《琼脂扩散实验》PPT课件.ppt

实验十三 琼脂扩散试验,一、实验目的,学习掌握琼脂扩散试验的原理与应用熟悉掌握其基本操作方法,二、实验原理,沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体特异性结合，在二者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下，可形成肉眼可见的沉淀物的反应。根据反应中使用的介质和检测方法不同，可将沉淀反应分为液相沉淀反应和凝胶内沉淀反应两种类型,适合比例性,抗体含量,抗原含量,前带,后带,等价带,网格学说（lattice theory）,抗体过剩,抗原过剩,抗体抗体比例合适,液相沉淀反应,环状沉淀絮状沉淀（免疫比浊）,凝胶内沉淀反应,单向琼脂扩散双向琼脂扩散免疫电泳,凝胶内沉淀反应,免疫扩散技术,免疫电泳技术,单向扩散试验,双向扩散试验,火箭电泳,对流电泳,免疫电泳,免疫扩散,根据沉淀线的数量、位置和形状，与已知的标准(或正常)抗原抗体形成的沉淀线比较，即可对样品中所含成分及其性质进行分析、鉴定。,由于电场的作用，限制了抗原、抗体的自由扩散，而使其定向泳动，因而增加了试验的灵敏度，并缩短反应时间。,根据样品的沉淀峰长度即可计算出待测抗原的含量；反之，当琼脂中抗原浓度固定时，便可测定待测抗体的含量。,三、实验器材,兔抗BSA抗体BSA0.01mol/LPBS缓冲液1%离子琼脂打孔器,四、实验内容及步骤,1、琼脂板制作2、打孔3、加样4、反应5、结果观察,