维生素类药物分析.ppt

第十四章 维生素类药物的分析 Chapter 14 Analysis of Vitamins,学习要求,掌握VitA的鉴别和含量测定；VitC的鉴别、检查和含量测定。熟悉VitB1的鉴别和含量测定；VitE的鉴别、检查和含量测定。了解VitD的鉴别、检查和含量测定。,概 述,一、概念 维生素1）维持人体正常生理功能所必需的一类微量 的生物活性物质。2）大多数人体内不能自行合成,必须从食物 中摄取。,VitA 缺乏夜盲症 VitB1缺乏脚气病 VitC 缺乏坏血病 VitD 缺乏,如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。,结 构 性 质,Vit A、D、E、B1、C,鉴 别 试 验,杂 质 检 查,含 量 测 定,VitA1：视黄醇，生物活性最高VitA2：去氢维生素，活性是VA1的30-40%VitA3：去水维生素，活性是VA1的0.4%,第一节 维生素A的分析 Analysis of vitamin A,故通常所说的维生素A是指维生素A1。,人工合成的VA醋酸酯结晶加精制植物油制成的油溶液，还有VA胶丸、VAD胶丸和VAD滴丸,Ch.P,药典收录情况,存在多种立体异 构化合物 具有UV吸收,1 化学结构,一结构与性质,R=H VitA 醇 VA1 retinolR=COCH3 VitA 醋酸酯 vitamin A acetate R=COC15H31 VitA 棕榈酸酯 vitamin A palmitate,（1）环己烯+共轭多烯侧链；5个双键（2）存在多种立体异构体，具有UV吸收 天然 VitA 侧链为全反式；（3）通常所说的维生素A是指维生素A1（4）天然来源为鱼肝油，主要为醋酸酯和 棕榈酸酯。目前多为人工合成产物,结构特点：,（二）性 质 Properties,不溶于水溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。,共轭多烯侧链 性质不稳定.临床用其醋酸酯或棕榈酸酯的油溶液,密封、凉暗处保存，充氮气或加入抗氧剂,鉴别 含量测定,a.溶解性 b.不稳定性 c.紫外吸收特性 d.与SbCl3作用,小结.维生素A结构性质,二、鉴别试验,Carr-Price,UV,TLC,（一）三氯化锑反应 Carr-Price,注意事项：反应需在无水、无醇条件下进行。,溶剂：无水三氯化锑的无醇氯仿溶液,VitA：5个共轭双键，无水乙醇液max=326nm,VitA2、A3：6个共轭双键，红移.,（二）紫外分光光度法 UV,例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷乙醚（8：2）薄层板：硅胶G 显色剂：SbCl3 T.S.现 象：蓝色斑点 Rf：VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA 棕榈酸酯 0.75,目的：鉴别醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯,（三）薄层色谱法 TLC,三、含量测定,紫外-可见分光光度法,比 色 法,高效液相色谱法,（一）紫外-可见分光光度法 Ch.P 2005,利用共轭多烯结构，在325328nm处有选择性吸收峰,（1）原因,为了消除杂质（相关物质）吸收所引起的误差,相关物质结构相似,维生素A最大吸收波长 附近也有吸收，对测定有影响。Morton和Stubbs等人在1946年提出了三点 校正法。,相关物质的吸收,d.鲸醇：维生素A醇的二聚体，无生物活性,（2）原理：假定、根据,a:杂质吸收在310nm340nm范围近似呈一条直线，随,Ab:物质对光的吸收具有加和性 A样品=A维生素A+A相关物质,（3）波长的选择,等波长差法：测VitA醋酸酯,1=328nm;2=316nm;3=340nm,ii等吸收比法：测VitA醇,1=325nm;2=310nm;3=334nm,*波长的选择,VA醋酸酯1=328nm 2=316nm 3=340nm,等波长差法：,等吸收比法：,VA 醇1=325nm2=310nm3=334nm,（4）测定方法 Ch.p收载有2种方法,第一法（直接测定法）,波长：300、316、328、340、360nm测定：A0、A1、A2、A3、A4找到：max=328nm（326329）在326329nm，第一法测定。不在326329nm，第二法测定。计算比值：A0/A2、A1/A2、A2/A2、A3/A2、A4/A2 比较：,算吸光度比值差,判断,1IU的VitA=0.300ug的维生素A醇=0.344ug的维生素A醋酸酯,a:效价的定义：每g供试品中含有VitA的 国际单位数。单位 IU/g,计算,b:换算因子的定义：单位 数值所相当的效价,d:求效价,e:求标示量%,小结：第一法（直接测定法）-VA醋酸酯,判断 A328,A 328校正,求效价,求,求,已知：平均胶丸重为0.0815g维生素A的标示量为10000IU/丸取样：0.1279g100ml，从中取出2ml 25ml.,练习题：维生素A醋酸酯胶丸的含量测定,求：维生素A醋酸酯的标示百分含量。,首先计算吸收度比值和吸收度比值差。由结果知，需计算校正吸收度。,由此可知，应该用测得的A328计算。,第二法(皂化法),波长：300、310、325、334nm测定：A0、A1、A2、A3找到：max=325nm（323327）在323327nm，皂化法测定。不在323327nm，色谱法纯化。计算比值：A0/A2-A300/A325,算吸光度比值,判断,吸光度比值是否 0.73,A325校正=6.815A3252.555A3104.260A334,最大吸收波长是否在323327之间,是,否,A300/A325是否 0.73,色谱法纯化,是,否,A325校正=6.815A325-2.555A310-4.260A334,小结：测定方法,第一法VA醋酸酯,第二法VA醇323327nm A300/A325 0.73,326329nm 0.02之间,超,否,A328,3%之间：A328-15%-3%：A328校正+3%:皂化法,3%之间：A325+3%:A325校正,色谱 法,A328校正=3.52（2A328 A316A340）,A325校正=6.815A325-2.555A310-4.260A334,求,判断A,小结:VitA 紫外分光光度法 Ch.P 2005,方法：三点校正法三波长测定法,2、3：在1两侧,等波长差法：,等吸收比法：,1：VitA的max,（1）原因：消除杂质吸收所引起的误差,a:杂质吸收在310nm-340nm范围近似呈 一条直线，随,Ab:物质对光的吸收具有加和性,（2）原理,（3）波长的选择,（4）测定方法,（二）三氯化锑比色法,（三）高效液相色谱法,思考题,1、三点校正紫外分光光度法测定维生素A含量的依据（原理）是什么？2、三点校正紫外分光光度法测定维生素A醋酸酯含量时，换算因子是多少？写出测定其胶丸含量时标示量%的计算式。3、将维生素A溶于无水乙醇-盐酸溶液中，测定紫外吸收光谱，在326nm波长处有一吸收峰，而将此液置水浴上加热，冷却后，在300-400nm范围内出现3个吸收峰，这是为什么？,小结：VitA的分析,a.紫外吸收特性 b.溶解性 c.不稳定性 d.与SbCl3作用,结构性质,鉴别试验,含量测定,Carr-Price、UV、TLC,紫外-可见分光光度法,三氯化锑比色法,高效液相色谱法,维生素A含量用生物效价表示，其效价单位是 A、IU B、g C、ml D、IU/g E、IU/ml,已知每单位维生素A相当于维生素A醋酸酯0.344g，其=1530，则换算因数等于 A、1820 B、1830 C、1900 D、1920 E、无法计算,计算维生素A吸收度的校正公式为 A328(校正后)=3.52(2A328-A316-A340)。如果校正后的吸收度与未校正的吸收度之差对未经校正吸收度的百分比为-3.2%，则应 A、用皂化法测定 B、用校正后的吸收度计算含量 C、用未校正的吸收度计算含量 D、改用另一校正公式计算 E、以上都不对,维生素A的鉴别试验为 A、三氯化铁反应B、硫酸锑反应C、2,6-二氯靛酚反应D、三氯化锑反应E、间二硝基苯的碱性乙醇液反应,维生素A具有易被紫外光裂解、易被空气中氧或氧化剂氧化等性质，是由于分子中含有（）A、环已烯基 B、2,6,6-三甲基环已烯基 C、伯醇基 D、乙醇基 E、共轭多烯醇侧链,E,哪些描述适合VitA结构及性质 A、分子具有长二烯醇侧链，易被氧化 B、具有较长的全反式共轭多烯结构 C.含酯键，经水解后产生苯并二氢吡喃衍 生物，易被氧化 D.与三氯化锑的无醇氯仿液中呈不稳定兰 色，很快转变为紫红色 E、样品用无水乙醇溶解后，加硝酸加后，呈橙红色,中国药典（2000年版）规定维生素A的测定采用紫外分光光度（三点校正法），此法又称为 A、等波长差法B、等吸收比法C、6/7A法D、差示分光光度法E、双波长分光光度法,用“三点校正法”测定维生素A含量的依据是 A、维生素A可见光区有最大吸收 B、杂质在310340nm波长范围内呈线性吸收 C、物质对光吸收具加和性 D、维生素A与三氯化锑的无水氯仿溶液作 用，产生不稳定蓝色 E、维生素A在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧 化生成具有蓝色荧光的硫色素,第二节 维生素B1的分析 Analysis of vitamin B1,一、结构与性质,1、结构(盐酸硫胺),2、结构特点,3、性质,（五）、具有两个碱性基团，可以和酸成盐。噻唑环上的季铵 嘧啶环上的氨基,二、鉴别试验,VB1专属反应，用于鉴别和含量测定。,（三）其他反应,S元素反应,Cl-反应,小结：VitB1鉴别试验,O,Cl-反应,NaOH Pb(NO3)2,PbS,S元素反应,（一）硫色素反应 Ch.P（2005）,（二）沉淀反应,（三）其他反应,三、含量测定,非水滴定法（Ch.P 2005测原料药）紫外分光光度法（Ch.P 2005测制剂）硫色素荧光法硅钨酸重量法,（一）非水碱量法 VitB1原料,溶剂：冰醋酸指示剂：ChP 以喹那啶红-亚甲蓝（紫红天蓝）滴定剂：高氯酸(0.1mol/L)醋酸汞：消除氢卤酸盐的干扰需要做空白试验 摩尔比：1：2,2、方法,3、计算,要求：99.0%,（二）UV法 VitB1片剂、注射剂,1、原理 共轭体,pH=2 HCl(91000)max=246nm,2、计算,VitB1片：90.0%110.0%,VitB1注射液：93.0%107.0%,（三）硫色素荧光法,ex=365nm,em=435nm,（四）硅钨酸重量法,鉴别试验：硫色素反应、沉淀反应、其他反应含量测定 非水碱量法、UV法、硫色素荧光法、硅钨酸重量法,小结：VitB1的分析,能发生硫色素特征反应的药物 A、维生素A B、维生素B1 C、维生素C D、维生素E E、烟酸,下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光是 A、维生素A B、维生素B1 C、维生素C D、维生素D E、维生素E,与糖类结构相似,Vc易溶于水，水溶液呈酸性；三氯甲烷中不溶,（一）溶解性,酸性 一元酸,由于共轭效应的影响C3OH pKa=4.17C2OH pKa=11.5可与NaHCO3生成钠盐,（三）手性C（C4、C5）旋光性 比旋度+20.50+21.50,L(+)抗坏血酸（活性最高）D(-)异抗坏血酸（5%）L(+)异抗坏血酸（无活性）D(-)抗坏血酸（无活性）,（四）内酯环结构 水解性,（五）与糖类结构相似 具有糖的性质,50,二、鉴别试验 Identifaction Tests,（一）与氧化剂反应（强还原性）,1、与AgNO3反应 Ch.P 2005,3、与其他氧化剂的反应,（二）糖类的反应,（三）UV（BP）,小结：VitC 的鉴别试验,（一）与氧化剂反应（强还原性）1、与AgNO3反应 Ch.P 2005 2、与2,6二氯靛酚反应 Ch.P 2005 3、与其他氧化剂的反应（二）糖类的反应（三）UV 0.01mol/L HCl max=243nm,2、铁、铜离子的检查,Fe：248.3nmCu：324.8nm,（一）碘量法 Ch.P 2005 原料、片剂、注射液（二）2，6-二氯靛酚反应 USP JP,四、含量测定,（一）碘量法（原料、片剂、注射液）1、原理,2、方法,取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘液(0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。,3、讨论,C、立即滴定 减少O2的干扰,A、新沸冷水 赶走水中O2,B、酸性环境 稀醋酸 减慢VitC被O2氧化速度,D、附加剂干扰的排除 VitC注射液消除抗氧剂的干扰,VitC注射液测定前要加丙酮,4、计算,原料药：99.0%,注射剂：90.0%110.0%,片剂：93.0%107.0%,鉴别试验：硫色素反应、沉淀反应、其他反应含量测定 非水碱量法、UV法、硫色素荧光法、硅钨酸重量法,小结：VitB1的分析,（二）2,6二氯靛酚滴定法,2、方法,（1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC（2）快速滴定 2min内 防止其他还原性物质干扰（3）测定对象：VC制剂及食品分析,3、讨论 discuss,（4）缺点,小结：VitC的分析,L抗坏血酸,溶解性强还原性酸性旋光性水解性糖的性质UV,与氧化剂反应糖类的反应UV,溶液的澄清度与颜色铁、铜离子的检查,碘量法2,6二氯靛酚滴定法,维生素C的鉴别反应是 A.与硝酸银反应 B.与2，6-二氯靛酚反应 C.与三氯化铁反应 D.与茚三酮反应 E.与碘化汞钾反应,测定维生素C注射液的含量时,在操作过程中要加入丙酮，这是为了 A、保持维生素C的稳定 B、增加维生素C的溶解度 C、使反应完全 D、加快反应速度 E、消除注射液中抗氧剂的干扰,使用碘量法测定维生素C的含量，已知维生素C的分子量为176.13，每1ml碘滴定液(0.05mol/L)，相当于维生素C的量为 A.17.61mg B.8.806mg C.176.1mg D.88.06mg E.1.761mg,碘量法测定维生素C含量，取本品0.2000g，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml至溶液中，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液(0.05mol/L)滴定，使溶液显蓝色并在30s内不退，消耗碘溶液20.00ml。已知维生素C的分子量为176.13，求维生素C含量98.1%B.98.9%C.98.5%D.50.8%E.88.1%,可发生以下反应或现象的药物为 A、维生素B1(盐酸硫胺)B、维生素C C、两者均能 D、两者均不能 121、与碘化汞钾生成黄色沉淀 122、麦芽酚反应 123、在乙醚中不溶 124、与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失 125、硫色素反应,A,D,C,B,A,第五节 维生素E的分析 Analysis of vitamin E,苯并二氢吡喃醇,（一）、结构,一、结构与性质,维生素E,母核：苯并二氢吡喃醇衍生物 苯环上有一乙酰化的酚羟基名称：合成型 dl生育酚醋酸酯 天然型 d生育酚醋酸酯侧链：脂肪烷烃,（二）、性质,杂质，需检查,二、鉴别试验,1、硝酸反应(Ch.P 2005),橙红色,2.三氯化铁联吡啶反应,3.UV法,溶剂：无水乙醇浓度：0.01%max=284nm min=254nm,4.TLC法,薄层板 硅胶G展开剂 环己烷乙醚（4：1）显色剂 硫酸（105，5min）VitE Rf=0.7-生育酚 Rf=0.5-生育醌 Rf=0.9,小结：VitE 的鉴别试验,（一）硝酸反应（二）三氯化铁反应（三）UV（四）TLC,酸 度,游离生育酚,三、杂质检查,1、酸度-游离醋酸,以NaOH滴定液（0.1mol/L）体积控制；酚酞指示剂；1.0g样品不得超过0.5ml。,2、游离生育酚的检查,硫酸铈滴定液(0.01mol/L)1.0ml指示剂：二苯胺（亮黄灰紫）反应摩尔比 1:2,例：取本品0.10g,加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸铈液不得过1.0ml，求限量？,四、含量测定（Assay）,（一）GC ChP(2005)(法定方法),1、特 点 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好,2、色谱条件,3、方法-内标法,校正因子：,（二）生育酚外标法,此外，还有比色法、铈量法、荧光法,鉴别试验：硝酸反应、三氯化铁联吡啶、UV法、TLC法杂质检查：酸度、游离生育酚含量测定：GC法、HPLC法,小结：VitE的分析,检查维生素E中的游离酚时，采用方法应为 A、对照法 B、灵敏度法 C、紫外分光法 D、滴定法 E、旋光法,中国药典采用气相色谱法测定维生素E含量，内标物质为 A、正二十二烷 B、正二十六烷 C、正三十烷 D、正三十二烷 E、正三十六烷,用气相色谱法测定维生素E的含量，中国药典（2005年版）规定采用的检测器为 A.紫外检测定器 B.荧光检测定器 C.热导检测器 D.氢火焰离子化检测器,维生素E的鉴别试验有 A、硫色素反应 B、硝酸氧化呈色反应 C、硫酸-乙醇呈色反应 D、碱性水解后加三氯化铁乙醇液 与2,2-联吡啶乙醇液呈色反应 E、Marquis反应,维生素D是一类抗佝偻病维生素的总称。目前已知的维生素D类物质至少有十种之多，它们都是甾醇的衍生物。,维生素D2、D3原料药维生素D2胶丸和注射剂维生素D3注射剂,Ch.P,药典收录情况,一、结构与性质,VD2 骨化醇或麦角骨化醇,VD3胆骨化醇,比VD2少一个双键，C24上少一个CH3,1、溶解性脂溶性,2、开环的甾体具有甾体的显色反应,3、手性C原子具有旋光性 VD2：6个手性碳，VD3：5个手性碳,4、多烯 不稳定性 具有紫外吸收,二、鉴别试验(Identifaction Tests),(一)显色反应,醋酐-浓硫酸反应,2.三氯化锑反应,3.其它,D2：黄红紫绿D3：黄红紫蓝绿绿,橙红色粉红色,D+三氯化铁D+二氯丙醇和乙酰氯,橙黄色,绿色,(二)比旋度测定,注意事项：应于容器开启30分钟内取样 在溶液配制后30分钟内测定,(三)区分反应,S+85%硫酸 D2显红色，max=570nm D3显黄色，max=495nm,(四)其他方法,TLC、HPLC、制备衍生物测熔点,三、杂质检查,(一)麦角甾醇的检查:样品溶液加洋地黄皂苷溶液，混合，放置18h不得发生混浊或沉淀。,(二)前维生素D的光照产物,四、含量测定方法（Assay）,Ch.P(2005版)采用正相高效液相色谱法测定维生素D的含量，定量方法为内标法，内标物为邻苯二甲酸二甲酯，该法分为三个方法。固定相：硅胶流动相：正己烷正戊醇（997：3）,第一法：用于无VitA醇及其它杂质干扰 的情况,第二法：用于有杂质干扰的情况 皂化提取净化处理测定,第三法：用于经第二法处理后仍有杂质 干扰的情况 供试品按第二法净化处理水浴加热,用碘量法测维生素C含量时，加新煮沸放冷的蒸馏水目的是：（）A、使维生素C溶解 B、除去水中微生物的影响 C、使终点敏锐 D、除去水中二氧化碳的影响 E、消除水中溶解氧的影响,维生素C能与硝酸银试液反应生成去氢抗坏血酸和金属银黑色沉淀，是因为分子中含有（）A、环已烯基 B、伯醇基 C、仲醇基 D、二烯醇基 E、环氧基,维生素C一般表现为一元酸，是由于分子中（）A、C2上的羟基 B、C3上的羟基 C、C6上的羟基 D、二烯醇基 E、环氧基,中国药典测定维生素E含量的方法为 A、气相色谱法 B、高效液相色谱法 C、碘量法 D、荧光分光光度法 E、紫外分光光度法,下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是（）A、维生素A B、维生素B1 C、维生素C D、维生素D E、维生素E,2.6二氯靛酚法测定维生素C含量，终点时溶液（）A、由红色无色 B、由蓝色无色 C、由无色红色 D、由无色蓝色 E、由红色蓝色,需检查特殊杂质游离生育酚的药物是 A、维生素A B、维生素B1 C、维生素C D、维生素E E、维生素D,紫外法测定维生素A含量，测得校正后的A值与未校正的A值的差值再除以未校正的A值为10%。A、改用色谱法测定 B、应按“其它维生素A”规定的方法测定 C、不需要校正，仍按原来的A值计算 D、应以校正后的A值计算含量 E、改用第二法测定,硫色素荧光法测定维生素B1溶液，测得对照荧光强度为45%（浓度2.0g/ml）,空白液荧光强度为5%；样品荧光强度为55%，空白液荧光强度为5%。维生素B1溶液的含量为 A、2.4g/ml B、2.5g/ml C、1.5g/ml D、1.6g/ml E、2.44g/ml,紫外法测定维生素A含量时，测得max在330nm，A/A328比值中有一个比值超过了规定值0.02，应采用什么方法测定（）A、多波长测定 B、取A328值直接计算 C、用皂化法（第二法）D、用校正值计算 E、比较校正值与未校正值的差值后再决定,在酸性溶液中，2.6-二氯靛酚与维生素C作用（）维生素A与三氯化锑作用（）维生素E在酸性或碱性溶液中加热产生（）盐酸硫胺在碱性条件下与铁氰化钾作用（）维生素D与醋酐-浓硫酸反应（）,A、蓝色荧光 B、不稳定蓝色 C、黄色红色绿色 D、生育酚 E、红色退去,E,B,D,A,C,维生素E含量测定中加正三十二烷（）非水碱量法测定维生素B1,加醋酸汞的作用是（）碘量法测定维生素C，溶解样品的水须采用新沸放冷的水的目的是为了（）碘量法测定维生素C注射液时，要加丙酮，其作用是（）,A.用作内标 B.除去盐酸影响 C.消除抗氧剂的干扰D.除去水中的氧,A,B,D,C,1可用三氯化锑反应鉴别（）2可与生物碱沉淀剂反应生成沉淀（）3可用紫外分光光度法测定含量（）4定量加入硫代硫酸钠，用标准碘液作 剩余滴定（）5可用硫色素反应鉴别（）,A、维生素A B、维生素B1 C、两者均可 D、两者均不可,B,D,C,B,A,A、维生素B1 B、维生素C C、两者均能 D、两者均不能,6与碘化汞钾生成黄色沉淀（）7属水溶性维生素类（）8属脂溶性维生素类（）9与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失（）10在碱性条件下与铁氰化钾反应，产生蓝色荧光（）,A,C,D,B,A,测定维生素A的紫外三点校正法中，三点波长的选择是（）A、一点为最大吸收波长 B、其余两点在最大吸收波长的两侧 C、两点离最大吸收波长的距离相等 D、两点吸收度相等，均为最大吸收的6/7 E、采用几何法或代数法求得校正公式,维生素A分子中含有共轭多烯醇侧链，因此它具有下列物理化学性质（）A、不稳定，易被紫外光裂解 B、易被空气中氧或氧化剂氧化 C、遇三氯化锑试剂呈现不稳定蓝色 D、在紫外光区呈现强烈吸收 E、易溶于水,下列哪些不是维生素C所具有的性质（）A、在乙醚、氯仿中溶解 B、具强还原性 C、分子中有两个手性碳原子 D、在酸性溶液中成盐 E、具有糖的性质,维生素C片（规格100mg）的含量测定：取20片，精密称定，重2.1020g，研细，精密称取0.4012g片粉，置100量瓶中，加稀醋酸10mL与新沸过的冷水至刻度，摇匀，用干燥滤纸迅速滤过，精密量取续滤液50mL，加淀粉指示液1mL，用碘滴定液（0.0504mol/L）滴定至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪，消耗碘滴定液22.36mL，每1mL的碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的维生素C。平均每片含维生素C多少mg？,104.0 mg,Thank You!,