《弧菌科常规检验》PPT课件.ppt
弧菌科常规检验,弧菌科种类,弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光菌属等,弧菌科共同特征,革兰阴性菌需氧兼性厌氧营养要求不高氧化酶发酵葡萄糖产酸不产气,弧菌科三个菌属的鉴别,霍乱弧菌,是引起烈性肠道传染病霍乱的病原体包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株,形态染色,革兰阴性弧形或逗点状单鞭毛，运动呈“穿梭样”或“流星样”无芽孢，无荚膜在新鲜粪便中成“鱼群样”排列,霍乱弧菌,革兰染色,鞭毛染色,培养特性,兼性厌氧营养要求不高耐碱不耐酸，常用pH8.49.2碱性培养基在液体培养基中形成菌膜菌落圆形、较大、扁平,霍乱弧菌常用培养基,碱性蛋白胨水碱性琼脂平板硫代硫酸钠-枸櫞酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）庆大霉素琼脂平板（含亚碲酸钾）,生化反应,霍乱弧菌生物型,O1群霍乱弧菌分为古典生物型和ElTor生物型两种生物型具有相同的抗原结构两种生物型多数生物学性状相似,霍乱弧菌两种生物型的鉴别,霍乱弧菌分群、型,O抗原是霍乱弧菌分群和型的基础根据O抗原不同分为139个血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群称为非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（见下表）,抵抗力与变异,ElTor型抵抗力较古典型强，在水中存活时间长对酸性物质敏感对庆大霉素耐受多次传代可失去典型形态而成为杆状,临床意义,致病物质：霍乱肠毒素，导致小肠上皮细胞分泌功能亢进，分泌大量肠液。所致疾病：经肠道传染，引起烈性肠道传染病霍乱，为甲类传染病。典型病人粪便呈“米泔水”样病后可获得牢固免疫，以SIgA为主。我国霍乱流行菌株以ElTor小川型为主。,作用机制示意图,微生物检验标本采集,发病早期采集标本以“米泔水”样便为主，及时送检卡布培养基保存严密包装，专人送检,检验程序,标本,增菌培养碱性蛋白胨水,分离培养（TCBS、碱性平板）,生化鉴定分型,血清学鉴定,确诊报告,初步报告,快速诊断,直接涂片 动力、制动试验,检验方法显微镜检查,涂片染色：标本直接涂片革兰染色，注意形态、排列动力观察：压滴法或暗视野镜检，注意运动方式制动试验：O1诊断血清与菌体结合，动力消失,分离培养,标本接种碱性蛋白胨水增菌68小时，转种TCBS或庆大霉素琼脂，TCBS：出现黄色菌落庆大霉素琼脂：出现中心灰褐色的菌落,鉴定,生化反应：粘丝试验、霍乱红反应确定血清群：O1群诊断血清与可疑菌落作玻片凝集，以确定是否为O1群确定血清型：与分型诊断血清作玻片凝集，以确定血清型别 确定生物型：第组噬菌体裂解试验 多粘菌素B敏感试验 鸡红细胞凝集试验 溶血试验,副溶血性弧菌生物学性状,革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽孢，无荚膜营养要求 不高，嗜盐性，最适盐浓度3.5NaCl，无盐培养基不生长TCBS：形成不发酵蔗糖的绿色菌落神奈川现象：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔红细胞，不溶解马红细胞,副溶血性弧菌临床意义,致病物质：溶血素（耐热直接溶血素和耐热相关溶血素）所致疾病：食入副溶血性弧菌污染的盐腌食品，引起食物中毒,气单胞菌属,形态染色：革兰阴性杆菌，或球杆状、丝状，极端鞭毛，无芽孢生长条件：兼性厌氧；营养要求不高 生长温度较宽，045 嗜冷菌37以下生长 嗜温菌1042生长,气单胞菌属,生长现象 TCBS上不生长 血平板：灰白、光滑、凸起菌落 肠道选择平板：形成不发酵乳糖菌落生化反应氧化酶、触酶 发酵葡萄糖产酸产气 6.5NaCl不生长 O129不敏感多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药,气单胞菌属临床意义,致病物质：溶血毒素、细胞毒素所致疾病：肠道感染：是夏季腹泻常见病原菌 肠外感染：败血症、伤口感染等多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药,检验程序,标本,增菌,分离培养（血平板、Mac）,全面生化反应,可疑菌落,肠毒素测定,初步生化反应,涂片染色镜检,血标本,氧化酶TCBS生长O/129耐盐试验,鉴定试验,与肠道杆菌、非发酵菌鉴别与邻单胞菌属和弧菌属鉴别气单胞菌属种间鉴别,肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别,鉴定依据,革兰阴性杆菌，丛鞭毛肠道选择平板上无色透明菌落氧化酶、葡萄糖发酵O/129：RTCBS：6.5NaCl：,邻单胞菌属主要性状,只有一个菌种：类志贺邻单胞菌革兰阴性杆菌，单鞭毛或丛鞭毛，无芽孢，无荚膜兼性厌氧，营养要求不高在SS平板形成不发酵乳糖菌落氧化酶，葡萄糖发酵O/129：STCBS：不生长6.5NaCl：不生长赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸双水解均多数菌株产-内酰胺酶，对青霉素耐药,邻单胞菌属临床意义,腹泻、食物中毒，多见于夏季败血症、脑膜炎等，多见于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。,邻单胞菌属检验程序,标本,增菌,分离培养（血平板、Mac）,全面生化反应,可疑菌落,初步生化反应,涂片染色镜检,血标本,氧化酶TCBS生长O/129耐盐试验,邻单胞菌属鉴定,与志贺菌属鉴别：氧化酶、动力、血清学与气单胞菌属鉴别：O/129，肌醇试验与弧菌属鉴别：TCBS、6.5NaCl生长试验,
