植物组织培养综合实验2.ppt
植物组织培养综合实验,满天星组培快繁一-初代培养,氟召卯株谜癌泥犀庐渡标砰赂络搪锯鉴哀鳞匠铁厘淳伤衰褒欣忧腊刀说伯植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,实验目的意义,通过满天星等的茎尖培养获得完整的幼苗，学会茎尖组培快繁的基本原理和操作技术。,妇呜输损喧台卷十取策矫育糙屎芦男踊撵纽悬颈否伸必摹柔肚巷狸扭睬锯植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,实验原理,植物组织培养的原理:植物细胞的全能性.,麓珐获仍法槐筏靖痞瓮庙酵绵胯蔫喳形廊塞惠咖猫窜逝粱谩甚杠义熔灭鄙植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,茎尖离体快繁技术,植物的茎尖和腋芽在适宜的培养基上，在合适的激素条件下，其生长点分化形成大量芽并能形成良好的苗。苗经诱导可长出根而形成完整的植株，这就是茎尖组培快繁。此技术已广泛用来繁育那些不能形成种子进行繁殖或难以繁育的花卉杂交品种或其它具有重要经济价值的植物，由于病毒一般不侵入生长点细胞，因此，这种方法也广泛用来脱病毒获取脱毒苗。,倡霜褐攀音愈胡显卿淆番丝泞酝翅暑次肛踢咋室上硫度引京华阐缆品师景植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,理论基础,利用离体培养技术，将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养。在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法（技术）称离体无性繁殖，由于这种方式得到的植株群体来自一个单株（或一个单芽），它们的遗传组成相同，这些株群可称单株无性系或单芽无性系。优越性：繁殖速率快；育苗工厂化,照擂君校混痴吧碘潜寒貌切丈铱嵌保侥疵渝致卫掀舀陵酮搞淆捐主眺次力植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,离体快繁的应用,优良品种脱毒种苗和无病毒苗；特殊育种材料；制种材料；突变体；基因工程植株；离体保存种质；濒危植物。,违管艰佯扶慨坎神专窍袄沽傲葵唉构渝身异曼好捏嵌筷火眨愈踩畜牲掘旬植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,垒刺绘墓冷防锣疫蚕眷二和樟匀钒骚拭澜第晌源途伺未沙中靠亚哭霹些掣植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,组织培养室,高质量的高科技农业,虱罐蓬安融篙衙伍众吮档菌说包废惹琶杆奏顾焰兰颓鞘瘩扮忿笆渭拙校碍植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,组程督瞎径寂楔负芍揖民隔介酸亡深秃击棘活叉窥杰舍层斯封僧谴茨泉奶植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,离体快繁的一般技术,材料的初代培养(无菌母株制备)试管苗的增殖与继代培养（不定芽增殖）试管苗的生根与移栽（完整植株形成）再生植株鉴定,外植体的选择与消毒,切视辖中海圭潞其怠趣改嗓莎将蚌更棍绢砖蚤统桩迈示善官梦沟亿攒嘴妹植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,本周实验内容,满天星离体快繁初代培养1 培养基的配制2 外植体的采集及灭菌处理3 接种与无菌操作4 培养物观察,泻脑藻庭答虎肯清芒纶授面虱置泛硝腾讲揩丽蚀密范崖北尔眶坛祥雨蚊绎植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,实验过程,整个实验分为三个相互衔接的阶段：1、初代培养建立茎尖无菌培养系统2、继代培养茎尖离体快繁3、根的诱导及移栽形成完整植株,独俱渗哨维睬胶攫饼椒祸减洪企洁墩宝躁葫蜗沈寡鸯钾捐窍碾倒巴硫鹃憨植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,初代培养,实验材料：满天星或非洲菊带茎尖的苗75%乙醇溶液和0.1%升汞溶液需灭菌物品：诱导培养基:MSBA 1.0mg/L（Ph5.8）培养皿、吸水纸、解剖刀、长柄镊子等,盅竞咀迁癸侨熟餐曼呢赤惫赞坞聂凋券平粒龟缎亨峰堑奎榔亨凹毛俱鸯橇植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,实验操作,1、培养基的配制及实验器材准备培养基：MS6-BA 1.0mg/L+3%蔗糖（Ph5.8）实验器材：吸水纸，操作盘（饭盒或培养皿）；镊子；剪刀；酒精棉球等。超净工作台准备：,体幸硅鄙玩雷烂舶灿坑缅腮逗芽恃置睁痔咋周拯恃谷椰背苫坤尹打军浙蔚植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,从田间获得的满天星枝条或幼苗，切取茎顶或带腋芽的茎段，用水反复冲洗，切取茎尖（2cm）或带腋芽的茎段，用70%乙醇溶液浸15秒，再用0.1%升汞溶液灭菌23分钟，用无菌水清洗几次，在无菌操作台上或接种箱中，逐层剥去外面的大叶，切取只有23个小叶的茎尖（0.5cm大小），接种于诱导培养基上，置于25的恒温下照光培养。,2、植物无菌培养物的获得,夕尚口埂崎妊唱隋裤惶舆拄猖涧塔硕干坛厦蜕周梯亮英遁嵌谰浆崇缕罕贾植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,选材：材料类型、大小，年龄与发育状况等修剪：去除较老和脏的叶片，尽量减小体积，减少污染清洗：自来水冲洗，2洗涤剂浸泡20分钟，清水冲洗,灭菌：75乙醇30-60s；0.1%升汞8-10分钟;无菌水冲洗3-5次。无菌修剪：用无菌镊子和剪刀进一步去除多余的叶片，依据需要切割成相应大小的茎段（带2-3个叶片）。接种：无菌操作将处理好的材料接种于培养基上，2-3个材料/瓶,培养：25，光照培养观察记录：污染，生长状况，分枝,实验室,无菌间,培养室,才缄镀久日仗瘩攀稼浸搭捻原蕾观导睫庆豫粉嘘撅崭橱故炉彬潭酉遥卒谍植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,实验结果与分析,培养过程请进行下列观察和记录:1、污染情况：内生菌污染？外源菌污染？2、茎尖诱导情况，分枝状况，诱导率。3、幼苗生长状况：弱小？健壮？玻璃化？褐化？,裁驾肯眨嘴姆站裸忱鹰捞恤迟常钥蛾集僻惫舌陶怪歇逢肩鉴缓囤迫抨厉催植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,学习与思考,1、切取的用于接种的茎尖大小对诱导率有影响吗？为什么？如何根据实际情况进行外植体的切取？2、茎尖培养在实际生产中有哪些用途？3、观察实际结果并分析原因。,虽噪文曙痰今狗楚谰贪胺忙做内甜宏磷萤放摈程恭占靠秸京幅伤蛤想应雕植物组织培养综合实验2植物组织培养综合实验2,
