疫学实验胶体金免疫层析技术.ppt

胶体金免疫层析技术（colloidal gold immunochromatography assay,GICA）,20世纪80-90年代在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展了新型体外诊断技术胶体金免疫层析技术（colloidal gold immunochromatography assay,GICA）。,胶体金免疫层析技术,GICA是一种新型检测方法，具有简单快速、结果清晰，可通过肉眼判定结果、无需复杂操作技巧和特殊设备、灵敏度高、无污染、携带方便等优点。己成为临床快速诊断领域发展的一个新方向，在发达国家己得到广泛应用。,疾病的快速诊断及药物残留分析,胶体金（colloidal gold）也称金溶胶（goldsol），是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。,胶体金,zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥，以维持胶体金的稳定状态。,基础金核双离子 内层负离子（AuC12）zeta电位 外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中,胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附功能，而不被坏其生物活性，可以与蛋白质等（葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白）等非共价结合，形成胶体金标记物。,衬板,样品垫,金标垫,吸收垫,膜,胶体金免疫层析试纸条的构成,胶体金免疫层析试纸条类型：,夹心法反应原理,C 阴性,B 阳性,GICA有三种反应模式：夹心法，间接法，竞争抑制法。,间接法反应原理,C 阴性,B 阳性,阴性,弱阳性,阳性,竞争抑制法反应原理,检测线颜色强度与SD浓度负相关,目的：掌握间接试纸卡的检测原理，操作方法及结果判定方法,1、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡2、禽流感抗体检测试纸卡3、磺胺嘧啶残留检测试纸卡4、禽流感H9亚型病毒阳性对照5、禽流感H9亚型病毒阴性对照6、禽流感抗体阳性对照7、磺胺嘧啶残留阳性对照8、磺胺嘧啶残留阴性对照,实验材料：,1、加被检样品：100 ul/孔，阳性、阴性对照。2、5min后观察结果。,实验步骤：,结果判定：,1、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡：两条红线，阳 性；一条红线，阴性；无红线，试纸失效。2、禽流感抗体检测试纸卡：两条红线，阳性；一 条红线，阴性；无红线，试纸失效。3、磺胺嘧啶残留检测试纸卡：两条红线，阴性；一条红线，阳性；无红线，试纸失效。,