突变。,二、突变原因,（一）自发突变（spontaneous mutation）,1、DNA的复制错误：复制错误引起损伤，在DNA损伤中最为多见。,2、由于碱基本身存在互变异构体，可能形成错误 的碱基配对。,复制错误最多见于尿嘧啶（U）的渗入，另外偶有其它碱基的渗入。,3、碱基自发的化学变化：,（1）脱嘌呤或脱嘧啶作用：是指DNA分子上丢掉了嘌呤碱或嘧啶碱，形成无碱基位点，称为AP部位(apyrimidine，apurine site,AP)。在生理状态下，脱嘌呤是脱嘧啶的20倍。,（2）脱氨基作用：即胞嘧啶、腺嘌呤及鸟嘌呤 的环外氨基自发丢失。胞嘧啶尿嘧啶；腺嘌呤次黄嘌呤；鸟嘌呤黄嘌呤。脱氨基所至的碱基转 变可影响DNA的复制，由此产生突变。,4、氧化作用损伤碱基：,1、物理因素：包括紫外线(UV)、x射线、射线等各种辐射。,（二）诱发突变（induced mutation）,2、化学诱变剂：,（三）基因的人工诱变,1、体外定向突变的原理：,此技术由加拿大学者 Michael Smith 于1985年建立。主要由于基因和蛋白质结构与功能的研究。,（1）体外定向突变的方法：聚核苷酸介导的单链模板定点突变；双引物法定点突变；用掺入U 的单链为模板进行聚核苷酸介导的体外定点突变。,（2）聚核苷酸介导的定点突变原理：,先合成一条包括定点突变碱基及附近序列 的一段寡核苷酸。将待研究的DNA克隆变性后插入到M13中。将合成的寡核苷酸与M13中的DNA克隆进 行分子杂交。以寡核苷酸为引物，M13中的DNA克隆的 互补单链为模板，合成完整的互补链。将此双链DNA导入大肠杆菌中，经修复和DNA复制即可得到稳定遗传的突变DNA克隆。,获得的突变体DNA再送回细胞内，检测突变效应：等位基因代换法；重组DNA技术；DNA同源重组。,2、体外定向突变的应用：,（1）将胰高血糖素21位的天冬氨酸突变为丙氨酸，研究胰高血糖素结构与功能的变化。,（2）研究组蛋白脱乙酰基酶保守氨基酸中组氨酸的定点突变对其功能的影响。,（3）通过人血红蛋白99、82位点突变，研究血红蛋白四聚体的稳定性。,第三节 DNA损伤的修复系统,复制后修复：主要包括 重组修复系统、SOS修复系统。,修复环境因素致DNA损伤的系统损伤修复 主要包括：光修复系统、切除修复系统,1、尿嘧啶糖苷酶修复系统：对于纠正复制错误尤为重要。,一、复制修复,2、错配修复系统：,DNA复制的保真性：遵循碱基配对规律DNApol对碱基的的严格选择功能DNApol的35即时校读功能错配修复系统第二次纠正错误DNA糖苷酶修复系统,大肠杆菌错配修复系统参与因素：三种错配修复基因的表达产物MutS、MutL 和MutH启动该系统。GATC内切核酸酶（错配矫正酶）与MutH蛋 白一 起切开单链。DNA解螺旋酶解螺旋。双向外切核酸酶依次切除错配的核苷酸。DNApol填补空隙。DNA连接酶完成修复。,（1）错配修复系统作用机制,错配修复过程：,MutS识别结合到错配部位，形成MutS-DNA错配复合物启动,MutL与错配复合物结合，激活GATC核酸内切酶和MutH蛋白,二者对含有错配碱基和GATC序列的单链进行内切,DNA解螺旋酶(MutH蛋白)解螺旋,双向性外切核酸酶依次切除错配的核苷酸,DNApol以甲基化的亲代母链为模板填补空隙,DNA连接酶连接切口完成修复,CH3,CH3,5,3,MutL,MutS,MutH,CH3,CH3,5,3,解螺旋酶外切核酸酶,CH3,CH3,5,3,DNApol,DNA连接酶,如何识别复制后碱基错配的子链呢？,正常情况下，天然DNA复制后腺嘌呤的N6位都进行甲基化。腺嘌呤的甲基化是错配修复系统的识别标志。这一标志具有碱基序列的特异性，即N6-甲基腺嘌呤都存在于GATC序列中。新合成子链在其合成后瞬间GATC序列中的腺嘌呤未被甲基化，修复系统就能区分甲基化的母链与未被甲基化的子链。,真核细胞的错配修复系统：错配修复基因已从酵母和人类克隆出来，其产物功能与大肠杆菌相似，都具有链特异性，但修复能力强于大肠杆菌。大肠杆菌只能修复3个或3个以下的错配核苷酸，而人类则可修复5个或5个以上的错配袢。,（2）错配修复系统缺陷与人类疾病：,人类四种错配修复基因中任何一种基因发生 突 变均可产生错配修复缺陷，这是遗传性非 息肉型结肠癌（HNPCC）发病的病因。错配修复缺失促进溃疡性结肠炎患者的癌变 转化过程。,3、无嘌呤（AP）修复：,碱基丢失可产生AP位点：一方面利用AP内切酶、53外切酶、聚合酶和连接酶的修复作用；另一方面直接利用插入酶补回正确的碱基。关于碱基插入酶的生物学意义不十分清楚，它可能为修复AP位点提供了一条更为迅捷的途径，当AP内切酶基因突变时，这一途径更为重要。,1、光修复,光修复酶(photolyase),UV,二、损伤修复,2、甲基转移酶：,在烷化剂作用下，鸟嘌呤的 6 位可被甲基化 生成O6-甲基鸟嘌呤。O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶能去除O6上的甲基，恢复正常的鸟嘌呤。,3、切除修复,是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-pol和连接酶完成。,E.coli的切除修复机制,E.coli的切除修复方式,DNApol,dNTP,OH P,DNA ligase,ATPADP,UvrA,UvrB,UvrC,UvrB,UvrD,1、重组修复,三、复制后修复,这种修复是指DNA分子损伤范围较大，来不及 修复就进行复制，复制后再进行切除修复，故 称复制后修复。,大肠杆菌重组修复机制：,2、SOS修复,当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。在E.coli，各种与修复有关的基因，组成一个称为调节子(regulon)的网络式调控系统。这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。故称错误倾向修复。,四、限制与修饰,细菌的限制修饰系统由甲基化酶和限制性核酸内切酶组成，防止外来DNA的入侵。即：限制性核酸内切酶只能切断外来DNA，不能切割自身，因自身DNA有甲基化的修饰。,复习思考题,1、解释概念：Klenow片段、缺口平移、岗崎片段,2、试述解旋酶、单链DNA结合蛋白、拓扑异构酶、原核生物DNA聚合酶和、Klenow片段、真核生物DNA聚合酶的作用特点。,3、参与DNA复制的主要物质有哪些？DNA聚合反应的特点如何？4、原核生物DNA复制起始所参与的因素有哪些？作用如何？5、何谓端粒、端粒酶？端粒的结构与功能如何？试分析端粒和端粒酶与衰老和肿瘤的关系 怎样通过抑制端粒酶活性来开发抗肿瘤药物？,6、逆转录酶有哪三种活性？试述逆转录病毒DNA 的复制过程，并解释其致癌机制。7、解释概念：突变、点突变、框移突变、同义突变、错义突变、无义突变、正向突变、回复突变、抑制突变、启动子上升突变、启动子下降突变,8、简述尿嘧啶糖苷酶修复系统的过程。9、试比较复制修复、损伤修复、复制后修复的 不同点。,