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    《常见免疫学检查》PPT课件.ppt

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    《常见免疫学检查》PPT课件.ppt

    临床常用免疫学检查,临床常用免疫学检查,血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)测定血清补体测定细胞免疫检测感染免疫检测自身免疫检查肝炎病毒标志物检测肿瘤标志物检测,血清免疫球蛋白分类,Ig通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白。应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。IgA:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。,血清免疫球蛋白,IgM:分子量最大,由5个IgM单体通过J链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高5001000倍。测定方法:单向免疫扩散法(RID)或免疫比浊法。,血清免疫球蛋白测定参考值,参考值:IgG:7.616.6g/L(RID法)IgA:7103350mg/L IgM:0.482.12 g/L,.,临床意义 免疫球蛋白增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎等。单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。,免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。血清IgD测定 免疫扩散法:062mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗“O”抗体等均属IgD,但活性甚低。,血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的FceR结合,产生I型变态反应。ELASA:0.10.9mg/L 临床意义:1.I型变态反应 2.IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等 3.慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。,是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分子或片段,一般不具有抗体活性。参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性意义:1.多发性骨髓瘤(MM),占35%65%,其中IgG型占60%左右;IgA型占20%左右;轻链型占15%左右;IgD、IgE型罕见。2.巨球蛋白血症。3.重链病(HCDs)。4.半分子病。5.恶性淋巴瘤。6.良性M蛋白血症。,血清M蛋白测定(M protein,monoclonal immunoglobulins),血清补体测定,补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3组:9种补体成分(C1C9);B、D、P、H、I 因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、C4结合蛋白、促衰变因子等。总补体溶血活性(CH50)测定参考值 试管法:50000100000U/L 意义:增高 见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。降低 见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。,血清补体测定,血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。参考值:免疫比浊法0.851.70g/L 增高 作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。降低 补体合成能力降低;合成原料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。,血清补体测定,血清C4测定:由肝脏、吞噬细胞合成,参与补体的经典激活途径。参考值:单向免疫扩散法:0.197+/-0.109/L。临床意义基本与C3相似,降低还见于多发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性C4缺乏症等。,血清补体测定,补体C1q测定参考值:0.1790.04g/L 临床意义:与C3相似,降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。B因子测定-C3激活剂前体,细胞免疫检查,淋巴细胞表面标志物检测 T淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花形成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以及免疫酶染色法等。E玫瑰花形成试验 SRBC+CD2参考值 Et 64.4%6.7%免疫荧光法,T淋巴细胞表面标志物检测,意义 可用于T淋巴细胞计数,T淋巴细胞亚群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。CD3 分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面,是总T淋巴细胞的重要标志,CD3+常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。CD3+主要见于免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。,T细胞分化抗原测定,白细胞分化抗原(cluster differentiation,CD)CD3代表总T淋巴细胞,CD4是辅助、诱导T细胞的标志,CD8是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。参考值:免疫荧光法(IFA):CD3为63.1%10.8%;CD4 为42.8%9.5%;CD8 19.6%5.9%;CD4/CD8为(2.20.7)/1。流式细胞术:CD3 61%85%;CD4 28%58%;CD8 19%48%;CD4/CD80.92.0/1。,T细胞分化抗原测定,临床意义CD3CD4+T细胞下降 常见于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等;升高见于类风湿性关节炎活动期。CD8+T细胞下降 常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合征、重症肌无力、DM(II型)以及膜型肾小球肾炎等;升高见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢性乙肝。CD4+/CD8+比值下降,常见于AIDS、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;增高见于类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。,淋巴细胞功能检测,T细胞转化试验形态学法:T细胞转化率60.1%7.6%3H-TdR掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量,记录每分钟脉冲数(cpm)。SI(刺激指数)=PHA刺激管cpm均值/对照管cpm均值SI2为有意义,2为淋巴细胞转化率降低。,T细胞转化试验,临床意义判断机体细胞免疫功能水平,降低常见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者,如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。增高常见于Down综合征。估计疾病的疗效与预后,B淋巴细胞表面标志物检测,表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和CD40等表面受体:B细胞抗原受体(BCR)、细胞因子受体(CKR)、补体受体(CR)与Fc受体等。B细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是B细胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类型Ig的单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。,B淋巴细胞表面标志物检测,参考值:免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标志的细胞百分数表示)SmIg+细胞总数:均值21%(16%28%)SmIgG+细胞:均值7.1%(4%13%)SmIgM+细胞:均值8.9%(7%13%)SmIgA+细胞:均值2.2%(1%4%)SmIgD+细胞:均值6.2%(5%8%)SmIgE+细胞:均值0.9%(0%1.5%),B淋巴细胞表面标志物检测,临床意义SmIg+细胞增高:常与B细胞恶性增殖有关,主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。SmIg+细胞减低:主要与体液免疫缺陷有关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺陷病等。,B淋巴细胞表面标志物检测,B细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定参考值:FACS:CD19+细胞 11.74%3.73%临床意义 CD19为全部B细胞共有的表面标志,增高见于B细胞系统的恶性种瘤,减低见于体液免疫缺陷病。,NK细胞活性测定,NK细胞能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。LDH释放法 参考值 细胞毒指数:27.5%52.5%51Cr释放法参考值 NK细胞活性(自然杀伤率):47.6%76.8%,NK细胞活性测定,临床意义活性升高 常见于病毒感染的早期,Down综合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。活性降低 常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制剂治疗者等。肿瘤疗效观察及预后评价免疫调节功能 NK细胞可释放INF-、INF-和GM-CSF等细胞因子。,病毒性肝炎的实验诊断 我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人2700万人,每年新发病例900万人,HBsAg携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制,30发展为肝硬化,510发展为肝癌,故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家,慢性HBV携带者患肝癌危险性较非携带者高100倍。,HBV的形态结构形态:球形颗粒,直径约42nm外膜:厚约7nm,HBsAg+脂类内核(核衣壳):直径27nm,HBcAg、DNAP、病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶,HBV在血清中的存在形式完整的病毒颗粒(Dane颗粒),如前述,能复制,有传染 性;乙肝表面抗原颗粒,为22 nm的小球型颗粒,由HBsAg和脂类组成,不含DNA,不能复制,不具有传染性*,数量最多;管型颗粒,长30-40 nm的,由HBsAg和脂类组成,不含DNA,不能复制,不具有传染性*,血清中数量最少。,HBV的基因结构 HBV基因组由一个双链缺口环型DNA组成,约有3,200个核苷酸,含有4个开放读码框(ORF),分别为ORF S/PreS、ORF C、ORF P、和ORF X,分别编码外膜蛋白(根据起始位点不同分别为HBsAg、前S1、前S2)、核壳蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和X蛋白(X抗原,HBxAg)。,基因型1979年 第一个HBV DNA全序列1988年 日本学者将HBV分为A、B、C、D四个基因型。(Okamoto H,et al.J Gen Virol,1988;69:2575)1992年 增加E、F两型(Norder H,et al.Virol,1992;73:3141)临床意义 不同的基因型可能致病性不同,我国以B、C型为主,台湾发现:50岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者C型较多,而50岁以下的肝细胞癌患者B型较多(Kao JH,et al.Gastroenterology,2000;118:554)。,目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统:HBsAg和抗HBs HBcAg和抗HBc HBeAg和抗HBe Pre-S2和抗Pre-S2。,HBsAg阳性的意义(1)HBV感染的潜伏期;(2)乙型肝炎急性期;(3)慢性或迁延性乙型肝炎活动期;(4)肝炎后肝硬化或原发性肝癌;(5)无症状HBsAg长期携带者。(6)HbsAg阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。,注意!一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致HBsAg假阳性;二、HBsAg假阴性 常见的原因为:5%的急性感染者肝炎症状出现后仍阴性,极少数的慢性感染者也为HBsAg阴性,这种情况需要检测抗HBc-IgM及HBV DNA;S基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变,由于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测HBsAg的a决定簇,这一区域的点突变即可导致临界测定值或阴性结果;由于慢性病毒携带者(低水平HBsAg携带者)或HBV感染潜伏期,HBsAg浓度低于检测水平的下限。,血清抗HBs检测的意义(1)在乙型肝炎感染率调查时,HBsAg、抗-HBs和抗-HBc均为感染率的指标。在这三项指标中,只要其中一项阳性,表示受过HBV感染。(2)抗HBs是对HBV免疫的指标,抗HBs阳性率和滴度表示人群的免疫状况。(3)乙型肝炎的诊断和鉴别诊断,在HBV感染后3个月,血清中出现抗HBs。采集双份血清(急性期和恢复期)同时检测,抗HBs阳转,或恢复期与急性期比较,抗体滴度有4倍或4倍以上增长,表示这次感染为HBV感染。(4)乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后,采集血清检测抗HBs,如抗HBs阳转或抗体滴度明显提高,表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。(5)对乙型肝炎预后的判断。抗HBs的出现表示疾病处于恢复期,预后较佳。,同时可检出抗HBs及HBsAg见于以下几种情形:急性HBV感染时一过性存在,两者浓度均很低(以免疫复合物的形式出现),以后再采血检测仅有抗HBs;前后或同时感染两种亚型HBV,HBsAg短暂或持续存在反映其中一种亚型感染,抗HBs及HBsAg同时检出通常要持续很久,且浓度均很高;抗HBs假阳性;编码HBsAg的基因变异使得HBsAg抗原性改变,原型抗HBs不能将其清除。,抗HBc检测的意义(1)HBcAg是HBV感染和复制的标志之一,高滴度的抗HBc表示HBV现症感染,低滴度的抗HBc表示过去感染,常与抗HBs 并存。(2)高滴度的抗HBc-IgM是诊断急性肝炎的金指标,低度的抗HBc-IgM表示慢性肝炎急性发作。(3)血中HBcIgA的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病变有明显的相关性,随病情恢复,HBcIgA消失,持续不降提示慢性化和病情进展。(4)在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出高滴度的抗HBc,表示有传染性,此血源不能作输血用。,注意!A、临界阳性一般是假阳性,是由于IgM型引起的交叉反应。B、抗HBc阴性而HBsAg阳性一般发生在免疫缺陷病例,这时存 HBV复制的其他标志如 HBeAg及高滴度的HBV DNA。C、对抗HBc单独阳性,排除假阳性后,美国CDC有以下解释:急性感染后的恢复早期(窗期)在HBV急性感染消退时,HBsAg减少甚至消失,抗HBs尚未出现,抗HBc是唯一能检出 的特异性指标,此时抗HBc IgM也为阳性。被动转移:HBsAg携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被 动转移(抗HBc可通过胎盘)而呈现抗HBc单独阳性。远期感染伴抗 HBs消失,这种情况通常在感染后多年才会 发生,且相当少见(0.5%)。远期感染伴有低水平HBsAg。HDV重复感染继发HBsAg产生下降,抗HBc始终不出现或延迟出现者占一定比例,可能系1.与抗原复合2.种族差异3.免疫缺陷,如化疗后4.基因变异,HBeAg:A.传染性:HBeAg是临床上表示病毒复制较为实用的指标,因此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg携带者中,HBeAg及HBV-DNA检测可以用来评估其传染危险性,特别是对医务界的HBsAg携带者,非常有必要了解他是否会传染给他的病人,90%HBeAg阳性HBsAg携带者可以传染给她们的新生儿,而HBeAg阴性或抗HBe阳性的孕妇中只有10%会传染给婴儿。B.预后:急性期HBeAg的消失通常伴随ALT的降低,预示着疾病的好转;HBeAg持续阳性超过12个星期提示HBV感染趋向慢性;HBeAg阳性的无症状者很少见;如果在慢性感染期HBeAg阳性,一般为慢性急性化或病人免疫缺陷,这种情况的病人如果又出现HBeAg的消失,则被认为是预后好的信号。,注意!前C区基因变异(如1896位gua变为-arg导致终止密码子的出现干扰了HBeAg的翻译)导致不能生成和分泌HBeAg,血清中HBeAg阴性,但这种突变并不影响乙肝病毒的复制,仍可形成完整的病毒颗粒,该种情况下尽管检测不到HBeAg,慢性HBV感染炎症反应也相当强。,抗-HBe:A、反映血清感染性:通常情况下HBsAg(+)、抗HBe(+)病例的传染性较低,但有部分病例尽管抗HBe(+)也具有很高的传染性,因此,要评价HBeAg阴性血清的传染性,推荐用检测HBV DNA,1/3的病例能达到大于106基因组/mL;B、监视急性和慢性HBV感染:血清HBeAg消失、抗HBe出现对监视急慢性HBV感染很有诊断价值,特别是抗HBe出现更有预见价值,在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善;C、预后:抗 HBe阳转出现在HBeAg阴转后早期(2周内),可能预示急性肝炎恢复顺利;如出现在晚期(HBeAg阴转后6周以上)或不出现抗HBe,则提示病程迁延,可能发展为慢性迁延性肝炎或慢性活动性肝炎。,注意!HBeAg(-)/抗HBe(-)的慢性HBV感染有不同的感染状态:有的表示复制病毒已清除,但无抗HBe应答;有的复制病毒一时减少,HBeAg消失后可再现;有的由于前C区变异不能编码合成HBeAg。,前S2抗原及抗体 pre-S2抗原检测可作为判断HBV复制的一项指标,同时可对HBV复制作出定量的推断,动态测定pre-S2抗原的变化,有助于急、慢性乙型肝炎的治疗预后的判断。抗pre-S2在急性乙型肝炎恢复早期出现,并发挥其保护性抗体的作用,对观察乙型肝炎病情进展、预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。,常规检测HBV抗原抗体的基本解释HBsAg 急慢性HBV感染;可能具有传染性;浓度降低表明感 染恢复HBeAg 反映HBV复制;有传染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢复抗-HBs 感染后免疫;对疫苗的免疫应答抗-HBe 表示HBV低复制或不复制抗-HBc 低滴度表示过去感染,高滴度表示现行感染抗HBc-IgM 高滴度是诊断急性HBV感染最好的指标,监视慢性HBV感染。,不同厂家和方法HBV标志物测定的比较 HBsAg 抗-HBsHBeAg 抗-HBe抗-HBc 进口 34 9 22 27 42 A 34 9 12 18 37 B 34 8 13 14 37 C 32 8 33 15 37 n=44 PCR:+26-18 前S1:+20-24 抗前S1:+12-32,国产“两对半”试剂与进口试剂比较(阳性符合率%)A B C HBsAg 100(34/34)100(34/34)94.1(32/34)抗-HBs 100(9/9)88.9(8/9)88.9(8/9)HBeAg 54.5(12/22)59.1(13/22)(33/22)抗-HBe 66.7(18/27)51.9(14/27)55.6(15/27)抗-HBc 88.1(37/42)88.1(37/42)88.1(37/42),乙型肝炎病毒血清标记物检测,HBeAg,Anti-HBe或抗HbeHBeAg,Anti-HBc或抗Hbc 测定方法:ELASA,RIA,HBsAg,Anti-HBs或抗HBs,乙型肝炎病毒血清标记物检测,HBsAg(+)表示肝中有HBV见于:乙型肝炎潜伏期和急性期。慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌。慢性HBsAg携带者。Anti-HBs或抗HBs:中和抗体,乙型肝炎病毒血清标记物检测,HBeAg:有乙型肝炎,是病毒复制活跃,传染性强的指标;持续阳性易转变为慢性肝炎;HBeAg+和 HBsAg+可垂直传播。Anti-HBe或抗Hbe:出现于急性感染的恢复期,持续时间较长。意味着HBV部分被清除或抑制,复制减少,传染性降低。,乙型肝炎病毒血清标记物,Anti-HBc或抗HBc:反映肝细胞受到HBV侵害的一种指标,主要包括IgM、IgG、IgA。抗HBc IgM阳性是最早出现的特异性抗体,是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标,并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活动性肝炎。抗HBc IgG 其阳性滴度高,表明患有乙型肝炎,指正在感染;低滴度为既往感染指标,体内时间长。,乙型肝炎病毒血清标记物,HBV-DNA定性和定量测定:目前定量测定范围为102 108 拷贝/ml。与血清免疫学结果的综合评价HBsAg和Anti-HBsHBeAg,Anti-HBe,Anti-HBc5项标志物的变化和联合检测的临床意义,丙型肝炎病毒标志物检测,抗-HCV(ELISA)抗-HCV IgM阳性 常见于急性HCV感染,是诊断丙肝的早期敏感指标;是HCV活动的指标,是判断HCV传染性的指标。抗-HCV IgGHCV-RNA测定测定方法 逆转录巢式PCR法,荧光定量PCR法(第三代试剂抗原包括C、NS3、NS4、NS5;丙肝病毒易发生变异,抗-HCV阳转时间差异较大),血清抗链球菌溶血素“O”测定,参考值:乳胶凝集法(LAT):500U 意义:增高 常见于A组溶血链球菌感染相关疾病,如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。ASO 在A组溶血链球菌感染后1周开始升高,46周达高峰,可持续几个月或几年。假阳性与假阴性,伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定,肥达(Widal)反应参考值O凝集价1:80伤寒H凝集价1:160副伤寒A、B、C凝集价1:80伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定参考值 ELASA法:阴性或滴度1:20。,伤寒、副伤寒沙门菌免疫测定,临床意义O升高,H正常H正常,O升高O升高,H升高O升高,A、B、C任何一项升高,血清C-反应蛋白(CRP)测定,C-反应蛋白是一种由肝脏合成的,能与肺炎双球菌C多糖体起反应的急性时相反应蛋白,具有激活补体,促进吞噬和免疫调理作用。参考值:8.2mg/L(免疫比浊法)意义 组织损伤,如大手术,严重创伤,烧伤,心肌梗死等,发病后数小时迅速增高,病情好转后又迅速下降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。风湿热活动期,可达200mg/L以上。细菌性感染常明显升高,病毒性感染升高不明显或轻度升高。恶性肿瘤,器官移植后排斥反应,妊娠等可见明显升高可在发病后数小时迅速增高,病情好转后又迅速下降至正常。,肾综合征出血热病毒抗体检测,参考值IFA,ELASA:阴性特异性IgM-感染后23天检出,710天达高峰。特异性IgG感染后两周出现,可持续多年。,艾滋病血清学检查,检测抗HIV(I型或II型)是AIDS诊断的一个主要指标。抗原为HIV感染的T细胞株的病毒抗原(HLA-DR抗原污染可出现假阳性)。方法:初筛试验ELASA,乳胶凝集法,免疫印迹法,斑点免疫渗透法。确认试验 可选用蛋白印迹试验(WB),PCR法检查HIV病毒DNA。HIV抗原检测 P24抗原(病毒衣壳蛋白,具群特异性)。HIV核酸检测 DNA-PCR;RNA-PCR,梅毒血清学检查,是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致的一种性传播疾病。梅毒螺旋体抗体检测:非密螺旋体抗原试验和密螺旋体抗原试验,前者为筛选试验和治疗效果监测,后者为确诊诊断。暗视野显微镜检查梅毒螺旋体PCR检测,甲胎蛋白(AFP)测定,参考值 CLIA,RIA,ELASA:血清25g/L临床意义原发性肝癌明显升高,AFP300 g/L病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但常 300 g/L。生殖腺胚胎性肿瘤血清AFP升高妊娠小扁豆凝集素(LCA)结合型AFP25%提示原发性肝癌。,自身抗体检查,自身免疫性疾病(AID)AID-器官特异性和非器官特异性(抗原为细胞核或胞浆成分)及中间型。抗核抗体(ANA):是以细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的总称。间接免疫荧光检查有四种荧光图谱:均质型(抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体);周边型(抗dsDNA抗体);斑点型或颗粒型(抗U1-RNP、抗Sm、抗Scl-70、抗SS-B/La、抗SS-A/Ro等);核仁型(核糖体、U3-RNP、RNA聚合酶)。,自身抗体检查,抗核抗体(ANA)检查:抗各种细胞核成分(脱氧核糖核蛋白-DNP、DNA、可提取的核抗原-ENA和RNA等)。参考值:IFA法阴性,血清滴度1:40为阳性见于SLE(80%100%)、MCTD(100%)、原发性胆汁性肝硬化95%100%)、DM(30%50%)、RA等。,自身抗体检查,抗DNA抗体分为:抗ds-DNA、抗ss-DNA、抗z-DNA 抗z-DNA 对SLE有特异性,检出率在90%以上。抗dsDNA抗体测定的临床意义见于SLE活动期,阳性率70%90%。特异性教高(95%)敏感性较低-诊断与治疗监控。另外参与SLE发病机制。抗Sm抗体测定:为SLE所特有,疾病特异度达99%,且能反应疾病活动的程度,灵敏度较低,平均为20%。与CNS、肾病、肺纤维化及心膜炎有一定关系。,自身抗体检查,抗组蛋白抗体(AHA)测定临床意义:50%70%的SLE及95%以上的药物诱导性狼疮可出现,主要靶抗原为H2A-H2B DNA复合物,与SLE活动有关。抗核糖核蛋白(RNP)抗体测定临床意义:抗U1-RNP抗体主要与MCTD相关,在30%40%的SLE病人中可检测到,并常与Sm抗体相伴出现。常与下列临床表现有关,肾脏较少累及、雷诺现象、手肿胀、食管运动不良等。,自身抗体检查,抗SS-A/Ro抗体测定干燥综合征有三种不同的自身抗体:SSA、SSB、SSC(RANA),前两者仅见于原发性干燥综合征,后者见于伴类风湿性关节炎的继发性干燥综合征。SS-A/Ro抗体见于干燥综合征(SjS)(灵敏度88%96%),RA(3%10%),SLE(24%60%)。其他疾病:亚急性皮肤性狼疮(70%90%),新生儿狼疮(90%),补体C2/C4缺乏症(90%)。,自身抗体检查,抗SSB抗体(抗 La抗体、抗Ha抗体)测定多数情况下与SS-A/Ro抗体同时出现。干燥综合征(71%87%),新生儿狼疮综合征(75%)伴先天性心脏传导阻滞(30%40%)。抗Scl-70抗体测定 抗Scl-70抗体识别的抗原是DNA拓扑异构酶I,该酶参与超螺旋DNA的解螺旋。临床意义 特异性地出现于系统性硬化症(PPS)的病人,并提示预后不良。,自身抗体检查,自身抗体的检测抗核抗体谱:ANA滴度达1:80或以上者需考虑CTD的可能,再进一步检查ds-DNA、抗组蛋白、抗ENA抗体谱的检查。结缔组织病的抗核抗体谱SLE:ANA、抗(ds-DNA)、抗组蛋白、抗Sm、抗SSA。pSS:抗SSA、抗SSB。DM/PM:抗合成酶(jo-1,PL-7,PL-12)、抗SRP、抗Mi-2。SSc:ACA(抗着丝点)、抗Scl-70、抗核仁抗体。MCTD:ANA、抗RNP。,自身抗体检查,类风湿因子(RF):靶抗原为变性IgG的Fc部分,有IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五种类型。测定方法:速率散射法或速率比浊法。RIA,ELISA法90%RA患者呈阳性,IgA-RF与骨质破坏有关,早期升高提示病情严重,预后不良。IgE-RF升高时已属病情晚期。,自身抗体检查,抗线粒体抗体(AMA)抗心肌抗体(AHA)抗平滑肌抗体(ASMA)抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)抗磷脂抗体:有抗心脂抗体、狼疮抗凝物、假阳性梅毒反应等。主要出现在SLE和pSS,并与血小板减少、狼疮脑病、血管栓塞、习惯性自发性流产有关。HLA-B27,

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