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第十二章 种质保存与人工种子宜职院08.9,目的与要求 了解植物种质离体保存的类型与特点，及其基本操作技术。了解植物人工种子的概念与发展概况、特点与制备方法。具备利用植物组织培养技术进行种质资源保存的认知，具有人工种子制备基础能力。,第一节 种质资源保存一、植物种质资源低温保存意义 防止资源灭绝、节约人力物力、便于交流二、超低温保存的概念 低温从4往下推 80以下的低温称为超低温 干冰温度（70）称为极低温,超低温保存方法分类:冷冻诱导保护性脱水的超低温保存 玻璃化处理的超低温保存。细胞超低温保存重要操作步骤：一、细胞预冻 二、细胞在196下长期贮存 三、细胞解冻。,三、超低温保存的方法 超低温保存植物种质资源的程序包括培养材料的准备、预处理、冰冻及保存、化冻处理、细胞活力和变异的评价、植株再生等几个步聚。（一）传统的降温冰冻方法1快速冰冻法2慢速冰冻法3两步法4逐级冰冻法,（二）玻璃化保存方法 玻璃化是指液体转变为非晶体（玻璃态）的固化过程。1玻璃化法 将生物材料经极高浓度的玻璃化溶液快速脱水后，直接投入液氮，使生物材料连同玻璃化溶液发生玻璃化转变，进入玻璃态。2包埋玻璃化法 包埋玻璃化法是包埋脱水法和玻璃化法的结合。,四、其它超低温冻存方法 1干燥法 2预培养法 3预培养-干燥法 4包埋脱水法,五、化冻方法 液泡小、含水量少的细胞，可快速化冻。液泡大、含水量高的细胞则采用慢速化冻法。生长季节中的材料，3740温水浴中快速化冻。木本植物的冬芽，必须在0低温下进行慢速化冻。玻璃化冻存的材料要求快速化冻，,第二节 人工种子 人工种子又称合成种子或体细胞种子。任何一种繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均可称之为人工种子。,一、人工种子分类：1、裸露的或休眠的繁殖体。如可以适当干燥的体细胞胚、休眠的微鳞茎和微块茎等。2、人工种皮包被的繁殖体。一些体细胞胚、原球茎等，不能过度干燥，但只需人工种皮包被即可维持发芽状态。3、水凝胶包埋再包被人工种皮的繁殖体。大多数体细胞胚、不定芽、茎尖等，先包埋在半液态凝胶中，再经人工种皮包裹，避免失水，维持发芽能力。,包有人工种皮的种子,二、人工种子优点1、高效快速的无性繁殖方法，既能保持原有品种的种性，又具有实生苗的复壮效应。2、可快速获得大量优异杂种种子。3、三倍体、非整倍体等特殊植物材料，可通过人工种子短期内加大繁殖应用。4、可不受季节限制工厂化生产，还避免种子携带病原菌的危险；5、可以避免移栽困难，且可以实现机械化操作，同时还便于储藏和运输。,三、人工种子生产方法（一）繁殖体的生产 1体细胞胚生产 2微型营养变态器官培养 3芽培养,（二）人工种子包被 1、繁殖体的预处理 体细胞胚适度脱水干燥和强制休眠；微型变态器官繁殖体表面消毒处理；芽为繁殖体的老化处理。2、繁殖体的包埋 海藻酸钠溶液中加入繁殖体混匀逐滴滴入2.0%2.5%CaCl2溶液中2030 min的离子交换作用形成含繁殖体并有一定刚性的小球珠水漂洗20 min。得到人工种子（胶囊状）,（三）人工种皮的研制理想的人工种皮：1、具有一定的封闭性以保证人工胚乳的各种成分不易流失；2、有良好透气性，保证繁殖体维持生理活性的需要；3、有一定的坚硬度，加强人工种子的耐储运性和适于机械化操作；4、无毒无害，能保证繁殖体顺利穿透发芽。,四、人工种子应用前景：首先，人工种子可以贮藏，因而可以周年生产，避免了试管苗应用中由于季节性生产而带来的诸多矛盾。其次，人工种子可以直接播种，减少了试管苗移栽在操作和管理上的困难，可以实现机械化操作和常规的田间管理。其三，由于可以长距离运输，因此，人工种子可以建立相对集中的大型生产企业，实现资源和技术优化。,思考1、低温保存与超低温保存有何异同？2、根据低温保存原理，设计一种植物保存方案3、简述人工种子的生产方法,