实验二 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备及骨骼肌收缩性质的观察22.ppt

实验二 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备及骨骼肌收缩性质的观察,吉林大学国家级生物实验教学示范中心,实验目的,掌握制备具有正常收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本的基本操作技术，掌握蛙类手术器械的使用方法。通过增加和减少对蟾蜍坐骨神经的刺激强度和频率，观察记录腓肠肌收缩张力，分析探讨刺激强度和频率对骨骼肌收缩张力的关系。学习微机生物信号采集处理系统的使用。,实验原理,蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处，而且其离体组织的生活条件比较简单，易于控制和掌握。因此，蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本常被用来观察神经肌肉的兴奋性刺激与反应的规律及肌肉收缩特点等实验。一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度时间变化率三要素有关。,材料和方法,1、实验动物（laboratory animal)蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad）,雄性蟾蜍皮肤光滑，前肢趾上有黑色婚垫，会鸣叫。雌性蟾蜍皮肤粗糙，无婚垫，不会鸣叫。,1.材料和方法(Materials and methods),2、药品(drug)：任氏液,任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。可用于蛙的组织、器官润湿和营养。,3、器材(Experimental apparatus)RM6240生物信号处理系统（成都仪器厂）、神经标本盒、蛙板、剪刀、探针、玻璃分针、镊子、张力换能器。,RM6240C微机生物信号处理系统,S+S-E R1-R1+R2-R2+,材料和方法方法（N-M标本的制备）,1毁脑脊髓 2去下肢皮肤 3去上肢、内脏、头 4分离两腿 5.大腿坐骨神经 6.游离坐骨神经 7游离腓肠肌 8去掉小腿骨、肌肉、脚,材料和方法方法（仪器连接）,结果观察,单收缩：肌肉受到一次刺激，引起一次收缩和舒张的过程。复合收缩:肌肉受到连续刺激，前一次收缩和舒张尚未结束，新的收缩在此基础上出现的过程。不完全强直收缩 完全强直收缩,讨论,刺激强度对肌肉收缩的影响刺激强度小于兴奋性最高的运动单位的阈值时中等刺激强度时刺激强度大于兴奋性最低的运动单位的阈值时刺激频率对肌肉收缩的影响刺激落在前一次刺激引起的收缩的舒张期之后刺激落在前一次刺激引起的收缩的舒张期上刺激落在前一次刺激引起的收缩的收缩期上,注意事项,标本制备时要注意保持标本的湿润。标本制备时尽量避免使用尖锐的、铁制器械，以免损伤神经、肌肉。标本的股骨要保留一部分（后2/3），以利于下一步实验。实验中保持换能器与标本连线的张力不变。标本未给刺激即出现挛缩，是由于漏电引起，请检查连接。,