血浆治疗若干问题的探讨.ppt

血浆治疗若干问题的探讨,上海市血液中心 钱开诚,2023/6/24,钱开诚,2,输血医学,输血是医学发展史上的重要里程碑输血是最早获得成功的组织移植输血是现代医学的重要支持手段输血是未来医学的重要载体,2023/6/24,钱开诚,3,临床输血相关法规,中华人民共和国献血法（1998）第十三条：医疗机构对临床用血必须进行核查。；第十六条：医疗机构临床用血应当制定用血计划，遵循合理科学原则。国家鼓励临床用血新技术的研究和推广医疗机构临床用血管理办法（1999）第五条：医疗机构应当设立临床输血管理委员会，负责临床用血的规范管理和技术指导。；第六条：二级以上医院设立输血科（血库），负责计划、储血、制度执行情况检查、参与临床诊断、治疗与科研临床输血技术规范（2000）总则；输血申请；受血者血样采集与送检；交叉配血；血液入库、核对、储存；发血；输血；附件19,2023/6/24,钱开诚,4,合理科学输血,现代输血理念各类血液成分的适应症、指征和输注量相关病例的输血治疗输血不良反应的预防、诊断、处理,2023/6/24,钱开诚,5,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念血浆生理概要及其临床治疗适应症血浆置换疗法被动免疫血浆治疗血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2023/6/24,钱开诚,6,现代输血理念,成分输血科学、合理用血,2023/6/24,钱开诚,7,成份输血定义,将全血分离，制备成各种高浓度、高纯度的血液成份制品。根据病情需要有针对性地输注不同的血液成份，称为成份输血。,2023/6/24,钱开诚,8,成份输血的优越性,高效安全易于保存节约血液资源,2023/6/24,钱开诚,9,临床合理用血原则,“不可替代时选择”原则满足生理需要原则风险规避原则,2023/6/24,钱开诚,10,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念血浆生理概要及其临床治疗适应症血浆置换疗法被动免疫血浆治疗血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,血浆生理概要,2023/6/24,钱开诚,12,血液,血 浆,血细胞,红细胞白细胞血小板:,水：9092,血浆蛋白,溶质：810,小分子物质,营养物质激素代谢产物,有机物,无机盐（电解质）,白蛋白球蛋白纤维蛋白原,2023/6/24,钱开诚,13,血浆的构成,体重的 4%（40 45 ml/kg 体重）组成水 90%溶质 10%蛋白质 7%无机盐 0.9%其它有机物,2023/6/24,钱开诚,14,血浆蛋白的主要功能：1.形成血浆的胶体渗透压 2.运输功能 3.参与凝血和抗凝血功能 4.防御功能 5.营养、缓冲功能,2023/6/24,钱开诚,15,血浆蛋白 白蛋白,白蛋白 MW 67000血浆中含量最多的蛋白 4048g/L血浆总白蛋白约 120 g占人体总白蛋白的 40%功能维持血浆胶体渗透压运输 脂肪酸 胆红质等肝脏合成 正常成人肝脏每日约合成12g白蛋白，相当300ml血浆所含的白蛋白半寿期 约 20 天,2023/6/24,钱开诚,16,免疫球蛋白和补体,免疫球蛋白免疫球蛋白是一组主要由脾、淋巴结和其他淋巴组织内的桨细胞所产生具有抗体活性的蛋白质 组成 IgG、IgM、IgA、IgE、IgD生物学效应：与抗原特异性结合；激活补体；与细胞表面Fc受体结合；参与免疫调节补体存在于血液和组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质组成由30余种可溶性蛋白、膜结合性蛋白和补体受体组成的多分子系统(complement system)。根据补体系统各成分的生物学功能，可将其分为补体固有成分、补体调控成分和补体受体（CR）生物学效应有：增强吞噬细胞的趋化性；增加血管的通透性；参与细胞溶解；参与免疫调节等,2023/6/24,钱开诚,17,凝血、抗凝血和纤维蛋白溶解系统,血液凝固：血液由流动的液体状态变成不流动的凝胶状血块的过程抗凝血：阻碍血液凝固的机制纤维蛋白溶解：纤维蛋白或纤维蛋白原被水解的过程,2023/6/24,钱开诚,18,凝血因子血液及其它组织中直接参与凝血的物质称为凝血因子。根据发现的先后顺序，以罗马数字编号,2023/6/24,钱开诚,19,血液凝固的机理,2023/6/24,钱开诚,20,凝血过程(瀑布学说)凝血过程大体上分为三个基本步骤：凝血酶原激活物形成 凝血酶原 凝血酶 纤维蛋白原 纤维蛋白,2023/6/24,钱开诚,21,抗凝血机制 体液抗凝系统中的主要抗凝物质：抗凝血酶(AT)肝素 蛋白质 C(PC)体外的主要抗凝物质：降低血钙浓度而妨碍血液凝固，如：草酸盐 柠檬酸盐,2023/6/24,钱开诚,22,纤维蛋白溶解机制概念:纤维蛋白或纤维蛋白原被纤维蛋白溶解酶（简称纤溶酶）水解的过程，简称纤溶。意义:使血液经常保持液态,血流通畅,防血栓形成。纤溶的基本过程包括：纤溶酶原的激活 纤维蛋白的降解，,2023/6/24,钱开诚,23,血浆无机物,阳离子Na+主要 140 mMK+4 mMCa+1 mMMg+2 mM阴离子Cl 主要 103 mMHCO3-28 mM,2023/6/24,钱开诚,24,血浆碳水化合物,种类葡萄糖 70 105 mg%其它单糖果糖半乳糖甘露糖多糖 量少糖蛋白,2023/6/24,钱开诚,25,血浆脂质,含量 5 mg/ml主要形式 脂蛋白,2023/6/24,钱开诚,26,血浆制品,常规血浆制品新鲜冰冻血浆(FFP)冰冻血浆(FP)冷沉淀,2023/6/24,钱开诚,27,常规血浆输注适应症,获得性多凝血因子缺乏先天性凝血因子缺乏？血浆置换被动免疫治疗注：1、血浆不是维持血液胶渗透压、扩充血容量的最佳途径 2、纠正低蛋白血症的首选制剂是白蛋白,2023/6/24,钱开诚,28,血浆不宜单纯用于扩充血容量,扩容效果不理想血浆增量效力仅76%，血液动力学改善效果 并不理想(Ahnefeld 1965)具有输血相关风险输血相关传染性风险：HCV,HBV,HIV免疫抑制 输血相关急性肺损伤,2023/6/24,钱开诚,29,临床常用的胶体溶液,羟乙基淀粉 白蛋白 明胶制剂 右旋糖酐,2023/6/24,钱开诚,30,不同液体容量效力的比较,2023/6/24,钱开诚,31,若干临床输血特例讨论,急性大量出血择期手术恶性肿瘤播散性血管内凝血.,2023/6/24,钱开诚,32,大量失血的输血抢救（大量输血）,概念24小时内输入血液全身血量 1 小时内输入血液1/2全身血量适应症大血管创伤性断裂外科手术及手术意外产科意外,2023/6/24,钱开诚,33,大量失血的治疗的程序,首要目标：维持循环容量第二目标：保持血氧携带能力第三目标：恢复凝血和内环境稳定 美国麻醉学会（ASA）1997,2023/6/24,钱开诚,34,大量输血,紧急大量输血的配血5分钟？15分钟？3045分钟？WHO临床用血：紧急情况下输注“O、Rh-”临床输血规范：Rh（D）阴性和其他稀有血型患者，应采用自身输血、同型输血或配合型输血 UMSTC:5649例创伤,8%输RBC,其中11%(50例)未经交叉配型直接输入“O”型RBC(Hess JR et al,Transfusion,2006,46(5),2023/6/24,钱开诚,35,大 量 输 血,大量输血的血液选择全血？组织间液缺失柠檬酸中毒大量、多人份异体血浆溶血可能、急性肺损伤PT-GVHD红细胞悬液必要时输注血小板、FFP、冷沉淀,2023/6/24,钱开诚,36,维持凝血所需的凝血因子水平,2023/6/24,钱开诚,37,急性失血对血小板的影响（可耐受230%失血）,血小板计数15010050,失血量/血容量50%100 150 200 230%,2023/6/24,钱开诚,38,各凝血因子可耐受的失血量,血小板 230%血容量纤维蛋白元 140%凝血酶原 201%V 因子 229%VIII因子 236%,2023/6/24,钱开诚,39,失血后容量替代治疗步骤,Target controlled replacement,Volume loss(%),Colloids+crystalloids,100,+红细胞,+新鲜冰冻血浆,+血小板,0,晶+胶,2023/6/24,钱开诚,40,血浆输注剂量,补充凝血因子1520ml/Kg.BW,2023/6/24,钱开诚,41,冷沉淀输注,冷沉淀的定义冷沉淀的组份及含量冷沉淀输注适应症冷沉淀输注剂量,2023/6/24,钱开诚,42,冷沉淀的定义,把从400ml全血中获得的FFP置于04条件下融化，收集得到的冷不融部分称为冷沉淀。,2023/6/24,钱开诚,43,冷沉淀主要组份及含量,因子VIII促凝活性(F VIII：C)80IU瑞斯托霉素因子(VWF)60IU纤维蛋白原(F1)200300mg纤维蛋白稳定因子(FXIII)80IU纤维结合蛋白(Fn)60mg,2023/6/24,钱开诚,44,冷沉淀输注的适应症,先天性凝血因子缺乏甲型血友病血管性假血友病(VW病)获得性凝血因子缺乏DIC严重肝病尿毒症等.?纤维结合蛋白水平降低恶性肿瘤重症感染DIC严重创伤、烧伤大手术等,2023/6/24,钱开诚,45,冷沉淀输注剂量,血友病及其它凝血因子缺乏患者FVIII 20IU/Kg.BW（0.25袋/Kg.BW)纤维蛋白原 4080mg/Kg.BW（0.20.4袋/Kg.BW)Fn水平低下患者大剂量法：15mg/Kg.BW（0.25袋/Kg.BW)维持法：6-7mg/Kg.BW,2023/6/24,钱开诚,46,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念血浆生理概要及其临床治疗适应症血浆置换疗法被动免疫血浆治疗血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2023/6/24,钱开诚,47,血浆置换术,适应症自身免疫性疾病(重症肌无力、肺肾综合征、SLE、急进性肾炎等)药物、毒物、毒素中毒(洋地黄、有机磷等、内毒素)急性肝、肾功能衰竭,2023/6/24,钱开诚,48,血浆置换术,机理:移除血浆中的致病因子(抗体、毒素、滞留代谢产物等)导入缺乏的血浆成分 凝血因子 体液免疫因子等,2023/6/24,钱开诚,49,血浆置换术,方法：人工单采术机械单采术,2023/6/24,钱开诚,50,血浆置换术,血浆置换量：置换全身血浆清除率60%置换全身血浆2倍清除率85%全身血浆(ml)=体重(kg)70(1-Hct)常规：13L/次、间隔12日一次35次为一疗程,2023/6/24,钱开诚,51,血浆置换术,置换液：新鲜冰冻血浆晶体溶液白蛋白溶液血浆蛋白混合液,2023/6/24,钱开诚,52,血浆置换术,不良反应及其对策：柠檬酸盐反应 适当补充钙离子凝血障碍FFP、凝血因子病毒感染病毒灭活血浆栓塞脉管炎等严谨操作,2023/6/24,钱开诚,53,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念血浆生理概要及其临床治疗适应症血浆置换疗法被动免疫血浆治疗血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2023/6/24,钱开诚,54,被动免疫血清（浆）治疗,1890年，德国病理学家Won Behring发现感染病菌的人恢复后血清中会产生一种抗菌成份，给病人注射恢复期病人的血清可以治疗同一种感染性疾病，由此开创了用“康复期血清（浆）”实施被动免疫治疗的先河。,2023/6/24,钱开诚,55,被动免疫治疗,是指给机体输入含有特异性抗体的免疫 血清、血浆或免疫球蛋白，使机体被动获得特异性免疫力，达到紧急预防或治疗某些感染性疾病的目的治疗方式,2023/6/24,钱开诚,56,主动免疫与人工被动免疫,2023/6/24,钱开诚,57,SARS康复期血浆治疗,姜素椿，传染病专家。曾任中国人民解放军302医院传染科主任、副院长、专家组成员。在中枢神经系统、消化系统、呼吸系统及出血热等传染病的诊治方面具有很高的造诣及丰富的经验。2003年，姜素椿在抢救一位SARS患者时不幸感染SARS，他在自己身上大胆试验，注射了SARS康复者的血清，使病情发生奇迹般的变化，再配合其他药物治疗后，仅23天就康复出院，开创了全国首例用血清来治愈SARS的临床实验，为科学治疗SARS留下了宝贵的临床医学资料和经验。在抗击SARS斗争中，姜素椿被中国人民解放军四总部评为“全军非典型肺炎防治先进个人”，被中组部评为“全国防治非典工作优秀共产党员”,被中国科协授予“防治非典先进科技工作者”称号。商务印书馆大家专栏,2023/6/24,钱开诚,58,香港SARS康复期血浆治疗,曾在工作中感染“非典”并已痊愈的中大内科及药物治疗学系副教授郑彦铭，至今已捐出毫升血清救助患者。月初，郑彦铭在威尔斯医院工作时受到感染，他自愿成为中大血清治疗法的试验者。月底，郑彦铭康复出院后很快返回工作岗位，积极参与研究血清疗法。新华网,2023/6/24,钱开诚,59,香港中文大学SARS康复期血浆治疗,康复期血浆组 类固醇激素组患者数 20 20痊愈 20 17死亡 0 3死亡率 0%15%人民网 陈少波,2023/6/24,60,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,患者概况：男性，31岁，既往史无特殊；于2006年6月7日因高热4天（体温39.9），伴寒战，咳嗽，咳痰收治入院。胸部X线摄片示左肺下部有大片模糊影。经RT-PCR检测和气管抽吸物病毒分析确定为A型（H5N1）禽流感病毒。入院第5天予奥司他韦150 mg bid治疗2天，患者右肺实变影增重而左肺仅有轻度好转。第一次病毒定量测定为患者开始奥司他韦治疗后26小时，H5N1病毒呈高水平复制（1.31105拷贝/ml）状态，次日，在奥司他韦治疗中，病毒复制水平仍呈上升趋势（1.68105拷贝/ml）。钟南山等N Engl J Med 2007,357:1450,2023/6/24,61,康复期血浆治愈H5N1型禽流感一例,入院第八天行H5N1型禽流感康复期血浆治疗：捐献者为2006年2月罹患H5N1型禽流感经治疗后康复的患者。共捐献600 ml康复期血浆，血浆H5N1 病毒中和抗体滴度1:80。600ml康复期血浆分3次输注，200mi/次；第一次输注与第二次输注间隔8hr，第二次输注与第三次输注间隔24hr；第一次输入康复期血浆后8hr，患者的病毒复制水平从1.68105拷贝/ml降至1.42104拷贝/ml，第一次输注康复期血浆后32hr（距第二次输注24hr）、病毒检测阴性。患者最终得以康复。H5N1 病毒中和抗体测定：输注康复期血浆前H5N1 病毒中和抗体阴性，输注血浆后抗体水平逐步增高，至第一次康复期血浆输注5天后，抗体滴度维持在1:401:80之间。钟南山等N Engl J Med 2007,357:1450,2023/6/24,钱开诚,62,康复期血浆治疗甲型H1N1流感的预期,甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）颁布对于重症和危重病例，也可以考虑使用甲型H1N1流感近期康复者恢复期血浆或疫苗接种者免疫血浆进行治疗。对发病1周内的重症和危重病例，在保证医疗安全的前提下，宜早期使用。推荐用法：一般成人100-200ml，儿童50ml（或者根据血浆特异性抗体滴度调整用量），静脉输入。必要时可重复使用。使用过程中，注意过敏反应。,2023/6/24,钱开诚,63,合理科学输血-血浆输注,现代输血理念血浆生理概要及其临床治疗适应症血浆置换疗法被动免疫血浆治疗血浆输注不良反应的预防、诊断、处理,2023/6/24,钱开诚,64,近代输血医学的关注焦点,不断提高输血的疗效成分输血科学合理用血血液成分的体外诱导、修饰不断降低输血风险技术层面发展经血传播病原体及免疫血液学检测技术发展血液病原体灭活、白细胞滤除、-射线照射等血液处理技术管理层面实施无偿献血，根除利益驱动性供血实施体系化质量管理，最大限度杜绝失误事件的发生,2023/6/24,钱开诚,65,输血风险,2023/6/24,钱开诚,66,输血相关病毒感染风险,病毒标记物检测技术的局限性 窗口期 WP 试剂敏感性检测病毒种类的局限性 检测：HBV HCV HIV 未检测：HTLV CMV EBV B19 新病毒不断被发现 SARS?WNV,仅2003 年，美国CDC 报告WNV感染97862例,导致264人死亡;其中61例可能与输血有关,21例被确认为输血感染，(其中6人死亡)。,2023/6/24,钱开诚,67,受血者感染百分比%,2023/6/24,钱开诚,68,病毒性输血传染病发生机率,美国 HIV 1：676,000 HCV 1:103000 HTLV 1:641,000 HBV 1:63,000 输血相关病毒感染机率 1:34,000(其中1/1000死亡)Schreiber,GB,et al,NEJM,334:1685,1998,2023/6/24,69,美国生活风险(年死亡机率),主动生活风险吸烟 1:200驾驶汽车 1:10,000摩托车比赛 1:50赛马 1:740怀孕 1:4,350,被动生活风险交通意外 1:20,000地震 1:588,000流行感冒 1:5000PTCA 1:200 术后感染 1:1,200 输血感染 1:34,000,2023/6/24,钱开诚,70,输血传播病毒性疾病,全球目前受感染人数:约 5.8 亿HBV 3.71 亿1.2亿(32%)HCV 1.77 亿3800万(21%)HIV 3300 万100万(3%)因不安全输血引起:HBV 8001600 万HCV 230470万HIV 150300万,健康报,CDC 2003WHO/GDBS 1998-99Safe blood starts with me WHO/BCT/01.03,2023/6/24,钱开诚,71,Four Protecting Walls,donor criteria,testing,Inactivation removal,Modified from:N Dhingra,17-18 June 2003,Rational Use,2023/6/24,钱开诚,72,病毒性输血风险的控制对策,现行对策：推行无偿献血 严格筛查血液 提倡科学用血 消除残留风险的根本对策：血液制品病毒灭活 开发血液代用品,严格筛查血液-NAT 检测的优势,直接检测病毒的核酸缩短病毒检测的“窗口期”敏感性高,2023/6/24,钱开诚,74,HIV markers during early infection,HIV RNA(plasma),HIV Antibody,11,HIV p24 Ag,16,22,5 Days6 Days,Theoretical Infectivity Day 0HIV RNADay 11HIV p24 AgDay 16HIV AntibodyDay 22,COURTESY:Dr.G Schreiber,ISBT 2002,2023/6/24,钱开诚,75,HBV markers during early infection,InfectionDay 0HBV DNADay 32 HBsAgDay 59;disappears Day 120,HBV DNA(PCR),Anti-HBc,Infection,120,HBsAg,ALT,59,COURTESY:Dr.G Schreiber,ISBT 2002,2023/6/24,钱开诚,76,HCV markers during early infection,HCV RNA,Anti-HCV,12,0,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100,InfectionDay 0 HCV RNADay 12 HCV AntibodyDay 70,COURTESY:Dr.G Schreiber,ISBT 2002,NAT 缩短病毒检测窗口期,HIV:22 to 11 daysHBV:59 to 32 daysHCV:70 to 12 days,2023/6/24,Residual risk,all donors(US),Dodd RY,Notari EP 4th,Stramer SL.Transfusion.2002 Aug;42(8):975,2023/6/24,钱开诚,79,如何杜绝已检测病毒的残留感染风险？如何杜绝CMV EBV B19 WNV等未检测病毒经 输血传播的风险？如何防范未知病毒经输血传播的风险？血液成分病毒灭活,2023/6/24,钱开诚,80,病毒性输血风险的控制对策,现行对策：推行无偿献血 严格筛选血液 提倡科学用血 消除残留风险的根本对策：血液制品病毒灭活 开发血液代用品,2023/6/24,钱开诚,81,血液成分病毒灭活方法,血浆病毒灭活湿热法（巴士德法）有机溶剂/洗涤剂(Solvents/Detergents）亚甲兰光化学法（MB-P）S-59光化学法核黄素光化学法红细胞病毒灭活血卟啉、酞菁化合物、部化菁 酚噻嗪类化合物（MB、DMMB）+可见光照射FRALE S303+PH调节PEN110血小板病毒灭活硫堇+可见光照射（Thionine-I）8-甲氧补骨脂+UVA（8-MOP-UVA）S-59+UVA核黄素,2023/6/24,钱开诚,82,血液病毒灭活方法评价原则,能有效灭活病毒 指示病毒：HIV、DHBV、Sindbis、VSV、脊髓灰质炎病毒 方法：细胞病变法、动物感染、PCR对血液成分活性及功能无明显不良影响 血浆：凝血因子、血浆蛋白回收率、蛋白质免疫原性.红细胞：溶血、K+逸出、ATP、2,3-DPG、形态积分、体内回收率 血小板：HSR、形态积分、聚集率、CCI.对人体安全 急性毒性、慢性毒性、基因毒性 适用于单袋血液成分处理,2023/6/24,钱开诚,83,近年关注的血液病毒灭活方法,亚甲兰光化学法（MB-P）S-59光化学法核黄素光化学法FRALE S303+PH调节PEN110,2023/6/24,钱开诚,84,亚甲兰光化学病毒灭活,机理 破坏病毒核酸 破坏病毒包膜,2023/6/24,钱开诚,85,MB-P病毒灭活机理,LIGHT,MB,2023/6/24,钱开诚,86,亚甲兰的安全性,亚甲兰是国家药典收录的静脉输注药物1000ml血浆含380mg亚甲兰，仅是临床常用成人输注量的1/600 适应症 MB常用剂量 给药途径高铁血红蛋白症 50250mg/50kg 静脉 甲状腺染色 50250mg/50kg 静脉 血浆病毒灭活 0.38mg/1000ml 静脉,2023/6/24,钱开诚,87,MB-P血浆病毒灭活的效果,2023/6/24,钱开诚,88,MB-P对HCV-RNA NS-5的作用,2023/6/24,钱开诚,89,标本病毒灭活前后血浆HCV-RNA浓度,病毒灭活动力学曲线,2023/6/24,钱开诚,90,2.RNA病毒-HCV的FQ-PCR,PCR Amp/Cycle Chart,2023/6/24,钱开诚,91,MB-P对DHBV-DNA病毒的灭活效果,方法:受试样品接种雏鸭，观察感染情况 对照样品:含不同滴度DHBV的人血浆 实验样品:经亚甲蓝光化学处理的含不同滴度DHBV的人血浆 结果:未经MB-P处理的含不同滴度DHBV的人血浆均感染雏鸭 经MB-P处理，可使血浆中DHBV的TcID50下降106-107.,2023/6/24,钱开诚,92,MB-P对CMV的灭活效果,未灭活CMV感染人胚肺细胞 灭活CMV未感染人胚肺细胞,2023/6/24,钱开诚,93,MB-P对血浆凝血因子的影响,2023/6/24,钱开诚,94,MB-P处理对血浆蛋白免疫原性的影响,2023/6/24,钱开诚,95,MB-P 血浆临床输注（1000,000单位）,无不良输注反应治疗效果良好,2023/6/24,钱开诚,96,MB-P血浆病毒灭活技术提要,亚甲蓝添加精度 10.1mol/L光照剂量范围30,00038,000lxMB滤除材料疏水性材质和碳纤维吸附材质（保证血浆有效成分回收率）MB滤除率 85%灭菌方法 高压蒸汽灭菌（无毒）病毒灭活有效性验证,2023/6/24,钱开诚,97,DNA or RNAof pathogen,Amotosalen(S-59),Docking,Permanent Crosslinking,UVA Illumination,S-59光化学病原体灭活机理,2023/6/24,钱开诚,98,S-59光化学病原体灭活技术,特点适用于血小板和血浆病毒灭活、不适用于红细胞病毒灭活尚能同时灭活多种细菌及T淋巴细胞,2023/6/24,钱开诚,99,S-59光化学病原体灭活技术的进展,建立了S-59+UVA血小板和血浆病毒灭活方法实验室及动物模型验证了病毒灭活的有效性证实对血小板和血浆的体外质量指标及动物体内回收率无明显不良影响期临床试验结果表明经S-59光化学处理的血小板和血浆具有良好的疗效和安全性,2023/6/24,钱开诚,100,核黄素光化学病毒灭活,机理多环平面结构的芳香族化合物,易穿透细胞膜和病毒包膜，插入病毒的核酸在接受了UVA或可见光提供的能量后,发生电子转移,使鸟嘌呤碱基氧化并形成共价加成化合物，阻止核酸的转录、复制进一步的反应可使核酸骨架链断裂,使病毒、细菌、T淋巴细胞等病原体失活,2023/6/24,钱开诚,101,核黄素光化学病毒灭活机理示意图,2023/6/24,钱开诚,102,核黄素光化学病毒灭活,特点能灭活脂质包膜病毒和非脂质包膜病毒及多种细菌无残留生物毒性期望适用于血小板、血浆及红细胞病毒灭活,2023/6/24,钱开诚,103,核黄素光化学病毒灭活进展概要,实验提示该方法病毒灭活效果良好，对血小板和红细胞的功能、活力、形态及血浆有效组分无明显不良影响能有效灭活T淋巴细胞，预期可用于预防PT-GVHDDVHD核黄素光化学血浆及血小板病原体灭活已获准在欧洲使用（2008、10 CE Mark）核黄素光化学红细胞原体灭活的研究尚处于实验室阶段,2023/6/24,钱开诚,104,血液病原体灭活研究的发展取向,病毒灭活 病原体灭活 以病毒灭活为焦点、兼顾细菌、寄生虫、T细胞等病原体的 灭活血液成分病原体灭活 全血病原体灭活 能有效灭活病原体；对红细胞、血小板、血浆均无 明显损伤有望最终克服输血感染性疾病病,2023/6/24,钱开诚,105,2023/6/24,钱开诚,106,2023/6/24,钱开诚,107,展望,血浆病原体灭活建立了成熟的方法，经亚甲蓝光化学病毒灭活处理的血浆已临床应用逾十年，效果良好 血细胞病原体灭活两项血小板病原体灭活技术已在欧洲获准进入临床,红细胞病原体灭活的研究尚有待突破，全血病原体灭活已开始初期研究有望最终克服输血感染性疾病病,2023/6/24,钱开诚,108,SHOT输血不良反应报告,2023/6/24,109,输 血 相 关 急 性 肺 损 伤,症状及体征 输血后14小时内出现急进性呼吸衰竭伴发热 呼吸浅快、短促、呼吸功增加及紫绀等；呼吸音低钝；胸片示肺部弥散性阴影，心脏不扩大，血管无出血发病机理 输入血浆中含有抗白细胞抗体 受血者体内抗异体白细胞抗体 肺血管缺血后再灌注 激活的白细胞黏附于肺毛细血管内皮、释放炎性介质 吸引粒细胞 肺循环粒细胞不断聚集 释放ROS、蛋白水解酶、血管活性物质等 血管收缩、末梢血管堵塞、血管壁通透性增加 肺水肿、肺组织损伤,2023/6/24,110,TRALI-胸片,2023/6/24,111,输 血 相 关 急 性 肺 损 伤,临床表现 病例数%须吸氧支持 36 100气管切开-呼吸机 26 72肺水肿 快速消退(7days)6 17死亡 2 6 Popovsly&Moor,Transfusion:25,573(1985),2023/6/24,钱开诚,112,输 血 相 关 肺 损 伤,发病几率ND死亡率 5%25%。美国：死亡率20.1%，输血相关死亡原因中列第三位，占输血相关总死亡报告病例总数的9%（FDA）英国：死亡率25%(SHOT)，占严重输血不良反应报告总数 的第四位(6.7%)和死因的第二位，,2023/6/24,钱开诚,113,FDA:严重输血反应的平均死亡率(2000 2004),TRALI20.1%ABO/Hemolytic Transfusion Reactions13.9%Bacterial Contamination11.8%,L Holness:FDA,2004 TRALI Consensus Conference,2023/6/24,钱开诚,114,SARS死亡率,全球SARS累计发病、死亡数（WHO网站2004年4月21)发病数 死亡数 死亡率 8096 774 9.56%,2023/6/24,钱开诚,115,输血相关急性肺损伤的预防,输注不含抗白细胞抗体的血液合理把握血浆治疗适应症和指征输注滤除白细胞的血液体外循环中加设白细胞过滤装置,2023/6/24,钱开诚,116,建议,医学科学尤其是临床医学、免疫学和基因技术等学科的快速发展，势必对输血医学提出新的要求并推动其发展，输血医学的发展又有助于促进其它临床学科的发展，输血医学在这种因果关系的推动下仍将不断出现新的观念、方法和制品，建议临床医生适时更新输血知识。,2023/6/24,钱开诚,117,谢 谢！,