《啤酒发酵》PPT课件.ppt
第五章 啤酒发酵1 啤酒酵母一、酵母分类及命名 酵母在分类学上属于真菌门-子囊菌纲-原子囊亚纲-内孢霉目-酵母科-出芽酵母亚科-酵母属-种:上面酵母上面啤酒、下面酵母下面啤酒。啤酒专业刊物:S.cerevisiae 上面酵母 S.carlsbergensis 下面酵母一般M书刊将S.cerevisiae 称为啤酒酵母.命名原则:种名在前,属名在后.,发酵,二、啤酒酵母的凝聚性上面啤酒酵母:发酵时随CO2漂浮在液面上,发酵终了形成酵母泡盖,长时间放置很少沉淀。发酵1/3下面酵母:发酵过程中酵母分散,发酵终了酵母凝结成块,沉于容器底部。可发酵全部棉子糖鉴别特征:棉子糖 果糖 葡萄糖 半乳糖 蔗糖 蜜二糖 转化酶 蜜二糖酶下面酵母按凝聚性分:粉末、凝聚性、絮凝性,凝聚理论:不甚清楚,一般认为与酵母的遗传基因有关,至于是一个基因控制还是多个基因控制,观点不一。一般资料认为凝聚性受基因FLO1和FLO5控制。,三、卡尔酵母的一般特性;细胞卵圆形、圆形、椭;3.58.0 5.011m菌落乳白色,边缘波浪性易挑起;可发酵葡、果、蔗、麦、麦芽三糖、半乳糖、棉子糖、密二糖。不能发酵异麦芽糖、异麦三糖、麦芽四糖、糊精、淀粉。,四、优良酵母的筛选方法:1、材料:保存的斜面、高泡酒、沉淀酵母泥2、处理:材料89 P麦汁活化23次25,2d,用0.05%EDTA-Na稀释至10-610-7,浇双重皿各三个。27C培养23天,取正常菌落。分离单细胞-多级分离培养-发酵性能评定-投入生产。,五、啤酒酵母扩大培养1、出发菌株:保藏菌株、外购2、简易扩培过程:斜面-4只810%203d-4只810%无花183d 1L 810%无花1546d 20L卡氏罐1012%有花麦汁10L/只10121015d200L种子罐1012%100120L/只10121012d-1.01.2m3繁殖槽.培养成熟后,放走上层嫩酒,留部分酵母泥,加麦汁保持1213,通风20min/12h,发酵度3035%,60106个/mL降温至23低温贮存,以后重复进行。,扩大培养,名词:发酵度:发酵过程中浸出物浓度下降的百分率。外观发酵度:生产现场用糖度表测量发酵液的浓度计算得到的发酵度。真发酵度:将酒中乙醇蒸发之后,在用水补充至原体积,然后测其发酵度。真发酵度=外观发酵度 0.819发酵度极限最大外观:全部可发酵性糖都被发酵完毕测出的外观发酵度。成品酒的发酵度应接近发酵度极限。,2 啤酒发酵机理一、糖类发酵 EMP C2H5OH+CO2+能量+4ATP无O2糖发酵糖丙酮酸 CO2+H2O+能量+38ATP有O2TCA循环巴士德效应:糖经EMP代谢至丙酮酸,在有氧条件下酵母经TCA循环可获得更多的生物能,此时,无氧发酵被抑制,这种氧抑制嫌氧发酵代谢过程。糖代谢反应式:100g麦芽糖理论上可产酒精53.8g,实际只有9596%糖转化为酒精,其余形成高级醇、有机酸、脂类等以及酵母新细胞。C12H22O11+H2O+4ADP+4Pi-4 C2H5OH+4CO2+4ATP+Q,二、含氮物的变化下降 麦汁接种后,酵母必需吸收麦汁中的含氮物,用于合成酵母蛋白、核酸和其它含氮化合物,形成新酵母细胞。接种1520106个/ml高泡6070106个/mL AA的前驱体a-酮酸受细胞合成的反馈抑制,合成旺盛时,a-酮酸不积累;但中后期,缺乏AA麦汁,酵母合成速度减慢,对a-酮酸的反馈抑制建立不起来,会有较多酮酸进而转化为高级醇。啤酒中残存含N物影响酒的风味。300mg/L以下淡薄;450mg/L以上醇厚。,含氮物,三、啤酒中的风味物质含量少,影响大1、连二酮类VDKA连二酮和啤酒风味:2.3-戊二酮和丁二酮双乙酰总称,在酒中口味相似,但量比为1:36,且口味阀值:双0.10.2mg/L;戊1.0mg/L,故生产中以双乙酰作为啤酒是否成熟的限制性指标.GB4927-2001规定:优质啤酒双乙酰0.10mg/L双乙酰是具挥发性、强烈刺激性的化合物,啤酒中含量0.5mg/l以上时,具有明显的馊饭味。目前国内外优质啤酒一般将双乙酰控制在0.05mg/L以下,风味物质,B形成途径:211页 异丁醇 缬氨酸 a-酮异戊酸 糖丙酮酸 活性乙醛 a-乙酰乳酸 a-乙酰乳酸 a-ALDC a-乙酰-a-羟基丁酸 乙偶姻 双乙酰 双乙酰 异亮氨酸 丁二醇 活cell 无活cell 2,3-戊二酮 丁二醇 残存啤酒,C影响和消除的方法 减少a-乙酰乳酸的生成:使用优良的菌株;保存好现有菌种5代内;提高麦汁中a-氨基氮,缬氨酸高可抑制双合成。加速a-乙酰乳酸非酶氧化:a双氧化还原,慢双丁二醇酶促反应,快。提高含氧量,适当通风有利分解。,降低措施,控制和降低酵母的增殖浓度:降低酵母增殖:较低接种温度89C,较大接种量1520X106个/mL。增殖级数3 加速双乙酰还原:菌株透过能力不同;加大罐压。保持发酵液中活酵母数:粉末、通风或倒罐,加高泡酒等。高温处理:10C主发酵,12C还原双乙酰CO2洗涤。减少成品啤酒中溶解氧并加抗氧化剂。,选择产双乙酰少大麦原料。调整好发酵液的pH值:pH36分解为双乙酰。添加商品a-乙酰乳酸脱羧酶。采用基因工程酵母菌株:利用基因重组在酵母细胞内引进a-乙酰乳酸脱羧酶。日本,2、高级醇A形成机理:1907年德国化学家伊里希:有十几种AA在酵母转氨酶作用下将其氨基转移到a-酮戊二酸上,形成谷氨酸和a-酮酸,a-酮酸经脱羧还原形成比原AA少一个碳原子的高级醇。,B高级醇与啤酒风味高级醇主要指异丁醇、异戊醇及活性异戊醇,它是各种酒的香味和风味物质之一,适量可促进酒类香味,口味丰满,并促进协调性。过量产生异杂味,容易上头,啤酒中适宜含量5090mg/L。,高级醇,C降低啤酒中高级醇含量方法:酵母增殖的产物。1提供合适的麦汁中a-氨基氮;例:1112P麦汁a-氨基氮控制150180mg/L.2选择产生高级醇少的酵母菌株;3适当提高酵母的接种浓度15X106个/ml;4降低主酵前期发酵温度,控制酵母增殖级数35控制麦汁的含氧水平,防止倒罐时吸入空气;6大罐发酵,及时排出酵母,防止酵母自溶;7适当控制啤酒发酵度.,3、挥发酯:酯化反应;酵母生物合成。4、醛类:已检出的达20余种,乙醛由丙酮酸脱羧形成,但啤酒中含量一般很低。,来源,5、酸类:使口味活泼,爽口;缺乏,口味呆滞,粘稠,不爽口;过量:口感粗糙,不柔和,不协调,也意谓着污染了产酸细菌.国标12P浅色啤酒总酸2.6ml1molNaOH/100mL pH5.25.6pH4.24.6。,6、含硫化合物:SO2、H2S、CH3SCH3、CH3S-S-CH3、CH3SH、乙硫醇CH3CH3SH等,含量10-610-9,但有不良气味,是近代关心的焦点.,3 啤酒发酵技术 啤酒发酵工艺技术控制没有深入到发酵代谢机制的控制,而是对其发酵过程中影响因素的控制。一、啤酒发酵技术工艺控制1、酵母菌株选择:降糖快,双还原快,口味风味稳定的菌株。,发酵技术,2、麦汁组成:颜色、口味、组成直接影响酒质量。麦汁浓度:1015%正常发酵;溶氧水平:影响增殖,在39mg/L内增殖浓度相差50%;不饱和脂肪酸:0.510.0mg/L会促进酵母增殖。3、接种量:一般泥状酵母占麦汁体积0.41.0kg/hl,接种后细胞数:153X106个/mL。,4、发酵工艺条件控制:低温发酵:6.07.579 A依发酵温度分 中温发酵:891012,高温发酵:9101315 工厂多采用中温发酵,时间短,酵母死亡率低,使用代数一般控制5代以内.,B罐压、CO2对发酵影响:CO2抑制酵母增殖,对发酵速率略有影响,能明显抑制乙酸乙酯、异戊醇生成,有利于酒的风味,加压发酵的理论根据。控制0.010.02MPa.但酵母死亡快,使用代数少。,C酵母排放与贮酒:啤酒成熟即可降温0.3C/h至5C停留1天排酵母,然后再用11.5天时间降至0-1C贮酒718天过滤.,4 啤酒大型发酵罐发酵一、圆筒锥底发酵罐发酵罐 单罐法:发酵、贮酒在一个罐中进行。1、分类 两罐法:酵母增殖发酵贮酒在不同罐中两罐法 增殖主酵在发酵罐,后酵、贮酒在贮酒罐 增殖、主后酵在发酵罐,贮酒另一罐,CCT罐发酵,2、设备结构:圆筒体,碟形或椭圆形封头,锥底角7375度;径高比1:56;圆筒及锥底部分外部设34段冷却夹套;不锈钢、碳钢用T-541防腐;设绝热层:聚酰氨树脂易燃、现场发泡、苯乙烯泡沫塑料,3、优缺点:周期短;投资费用低;劳动强度低,易自控;发酵周期短。酒液澄清度差,难过滤,使用代数低。,二、露天罐发酵工艺1、进罐方式:繁殖槽法;直接法。2、接种量和接种温度:1218h满罐 一般直接法泥状酵母0.60.8%,接种后cell数153X106个/ml,接种温度低于主酵23C。,3、主酵温度:低温发酵:11C,一罐法20天,酒醇厚 中温发酵:1112C,淡爽啤酒,1618d。主酵:即降糖速度快,12P-3.43.6P,4、VDK还原:低于主酵23C;与主酵同;高于主酵24C,还原时间短,24天。5、冷却、降温VDK还原终点应根据成品酒的要求定,优质酒VDK控制较低例:0.05ppm,再降温排酵母 12C-5C,1.52天;5-0-1C,1天.,6、罐压控制:主酵无压或微压:0.010.02MPa 封罐后一般控制0.070.1MPa.,7、酵母排放收集:大罐排至收集罐,需3只,前2只容积为发酵罐的5%,另一只占8%,收废酵母。8、贮酒:一罐法酿制淡爽啤酒,周期短口味新鲜,一般36C排酵母,0-1C贮710天;,5 高浓酿造法高浓酿造法是指采用较高的浓度进行糖化或发酵,以后加水稀释成所要求成品浓度的啤酒生产方法。麦汁稀释稀释方法:前稀释后酵时稀释、后稀释。稀释水:O2:0.30.5ppm;CO24g/kg;pH4.14.6;24C.,高浓酿造法,优点:糖化或发酵及贮酒设备利用率提高,省投资;热能、冷能用量显著下降,运转费用低;啤酒非生物稳定性提高;香味稳定性提高,淡爽风格更突出。缺点:原料、酒花利用率下降,不宜做醇厚性啤酒,第六章 成品啤酒 1 啤酒的过滤与分离 棉饼过滤法、硅藻土、离心、板式、微空薄膜一、硅藻土过滤法 硅藻土:较纯净SiO2,密度100250kg/m3,表面积12万m2/kg,能除0.11.0m粒子,性能稳定。1、板框式硅藻土过滤机:2、叶片式:立式叶片、水平叶片,成品啤酒,3、柱式:过滤元件似蜡烛,每柱中心为一根Y形棒,上装环行盘,酒液从环行盘间透过,沿中心孔间的狭缝和凹形槽流至清酒室。,二、板式过滤机精滤机 滤板用木材纤维、棉纤维加石棉或硅藻土压制而成。压滤机由滤板及槽沟板交替排列而成,无滤框。,三、微孔薄膜过滤机纯生啤酒利用醋酸纤维、尼龙、聚四氟乙烯等材料制成微孔薄膜130150nm,孔径0.0514.0nm,开孔率80%,该膜应耐浓酸、耐浓碱、耐125200C高温。啤酒用孔径1.2nm膜,能力2022X103L/h,寿命56X105L,若配备无菌罐装可生产纯生无菌啤酒。,四、离心分离:倾析式回收麦汁、盘式除渣冷凝物、密封除渣式啤酒、冷却麦汁,2 包装和灭菌 啤酒生产的最后一道工序,对啤酒外观质量和内在质量均有密切关系,工艺要求为:严格无菌,符合卫生标准;尽量减少CO2损失;避免与空气接触。主要设备:洗瓶机、酒机(压盖机)、杀菌机、贴标机、装箱机。,丙酮酸与TPP结合形成活性丙酮酸脱羧形成活性乙醛,还原生成乙醇,而活性丙酮酸再与丙酮酸缩合则形成a-乙酰乳酸,脱羧形成丁二酮即双乙酰。,丙酮酸,表3淡色啤酒理化要求GB4927-2008项目 优级 一级 酒精度 酸度a/%vol大于等于14.1P 5.212.1P14.0P 4.511.1P12.0P 4.110.1P11.0P 3.78.1P10.0P 3.3小于等于8.0P 2.5原麦汁浓度b/P X总酸/(mL/100mL)大于等于14.1P 3.010.1P14.0P 2.6小于等于10.0P 2.2二氧化碳c/%(质量分数)0.350.65双乙酰/(mg/L)0.10 0.15,X-0.3,蔗糖转化酶活性 呈阳性(纯生啤酒、鲜啤酒)A酒精度:不包括低醇啤酒、无醇啤酒。B麦芽汁浓度:“X”为标签上标注的原麦汁浓度,10.0P允许的负偏差为“-0.3”;10.0P允许的负偏差为“-0.2”。C桶装(鲜、生、熟)啤酒二氧化碳不得小于0.25%(质量分数)。,