检验科标本运送培训课件.ppt

临床标本采集运送培训检验科2018-12,分析前的质量保证,分析前的质量保证 检验报告是临床医师诊治疾病，判断预后，评估健康状况 的重要依据。检验数据的价值首先体现在它的准确性上，只有准确的检验结果才能正确指导临床诊疗。而检验结果 的准确与否，除了受检验过程中(检验中)各种因素的影 响外，还受到检验前许多因素的影响，如采集标本前病人 的状态，标本采集是否规范，标本的存贮和运输是否合理 等。国内外均有报道,检验结果误差中70%左右来自检验 前(分析前),而且检验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控 品和标准品等再好也无法解决的。另一方面，检验数据的 价值还体现在检验报告的正确应用上，正确地解读检验结 果是正确应用检验报告的前提。临床医师拿到检验报告后，首先要对检验数据做全面的分析，排除各种干扰因素，才 能做出正确判断。,实验前质量控制主要包括：,患者的准备；标本的采集；标本的储存；标本的运送；标本送出及签收；标本的处理；已知的和需考虑的生物因素和干扰因素等。,1、患者的准备,一般要求患者处于安静状态；晨起时的精 神、体力、情绪等因素的影响较小，是大 部分标本采集的最佳时间；如可能，患者 最好停服干扰检测的药物；根据项目和标 本类别选择相应的容器。许多检测对饮食、饮水和药物有特殊要求,2、标本的采集,2.1正确的采集标本是保证检验质量的基础(1)避免干扰物污染，特别是定量分析标本；(2)标本采集部位和方法要正确；(3)标本标识一定要清晰无误；(4)无人为的溶血和混浊因素；(5)合理使用抗凝剂及防腐剂；(6)收集区温度最好不超过20;(7)微生物检验标本采集严格无菌概念；(8)标本采集后要尽快送至实验室。,2.2标本采集时间：,(1)空腹标本：一般指空腹8h后采集的标本。清晨 空腹血液标本常用于临床生化定量测定，受饮食、体力活动、生理活动等的影响较小，易于发现和观 察病理情况，而且重复性较好。(2)随时或急诊标本：指无时间限制或无法规定时 间而必须采集的标本，被检者一般无法进行准备。随时或急诊标本主要用于体内代谢比较稳定以及受 体内因素干扰少的物质的检查，或者急诊、抢救病 人必须做的检查。(3)指定时间标本：即指定采集时间的标本，根据 不同的检测要求有不同的指定时间，如24h尿蛋白定 量、葡萄糖耐量试验、内分泌腺的兴奋或抑制试验、肾脏清除率试验等。,2.3采集方法,具体方法见血标本采集作业指导书。,3、标本的储存,标本采集后应尽快送至实验室，若不能及 时送检，已采集的标本要按检验规定的贮 存条件，如室温(18-25C)、冷藏(常 规2-8C)、冰浴、温浴或防腐贮存，将 标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的 环境中，避免振摇，以免标本渗漏或溶血 影响检测结果。血液标本采集后应及时分 离血清或血浆，否则可发生红细胞与血清 之间成分的相互转移，或红细胞中的某些 酶分解待测物等，从而影响检验结果。,4、标本的运送,必须保证运送后标本所分析的结果与刚采 集标本后分析的结果一致。如未及时送检，可能导致血细胞与血清长 时间接触，发生下列变化：(1)由于血细胞的酵解作用，血糖以每 小时5%15%的速率降低，即使在真空采 血管中在较低温度下每小时也会降低1.9%,糖酵解产物乳酸和丙酮酸升高。,(2)由于红细胞膜通透性增加和溶血加重，红细胞内化学成分发生转移和释放，酶活性 受影响，血清无机磷、钾、铁、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸转移酶、肌酸激酶等升高。(3)由于酯酶作用，胆固醇酯因分解而减 少，游离脂肪酸增加。(4)酸性磷酸酶测定血标本室温放置1 2h测定结果降低 50%。(5)电解质测定血标本未及时分离血清和 血浆，可导致血钾测定结果偏高。,标本采集的基本原则,1、申请单填写要点 每个检验项目或组合检验项目送一份标本，每一份标本附一张申请单。按照检验项目申 请单的要求，采集特定的标本，并将标本送 到指定的实验室。因此，检验申请单是实验 检查的第一步。,(1)病人身份识别信息：申请者必需清楚 填写病人的姓名、性别、年龄、或其它有效 识别身份的编号；(2)病人的病历信息：申请者必需清楚填 写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、样本类型、样本的采集日期和时 间(年、月、日、时、分)、申请者姓名、申 请检验日期；,(3)申请的检验项目：申请者必需清楚填 写检验项目名称，项目名称应规范、准确，特别是申请组套项目时，一定要与组套内容 一致，否则需填写具体单项；备注:有关的临床和治疗信息，特别是用药 信息是检验师评价结果的必要条件。药物可 能在体外影响分析方法或在体内引起病理变 化，因此，要特别注意在申请单上提供此类 信息。,2、关于实验室标本拒收规定,有下列情况时可考虑标本拒收：2.1 标本属性不清、标记错误或无标记、标 本标识与申请单标识不符；2.2抗凝剂比例错误；2.3标本收集管使用错误：,(1)血沉(ESR0应使用1:4枸橼酸钠(黑帽)抗凝管，不能使用其他管；(2)凝血功能检测使用1:9枸椽酸钠(蓝帽)抗凝管，不能使用其他管；,(3)K+、Na+、Ca2+可用非抗凝血，绝对 不能使用EDTA2K、枸椽酸钠、草酸钠抗凝 血，推荐使用肝素抗凝血；(4)全血细胞分析、ABO 血型测定必须用 EDTA(紫帽)抗凝管。,2.4微生物室拒收标准：,(1)手工申请单无检验项目或检验项目不 清楚的标本，项目非本实验室检验的标本；(2)申请单病人姓名和标本上的姓名不一 致，可能为病人入院后修改过姓名，但是无 法确认标本正确归属的，实验室可以拒收；(3)申请单和标本已经分离，标本容器上 又无明确患者标识信息等；,(4)空管，标本量过少，未达到规定要求 的；(5)收集容器不正确,所有标本微生物培养 均应用洁净、无菌、加盖、封闭容器收集送 检。(6)检验申请项目与标本类型不符的。如：申请为血培养，实际送检为胸水标本。(7)标本外部有严重的遗洒、渗漏，怀疑标 本可能有交叉污染的。(8)经询问确认标本采集部位不正确。,(9)经询问，确认标本超过标本允许送达时 间的，室温保存不超过2小时，4冷藏保存 时间不得超过8小时；但血培养、淋球菌培 养标本不能冷藏保存，应保温立即送检并接 种(10)经询问确认标本保存、运输方式不正 确的。(11)如果原始标本不可替代或很关键，如 脑脊液和组织标本等，拒收应慎重。这些标 本在拒收前与临床医生进行充分的沟通，以 求发现弥补的办法。,3、微生物标本采集基本原则,(1)发现感染应及时采集微生物标本作病 原学检查，三级医院微生物标本送检率不 应低于70%。(2)尽量在抗菌药物使用前采集标本。(3)标本采集时应严格执行无菌操作，减 少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。(4)标本采集后应立即送至实验室。床边 接种可提高病原菌检出率。,(5)以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤 口拭子送检后应立即接种。(6)混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤 口拭子，不可置肉汤培养基内送检。(7)盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用 消毒剂。(8)送检标本应注明来源和检验目的，使实 验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养 环境。,(9)一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即 送检。(10)厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试 管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器 运送。(11)其他所有的标本采集后最好在2h之内 送到实验室。若不能及时送检，标本应置于 一定环境中保存，如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4环境中，脑脊液 等则要在25保存。,(12)患者标本中可能含有大量致病菌，不管 标本运送距离远近，都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须 包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。,标本采集要求和方法,1、血液检验标本采集方法 按照血标本采集部位的不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。,1.1 静脉血采集方法、注意事项,(1)止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压 迫静脉时间不宜过长,以不超过 40秒为宜，否则 容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的 检查结果,如乳酸升高、pH 值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。(2)采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果发 生严重干扰，特别是血糖和电解质。,(3)避免溶血、杂质污染：采血器具必须无 菌、干燥、洁净，避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为 红细胞的某些成分与血清(浆)不同，样本溶 血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查 结果。(4)血样的采集：血样要求在每一天的同一 时间采集，理想的时间是早晨 7:00到 8:00,尤其是以监测为目的时，更要保证标本 采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入 应在前一天下午 6:00 到7:00(急诊检验 例外)。,(5)标本采集后须立即送检，放置过久影 响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一 处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检测结果。(6)采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。(7)微量元素测定采集标本的注射器和容 器不能含游离金属,1.2 临床化学/免疫检验标本,临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好 使用真空负压采血管。标本采集主要注意事项：(1)化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可 采 一管血；(2)采血量视检查项目多少不同而异，通 常为4.05.0ml;,(3)多个组合检测项目同时采血时应按下 列顺序采血：血培养无添加剂管凝血管有添加剂管 有添加剂管的顺序为：橼酸盐管肝素管 EDTA管草酸盐/氟化钠管 不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血 清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本 收集后，须尽可能早地送检。,1.3 红细胞沉降率(血沉，ESR)检测标本,静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L,即 32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠1:4抗凝管采 血),黑帽管。采血注意事项：(1)单独采1管血，准备采血至2 ml刻度线(抗凝剂：全血=1:4);(2)采血后立即上下颠倒混合510 次；(3)采血后应尽快送检(必须 2h内检测),1.4 血常规(全血细胞分析)检 验标本,一般用EDTA2K 1.52.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝 采血管-紫帽管)。采血注意事项：(1)采血后立即上下颠倒混匀，510次，不可用 力震荡；(2)应按抗凝管刻度采血至 2ml,可不用空腹；(3)采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本 采血后应及时推片固定，因为超过 2 小时WBC形 态会发生改变);(4)血型与血常规可采1管血。,1.5 75克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验,1.5.1 病人准备：试验前3日，每日进食碳 水化合物量不低于 250-300 克，且维持正 常活动，影响试验的药物(如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用，试验前病人应 1016小时不进食。,1.5.2 标本采集：临床上常用方法是清晨抽 空腹血后，口服 75 克葡萄糖，再于给糖后 0.5、1、2小时各采血2ml/1次(共4次)。1.5.3 标本保存：采血后1小时内分离血清 并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采 血，于 28保存。,1.6 高血压系列检验标本,1.6.1 高血压四项,属外送项目(金域检验)(1)病人准备：-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂 及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要 在停药后2周测定肾素活性(PRA),利血平等代谢 慢的药物应在停药 3 周测定。不宜停药的病人改 服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影 响机体 PRA 水平，故病人测定 PRA 前 3 天应适 当减少食盐摄入量，最好同时测定取血前24小时 尿钠含量，以供分析PRA结果时参考；,(2)标本采集：静脉取血 45ml,拔除针 头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后 上下颠倒 5 次,混匀后 2500 转/分,离心 5 10 分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后 低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保 存(-15)。溶血标本不能检测；(3)标本类型、标本量：专用抗凝管采血(EDTA2K抗凝管),分离血浆,取 2ml送 检；,(4)注意事项：申请单上应注明抽血时的 体位(卧位：病人在早上 6-8时起床前，取静 脉血；立位：病人起床后活动 3小时，取静 脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保 存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到 影响。,1.6.2 醛固酮,(1)病人准备：留样前应停服利尿剂至少 3 周，停服抗高血压药物 1 周；(2)标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝 素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20保 存待测；尿液标本则留取24小时尿量，用 1015mL浓盐酸防腐；(3)申请单上注明：抽血时的体位(卧位、立位)和饮食情况(普食饮食、低钠饮 食);尿液标本要准确记录24小时尿量。,1.7 皮质醇标本采集及注意事项,正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为 早上 8 点、下午 4点和晚上12点采血，送检 时请务必在申请单上注明采血时间。,1.8微量元素检测标本采集要求,1.8.1 采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使 用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干净)。必须使用检测仪器厂家提供的专用管，使用专 用管前，请检查管中是否有蛋白沉淀剂。1.8.3 采集方法：采集手指末梢血，擦去第一滴血后 用定量专用吸管准确吸起20ul血液注入专用管中送 检。(一般持检查单到检验科采血)1.8.4 如不能及时送检，应放置室温保存。1.8.5 溶血对结果影响较大，应尽量避免。若血浆为 溶血标本，视为不合格标本。,1.9 基因检测标本采集要求：,1.9.1 所有用于基因诊断的标本必须用无 菌试管或容器留取,严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意无菌操作。1.9.2 为避免污染,送检基因诊断标本项目 需单人单项目单管。,1.9.3 采集方法：(1)血液标本 抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然 凝固或 2000 转/分离心，取分离出的血清 置 28保存，不超过24小时，血清标本 不宜反复冻融；(2)女性分泌物标本 分泌物标本采样应在非月经期进行；采 样前 3 天内不使用阴道内药物，不冲洗阴 道；24小时内不应有性行为；,采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多 的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭 子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转 35 周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对 于怀疑 HPV 感染的患者，尽量采集病变部 位标本，可提高HPV的检出率。将取样后 的棉拭子放入配套的采集管中，旋紧管盖；男性分泌物标本：先清洁尿道口，将棉 拭子伸入男性尿道 1cm,旋转 35 次获得 标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管 中，旋紧管盖；,疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周 有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，采集 疣体表面脱落细胞。用生理盐水润湿棉拭 子，用力来回擦拭疣状组织表面三次，取 得脱落细胞。将取样后的棉拭子放入配套 的软管中，旋紧管盖。,1.10骨髓检查的要求和注意事项,1.10.1 涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注 明“B”,骨髓片注明“M”,以示区别。1.10.2 申请单注意事项：(1)病例摘要:应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状 以及药物的应用等均应填写清楚；(2)化验结果：血常规结果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分类也 一并填上；,(3)采取骨髓部位也应填上，如果采取骨 髓时不顺，应重抽，以免耽误病人；(4)写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等(以便与临床密切联系)。,2、尿液常规检验标本采集 2.1 尿标本,种类 按检查目的，常可采用下列标本：*晨尿：最好，安静状态下留取清晨第一次 尿，该标本为浓缩尿.其细胞和管型等形 态完整，适合做各种有形成分的检查和尿 蛋白、尿糖等项目的测定。*随机尿：较常用，适用于门诊和急诊病人 常规检验.结果易受多种因素影响。*24h尿：用于尿液成分定量检查分析。,(1)24h 尿采集方法：留尿当日早晨 7 时 排空尿液，之后每次排尿均收集于一大容 器内.至次日早晨 7时最后一次尿液共24 小时之间的所有尿液全部收集于洁净容器 内。在收集期内第一次尿收集后加入防腐 剂甲苯混匀，放阴凉处保存，全部收集完 毕测量并记录 24h总尿量，混匀后取50毫升置于有盖容器内送检即可。(2)24h尿可用于检测CRE、BUN、K、Na、CL、Ca、P、UA、GLU等,特殊实验尿(如 3h、8h、12h 等计时尿和 餐后尿等),则应按医嘱要求进行留尿，并 注明用药时间，便于分析比对。*清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物学培养、鉴定和药敏。,2.2 尿液标本收集容器要求,(1)清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次 性使用，有较大开口便于收集；(2)避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应 注意避免烟灰、纸屑等异物混入；(3)无干扰化学物质(如表面活性剂、消毒剂)混 入，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收 集标本；(4)能收集足够尿液，最好大于50 ml,如收集定时尿，容器应足够大,并加盖，必要时加 防腐剂；(5)如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集 中段尿液。,2.3 尿液采集方法,尿液常规检查标本应按以下原则进行采集：(1)尿液检验最好留取新鲜标本及时检查，否则 尿液生长细菌，使其中的化学成分发生变化。新 鲜晨尿最佳,以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件 恒定，便于对比。门、急诊患者亦可随机留取。在留取24h或 12h尿液时，根据检测目的加入防腐 剂。(2)尿标本的采集方法多采用自然排尿法，需要 注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染；对自 然排尿困难或需细菌培养者，可在无菌操作下用 导尿法或膀胱穿刺法采集。,(3)尿中某些化学物质及有形成分不稳定，一经排出后易发生物理、化学变化；而尿 中原有或污染的细菌生长也可导致成分改 变，如葡萄糖被分解。因此，采集的尿应 加盖后尽快送检，在采集后 2h内完成有关 检查。(4)如不能及时送检或收集较长时段尿样,可采取化学防腐(不能用于微生物检查)、冷 藏等保存措施；尿液标本冰箱可保存68h但细胞等有型成分会有破坏，会有结晶析 出。,(5)根据不同检测目的选择不同的防腐剂：,临床最多用的尿液防腐剂为：1.甲醛(formalin),用于尿液有形成分检查，浓度为 400mg/L尿液，即 40%;2.甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化 学成分的定性或定量检查，520m1/L尿 液；3.浓盐酸(hydrochloric acid),用于定量 测定尿醛固酮、儿茶酚胺等，浓度为1 m1/L尿液。,(6)沉渣检查：清晨空腹第一次尿,应在1 h 内送检。标本置于干燥、洁净的容器尿杯 中，至少 10 ml。一般情况下，由患者自己 采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留 取。(7)特殊试验外，晨尿或随机尿要留取中 段尿送检，女性在经期不宜做尿液检查。,3、粪便常规检验标本采集,粪便常规检查标本采集方法及注意事项：(1)采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差 别，一般检验留取新鲜的自然排出的粪便 35g,必要时可肛拭子采取，放入干燥、清洁、无吸水 性的有盖容器内，贴好标识送检。标本容器最好 用内层涂蜡的硬纸盒，便于检查后焚毁。细菌检 查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混 入消毒剂及其它化学药品。(2)盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查，表面无异常时应从粪便表面、深处及粪端多处取 材；采取标本后及时送检，否则可因 PH 及消化 酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。,(3)不应留取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可导致某些项目检测结 果出现错误。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等异物，易混淆实验结果。不应 该从卫生纸或衣裤、纸尿裤等物品上留取标 本，不能用棉签有棉絮端挑取标本。(4)做大便隐血试验时，应嘱患者于检查 前 3d内禁食肉类、含动物血的食物、某些 蔬菜，禁服铁剂和维生素C 等对实验有干扰 作用的药物。选取外表及内层粪便收集于合 格容器内及时送检，长时间放置可使反应的 敏感度降低。(5)细菌检验用标本应全部用无菌操作收,4、浆膜腔积液检验标本采集,4.1 浆膜腔积液检查标本(1)浆膜腔积液标本一般由临床医生行无 菌穿刺术采集标本。(2)送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取 2mI;细菌学检查用无菌 管采集标本，厌氧茵培养留取1mI,结核菌 检查留取10ml。,(3)标本采集后必须立即送检(否则可出现 细胞变性，标本凝集，细菌溶解)。(4)用于细胞学检查时,可在标本中加适量 EDTA盐抗，但还需留取1管不加抗凝剂的 标本用于观察积液的凝固性；化学检查标 本宜用肝素抗凝。,4.2 脑脊液标本采集,(1)由临床医师行腰椎穿刺术采集标本。(2)采集后的脑脊液分别收集于 3 个无菌 试管中，每管 12 ml,第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作 一般性状及显微镜检查(脑脊液常规)。(3)标本必须立即送检，放置过久影响结 果，如细胞破坏、变性或细胞包裹于纤维 蛋白凝块中，使细胞计数降低，分类不准 确等；存放的脑脊液葡萄糖会分解，使检 测结果降低。,4.3 胸、腹水标本采集,(1)由临床医师行无菌穿刺术，最好留取 中段液体于消毒容器内，立即送检。(2)为防止出现凝块、细胞变性、细菌破 坏自溶等，标本中应加入抗凝剂。常规及 细胞学检查宜用EDTA-2K抗凝，生化检查 标本宜用肝素抗凝。,4.4 关节腔穿刺液,标本采集后第1管作微生物及一般性状检查，第2 管用肝素抗凝作细胞学及化学检查。,4.5 前列腺和精液检查,前列腺液标本应由临床医师进行前列腺按摩术采 集，可直接滴在玻片上；若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液。疑为前列腺结核、脓肿或 肿瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失败或检 查结果阴性，而明确有临床指征者，可隔35天 后重新复查。精液采集最好在实验室附近，室温应控制在 20 35,采集标本前禁欲 37 天.采集精液前排净 尿液。可用手淫法或其它方法，将一次射出的全 部精液直接排入洁净、干燥的容器内。因精子生 成日间变动较大，不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔12周检查一次，连续检查 23次。,4.6 细菌培养之脑脊液、胸腹水穿刺液、关 节腔穿刺液标本采集,(1)应在用药前采集,由临床医生以无菌条 件下进行腰椎穿刺采集脑脊液 35ml,因 脑膜炎球菌易自溶，流感嗜血杆菌也易死 亡,故盛于无菌试管或小瓶中保温立即送检。或将脑脊液5ml直接注射于血培养儿童瓶中 送检即可。,(2)穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关 节液及鞘膜液。,一般由临床医生穿刺抽取。标本的采集应在患者用药之前，或停药 12 天后进行。胸水、腹水可抽取 5 10ml,心包液、关节可抽取 25ml,将所 得穿刺液分别盛于含有和不含有抗凝剂的 无菌试管或小瓶中，充分混匀后，立即送 检。,5、微生物检验标本采集,微生物学检验标本的正确采集、运送及处 理，与细菌的培养、鉴定结果有十分密切 的关系；对可疑烈性呼吸道传染病(如 SARS、炭疽、肺鼠疫等)患者采集标本时,必须按国家规范化要求严格注意生物安全；医生、护士、检验人员均应重视微生物学 检验标本正确采集的有关问题，并有责任 向患者及其家属进行正确采集标本的宣传 和指导。,5.1 微生物学检验标本采集、运送、验收 和处理注意事项,5.1.1 标本采集(1)申请单标记必须清楚(姓名、性别、年 龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集 时间、检查项目、抗生素应用情况等),以 便实验室能够合理选择培养环境和培养基；,(2)尽量在抗生素应用前采集标本，以提 高阳性检出率和避免漏检；(3)标本采集应严格执行无菌操作；(4)咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本，应插入运送培养基送检；(5)痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群 的标本，不可放入肉汤培养基内送检；(6)采集标本的容器必须经灭菌处理，但 不可用消毒剂。,5.1.2 标本运送,(1)标本采集后应尽快送到微生物实验室；(2)标本采集后在室温下超过2h未送达实 验室，可视为不合格标本。,5.1.3 注意事项,(1)微生物检验样本必须按要求采集转运，否则将影响检查结果.并给评价其意义带 来麻烦甚至误导。(2)微生物样本极易被污染，污染的样本 杂菌大量繁殖抑制病原菌生长，条件致病 菌也是致病菌，如污染条件致病菌将误导 临床，造成对患者的损害以及经济和时间 的浪费。,(3)某些标本离体极易死亡，应在床边采 取和接种或立即保温送至实验室检验。室 温放置或延迟送检，可使检出的阳性率降 低；不能使用冷藏的样本检验。(4)厌氧菌样本采取必须隔绝空气，混入 空气的样本影响检验结果，不能使用。,5.2.2 粪便标本采集和处理,(1)采集时间：腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；伤寒患者于发病2w以后采集粪便；怀疑霍乱时立即采集粪便送检。(2)采集方法：自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等 有意义成分，23g或 12 ml,盛无菌容器内或置于保 存液或增茵液内送检；若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水 中(PH8.6)。直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可 采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后 插入肛门约 45cm(幼儿 23cm),轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送 检。,5.2.3 痰及下呼吸道标本采集和处理,(1)自然咳痰法：晨痰为佳；先冷开 水洗漱、清洁口腔和牙齿；再用力咳出 呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；痰 量不得少于1ml;痰咳出困难时可先雾化 吸入 NaCI溶液(100g/L,加温到45)使 痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24 小时痰。,(2)小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起 咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上 即可送检。(3)支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞 灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操 作。气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰 液。气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附 近用导管吸取或活用支气管刷直接取得。,(4)呼吸道标本采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张 大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人 咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次，立即放入 无菌试管中。注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清 水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。,5.2.4 血液及骨髓培养标本,(1)血培养标本采集指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进 行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征：发热(38)或低热(36)寒热 白细胞增多(10109/L,特别是在有“核左移”未成熟 的或带状的白细胞增多时)粒细胞减少(成熟的多核白细胞1109/L)血小板减少 皮肤粘膜出血 昏迷 多器官衰竭,(2)最常用的方法为血液增菌培养法。培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需 要 810ml。儿童瓶为需氧瓶每瓶需血液 13ml,另外，脑脊液和胸腹水也可用血 液增菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，标本量 与血液相同。抗生素治疗前，严格无菌静脉采血 8 10ml(儿童 l4ml);无菌注入专用培养瓶(成人、儿童、需 氧菌、厌氧茵、L型茵需要不同培养瓶)中 送检；,如已用抗生素不能停用时，可于48h内 分别于下次用抗生素之前，采取 3份6瓶血 液标本送检；必要时可需氧菌、厌氧茵(占10%)和 L 型菌同时培养；疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或 动脉采血进行培养；必要时可取骨髓l2 ml,无菌注入专用 培养瓶中送检。,注意事项：血液在正常情况下为无菌标本，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。一 般病人在发病初期 12天或发热高峰时采 集血液标本，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。对亚急性细 菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动 脉采血为宜。,5.2.5 脓汁和病灶分泌物培养,标本采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病 灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌 管内送检。,5.2.6 泌尿生殖道培养标本,(1)尿道分泌物：清洗尿道、采取尿道、溢出的脓性等分泌物,或用无菌拭子插入尿 道 2-4cm处轻轻转动后取出,置无菌试管中 送检。(2)阴道、宫颈分泌物、通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管 1-2cm处 分泌物,置无菌试管中送检。避免阴道分泌 物污染拭子。,(3)宫腔分泌物：在必要时用外套保护膜 的灭菌导管抽取。(4)前列腺液：清洗尿道、冲洗膀胱后用 前列腺按摩法采取前列腺液于无菌容器内 送检。(5)精液:受检者应5天未排精,清洗尿道后 手淫或体外排精法,射精于无菌容器内送检。(6)溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗 患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌 物,置无菌试管中送检。,5.2.7 厌氧菌感染培养标本,(1)标本采集：标本不能被正常菌群污染,采集时尽量避免接触 空气,立即送检,严格遵守无菌操作。血液及其他体液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液等)注入厌氧血培养,立即送检。深部脓肿,在病灶部位开放前取材,可用针管抽 取,针头用无菌胶塞密封,也可用血气采集针抽取,立即送检。抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。,2)标本运送：标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半 小时内)送实验室。运送方法:a.注射器运送(标本抽取后尽快 排除空气)或接种专门的运送培养基中直接 运送；b.含运送培养基的无氧小瓶运送；c.厌氧罐运送(组织块);d.大量液体标本运送 时要装满标本瓶并立即驱氧,加盖运送；e.一般不采用棉拭子法。,(3)建议使用微生物检验组合 微生物检验结果回报时间:细菌学涂片:快速回报标本中可能的病原 微生物；普通细菌培养：(3天)厌氧培养：(7天)真菌培养：(5 天)微生物分子生物学检测：,5.2.8 真菌感染培养标本,(1)浅部真菌感染标本采集 皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损 边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤 溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；指(趾)指甲消毒指(趾)指甲并去掉其表面 部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄 片 56 片置无菌容器内送检；毛发：采集根部断折处，至少56 根送 检。,(2)深部真菌感染标本采集 血液:无菌采血810 ml,注入未用过 抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应 放室温，但不可超过 4h;脑脊液采样量不少于35 ml,分别注入 两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨 汁染色、一管测隐球菌抗原和其他培养);呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本 采集同一般细菌培养标本。,认真学习，相互沟通，搭建检验与临床和 谐、促进、互惠、相互理解的桥梁！!谢谢,