革兰氏染色法.ppt
,微生物学实验,实验二 革兰氏染色法,学习并初步掌握革兰氏染色法初步认识细菌的形态特征 了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性,实验目的,实验原理,革兰氏阳性菌:革兰氏阴性菌:,1.制片:取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。2.初染:滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2分钟,水洗。3.媒染:用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1分钟,水洗。4.脱色:用滤纸吸取载玻片上的残水,将载玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。,三.实验步骤:,注意:乙醇脱色是革兰氏染色操作的关键环节。脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌;脱色过度,阳性菌被误染成阴性菌。脱色时间一般为20-30秒。5.复染:用番红液复染约2分钟,水洗。6.镜检:干燥后,用油镜观察。,三.实验步骤:,作业,根据观察结果,画出大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的形态图,并注明菌体染色后的颜色,说明是G+还是G-。,Thank You!,Thank You!,