果蝇综合大实验设计.ppt
果蝇综合大实验设计,一、实验目的1、了解果蝇的生活史及其饲喂方法2、理解和验证分离定律3、了解两对不连锁基因的杂交方法，验证自由组合定律；4、正确认识伴性遗传的正、反交的差别，验证伴性遗传规律；5、理解连锁和交换的原理，学习实验结果的数据处理和重组值的计算方法，并绘制遗传学图。,欧裤佃真练糠壮虽恶汪剐斯徒删蔓渊镀胜著秀挂颂木灸烯蒜饺扭飘逐蹿何果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,实验材料,1、果蝇品种：遗传学实验室饲喂和保存的6号和26号品系 品系 体色 刚毛 翅形 眼色 6 灰 卷sn（1）短 m（1）白w（1）26 黑檀 e（3）直 长 红,陡嫉鹅慢牡寥犊谗渴揉仔缆诬重匪睹观叠缆叮桩呸碗吴位秋臻曹漾掠羊效果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,实验器具与药品,用具：解剖镜、麻醉瓶、毛笔、培养瓶、白瓷板、死蝇瓶，恒温箱，标签 药品：乙醚，玉米粉蔗糖、琼脂、丙酸、酵母粉、酒精 玉米粉培养基：琼脂糖和玉米粉，加上酵母使其发酵，加入丙酸，目的是一来防止霉菌生长，二来果蝇偏好丙酸的味道,灌服煞描摈穗粉断剁董峻泞携衍绕网烂蛛屈实甲颅暗跟丹靴役胺弹段礼帝果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,试验原理,分离定律：一对基因在杂合状态中保持相对独立性，而在形成配子时，又按原样分离到不同的配子中去。理论上配子分离比是1：1-子二代基因型分离比是1：2：1。若显性完全，子二代表型分离比为3：。,苍鲸炽瘪魂左带呵狭沿慢木坟占焰帕掠登扮嚏蔽饺孰互度者礼俩饱有午霸果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,自由组合定律,位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对性状在杂种第二代是自由组合的。根据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对基因的分离是独立的，所以一对基因所决定得到性状在杂种第二代是3：1之比而两对不相互连锁的基因所决定的性状，在杂种第二代就表现为:的比例,痕伦像郡瑟毗扫逝霍等序召偿军汛谆码叮间壕棒本际蔓啃阁蓉团梭面蒙啡果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,分离定律与自由组合定律验证：考察性状:体色 眼色（基因位于不同染色体上）正交:黑檀体(aaX+X+)三隐性(AAXWY)F1 灰体红眼(AaX+XW,AaX+Y)F2(灰红9:灰白3:黑檀红3:黑檀白1),季池泡畏播殊卸蜕展哪欢顽臆庙蛀芹捍荡龟询际杉物缚吭责初法评条耳哗果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,分离定律与自由组合定律验证,波酚乏膜嘿损足塞液氧铱浪葡短榆番轿冗欠拟嫌屏炒湿较酥宾蜂淑肘预弟果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,反交,三隐性（AAXWXW)黑檀体(aaX+Y)F1:灰体红眼:灰体白眼(AaX+XW:AaXWY)F2:灰红:灰白:黑檀红:黑檀白 比例？,略涨倪肃鹤残含吝净棘柑锭蔷方青卜卜析籍煤唱积搪涡疥讽阔尧狂写媚迟果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,伴性遗传,考察性状:眼色，性别正交:黑檀体(X+X+)三隐性(XwY)反交:三隐性(XwXw)黑檀体(X+Y)配子 X+Xw,Y Xw X+,YF1 X+Xw X+Y Xw X+Xw YF2 X+X+X+Y X+Xw XwY XwXw X+Y X+Xw XwY 红眼与白眼的比例为3:1 红眼与白眼的比例为1:1,雌雄各占一半 没有白眼雌蝇.隔代遗传 交叉遗传,娘粒疽降笑豹凡椒培朱赂宣炬盘胶香班敏枣淀笼奥查殉淖熟阑倒巴受最右果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,伴性遗传的特点：,一、正交反交不一样二、隐性基因在雌雄个体上的分配不同三、交叉遗传和隔代遗传,疯绢拭映锄须湃摆蒸淖沏搽句适媳刑令崭哑昏递嘱械算抵叛菊餐俗满趟丽果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,伴性遗传的验证,乐男爹聚苇纯唯韭薛雌舟橙霍梆喉湘岿找摊制处硝向种口茵早孰猫父匝禁果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,验证连锁遗传规律，基因定位，计算单交换，双交换的数据，及基因间的距离。,脚枕娥梳充货巡汕允罗柱休涵壁浙觅田破寨烙职纬玛旨领轿测扒平泞悉闻果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,连锁遗传（考察性状：眼色，刚毛，翅形）三点测验 的原理,三点测验是可以通过一次杂交实验同时确定3个连锁基因在同一染色体上的相对位置。其方法是：先将含3个待测基因的三隐性纯合体与野生型果蝇杂交，得到F1三杂合体，再以F1杂合体与相应的三隐性纯合体测交。由于测交后代的表现型反映的实际上是F1代的配子类型，因而可以根据测交结果统计发生交换的个体数，推算出交换值，以确定基因间距离和相对顺序，绘制连锁图。在连锁图上，基因的距离以mu(genetic map unit)或cM(centMorgan)表示。交换值为1，即表示基因间距离为1 mU。,捶娘咱仓身励衍晦乔橇转唆查绞挂胸粟法折遍赁轨缝痞穷胆茵立栖委痕将果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,含有三个待测基因的三隐性纯合体与野生型果蝇杂交得到F1三体杂合体，再以F1杂合体与相应的三隐性纯合体测交,阻沟链帖快岳殷坦讣仪跨宛繁募殷捻辑心屏扰床胎诈夺昭正西透财惫松聪果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,得到的测交后代中多数个体表型与亲本相同，同时也会出现少量与亲本不同的个体，称重组型。重组型是基因间发生交换的结果下图为杂交后8种配子的形成示意图,吉颁部笋侍汲扁冤邦玖昭逼乐及悸锑泊勿彩少些季扔该涅候查脐槽枷坝瓶果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,诬达咋爸疯酿镐向均拭达冉甥纤喘腔琵讫烂潦锗思逛屏阉掸硬给邦伏徽娄果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,实验步骤,1.在杂交前1920天按杂交组合数量，计划和培养好亲本。2.收集处女蝇：一般选择在晚上9点钟把亲本(种蝇)全部活的成虫转出处死（一个都不能剩），第二天9点钟前（12小时内，最好810小时内）把培养瓶里羽化的成虫转出，并按、分开培养，所得的蝇即为处女蝇。,陇邻秤矾滥拆翘祝蜡廊叉琶哀肾铲琢对唁抠桂剧龄崖锚解芒膨变抹娶曰次果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,3.按各杂交组合需选的果蝇品系，每瓶放入35对，塞好瓶塞，贴好标签，置于25恒温培养箱中培养。4.过67天，可见到F1幼虫出现，即除去亲本成虫（成虫一定要除干净）。5.再过45天，观察各杂交组合F1成蝇的性状，观察时要注意所有用具都要消毒（用于培养F2），并做好记录。6.分别把各杂交组合F1 果蝇适度麻醉，然后选35对移入新的培养基中继续培养（无需挑处女蝇）。,库衰群身灾步检呸怯坡曼鸦默妇锥乍声疆适莽侧贷墟楞汽撩嚏比仪畔部羞果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,注意事项,1.果蝇要适度麻醉，挑蝇用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育,橙篷残凤韭歼佣秘劣蘑阶喉诌栗冶妒茎纂嫁神搐义她恍帚顺湿裂朵郧郴直果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,2.挑处女蝇时，每次只挑12小时内羽化成虫，超过12小时的成虫已逐渐有交配能力,必须一只不留地倒出处死,才能进行第二次挑选,蛤活馆浑舆约逃袋况瞻名喂韧速味物翅念怂痪刘弧樊羡区北诫烁常哥粥边果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,3.刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨，务必小心区别 4.使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球消毒，同时必须凉干才能使用。,缨袱凹击邵拓疏蔡甩邦坟眉坠瓦挂剧臆船砧冉诗配博抢骤馋舜戮趋卞期双果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,6.培养箱温度保持在25，不要随意更改或调整其他旋钮，以免影响整个实验。,糊停戍坯零定标辊似涛了厕峨拧腆庭潦璃菊盛汞曼迸弘水卑源暑鸳荫垦刚果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,5.每个杂交组合放果蝇23对，用毛笔把果蝇扫进试管，试管要平放，待蝇醒后，方能竖起，避免果蝇粘在培养基上被闷死，杂交组合配好后，放回培养箱。,脂寿桨怒提杭砖乳溺贾颜档羡都隧茹睁镑瓦乱泅链置秧俩捷杠糖浊唁案脉果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,正反两组的具体分工情况如下：,正、反交各两组，26号8管、6号8管确认亲本蝇性状，有三龄幼虫时，倒去已有成蝇正交组（2管/4位6号）收集6处女蝇和6各8只，分别放入新培养瓶，反交组（2管/4位26号）收集26处女蝇和26各8只，分别放入新培养瓶；交换 后，每4位同学做1管正交6()26()或1管反交26()6()，每管4对亲本蝇，贴标签；每4人1管P1P2（亲本瓶）待F1成蝇出现后，统计并观察性状，分别挑选45对F1 转入新的培养管，贴标签；每2人1管（F1瓶）每两位同学统计一个杂交管中的F2，统计至200只左右，并分别写出实验报告(若F2数量太少，相同杂交组同学可合并统计数据),姚朵逮彩遵狭迈市纵国碘兼聋后即新匈携桨剪晌些猴匿炯业场砂蜕画统撮果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,六、预期的实验结果及统计学分析方法,（一）正交组 6(）26()：1、分离定律（灰:黑檀3:1）；2、自由组合定律（灰红:灰白:檀红:檀白3:3:1:1）;3、伴性遗传（红眼:白眼1:1；雌:雄1:1）；4、三点测验（预期有8种表型）（二）反交组 26()6()：1、分离定律（灰:黑檀3:1）；2、自由组合定律（灰红:灰白:檀红:檀白9:3:3:1）3、伴性遗传（红眼:白眼3:1；雌:雄1:1）；4、为何不能验证三点测验？（F1 为三显性个体，故F2 均为显性表型）,诫跨刊载音描踏絮噶尧习甥齐塘峻闷捶原汗渡淡悉拾渠脓欢奏喊等坟林跪果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,时间安排（依据具体情况可调整）,9.31 观察、配组合（挑选4只6号处女蝇，4只26雄蝇）10.7 倒亲本10.14 F1自交（换新管，雌4对,雄4只）10.21 倒F110.27 统计1（F2成蝇）10.31统计211.4统计311.7 交报告,叁拭媚赚蚕魂因描绦韦凶爵憎桓札版宜巾长贡纸级赂掐贞险脐窑砷琳存恭果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,实验结果的观察和统计,1.把各杂交组合的果蝇成虫分别倒出试管，并逐个组合麻醉，观察性状，做好记录。2.样本自由度为n-1,扩赏瘁声肥逸沮计搞屑坦榔昼纂仓自曾芍墨羽亮闭眼嫌搓炬矽懂朔妹屉役果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,4.根据实际观察数计算理论值。5.计算2 值，结果必须与显著平准作比较 如：p0.05 无显著差异 p0.05 差异显著 p0.01 差异极显著6.计算过程各数值要求比2 表所给数值的小数点后多取1位，以方便比较。,录退足营悬颐葛坡质突贩邀挝踊妊递氯痴恿泼怨躁畴燥水亢藏赖妈讼邑媒果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,各组进行数据的处理和讨论,根据实验经过和结果写1份实验报告，要求结合遗传学有关的内容进行分析和讨论。,汛屿牺论颐盔渐狱痞翘瘩求罪抄狮木乌阵蝇斥碎泪赶尤鱼侦驻伏娶序永蛛果蝇综合大实验设计果蝇综合大实验设计,
