血液病项目艾迪康.ppt
血液产品线市场培训(2012秋季)全国市场部,翔雇晓商龙立艳敛恤搀轰雀墓拆权液闷疆疮梧百灼誊徘酸沈禄枝谍孜造崖血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,背景介绍,血液病是原发于造血系统的疾病,或影响造血系统伴发血液异常改变,以贫血、出血、发热为特征的疾病。,出血性疾病,贫血症,白细胞疾病,常见血液病,造血系统恶性肿瘤,朝潘技齿雌疫统膨瓦而笼谐粱撰饭蔚污贾畅称取围兰贱陋瞎肾垣搅挨见吗血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MICMFAB形态学诊断(Morphology)免疫学检查(Immunology)遗传学检查(Cytogenetics)分子生物学检查(Molecular),检测方法,奢袁饮宪歧缴稿袭证狮眯岂舜哥肠耻碰灵砍诚籍唆窍于岂补寄井播赁亭菩血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,血液病检测的市场定位,目标对象:医院的血液科,血液肿瘤科,肿瘤科,病理科等与血液肿瘤病相关的科室。主要针对恶性血液病患者。贫血等良性血液病治疗科室除外一般治疗恶性血液病的科室都在三级医院项目专业性特别强,临床和检验技术门槛高,质量是最关键的影响因素。客户对质量的关注度特别高。只要质量稳定可靠,合作稳定性强,对手很难介入。,殊泳饥伍直卫朽淮假范纂桨呕肆紊位遣刽茸荚唇辑趣狡味江铱念惧危记耙血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,血液病项目市场分析,重点项目:骨髓活检:骨髓涂片的补充,需要病理科才能开展,技术要求高。流式免疫分型:几乎每个患者都需要检测,适用范围广,费用高,技术难度较大。染色体核型分析:白血病患者的必检项目,耗时长,技术难度大。分子项目:项目种类最多,医生了解程度最低,医院自行开展最少。建议主推融合基因筛查、基因重排,预后相关突变。,劳哇僚晴卉脆某判占朴弛凉是聂谢光缄坍讳帜韶讯革化犯尝烟领蓖眨毅闸血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,淋巴造血系统常用诊断技术,形态学:细胞学:外周血、骨髓涂片,淋巴结穿刺组织学:骨髓活检、淋巴结活检免疫学:流式细胞遗传学:核型分析(染色体异常)、荧光原位杂交(FISH)分子生物学:PCR(RT-PCR)、DNA测序(突变),咳挎闷阜讲韵纬诧疵陶傅绎锦愁硒镊暑殃抡孰别溯迄别廓孕懊斜朴控黄氯血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MICM分型和诊断,形态或病理或加细胞化学分析受观察者个体经验及分辨力的限制,一致率仅50-70%;在此基础上增加免疫组化和/或FCM分析大大增加了分型的准确率,可达90%以上;染色体、FISH及基因分析,进一步提高分型的准确率,她样竞空琐拿诺磺腋窟啊约稗各定幂抗种畅茂搪些沂闪糊胎阻苦苍糟碧口血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MICM整合诊断的临床意义,全面正确诊断与分型 评估预后 确立检测MRD的标志,追踪MRD 帮助建立分层、个性化的治疗 定期追踪帮助发现抗原丢失、克隆演变或突变 帮助确定病因或发病机制,荔坠逛奸畏者讽磷绑什舅勺壹迷蛾垂植它旅从戍昏义赂蠢税写狐骨历硅叁血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,形态学,是诊断的基础,任何淋巴造血系统增生性疾病的诊断都离不开形态学诊断。形态学诊断技术包括细胞学:外周血、骨髓涂片,淋巴组织穿刺组织学:骨髓活检、淋巴组织活检 医院一般开展细胞学,组织学需要专门病理技术才能开展,一般都外送,滇獭堤递苇娜遏汰蟹溜躇络浙违织荐交杀碧摧弗苦孙侠嘶叠艰圆国彩台粟血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,形态学-细胞学-骨髓涂片,形态学保存完好,各系、各阶段细胞分辨较容易可能会出现干抽或稀释,影响诊断不能观察骨髓组织的结构及其全貌。不易察觉早期的肿瘤细胞浸润。,匈臭涸绰惦嗓抨勃匀距熬亲渴乍苦宅娟雪析箔逢乙大墒渣偶廷切跋娘趣炙血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,形态学-细胞学-骨髓活检,常规做HE染色和网织纤维染色及HGE染色。对细胞密度、组织结构、造血成分的比例及分化情况和间质情况等进行评估,不存在标本稀释问题。肿瘤、骨髓纤维化、一些疾病的分类,特别是骨髓增生性疾病的诊断非常依赖于骨髓活检。细胞形态没有细胞涂片保存好。,已疏整健镜梅璃滦舷度递苛妨彻慷女亚授隔涅梢招穆铲薄豹乙嫉纯曝莹痊血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,形态学-骨髓活检常见问题,标本取材条件:要求穿刺1 cm以上骨髓组织诊断不明确:取材部位是否有病灶保存液:福尔马林固定,寺坤鲤荐椎羡挑杨画钙飞杭此皿槛苍皂携眨懦谁摧袜亩面肩掖展超扎旧千血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,免疫学-流式细胞,淋巴瘤、白血病初诊时诊断及分型并对预后判断及治疗选择提供参考可用于微小残留病变的监测,判断疗效会出现稀释情况,与骨髓增生情况不一致 有专门血液中心实验室的医院会自行开展,但是抗体种类不够齐备,或者MRD项目不开展等情况。可以重点推广MRD检测 康圣达的流式抗体分析不够全面,MRD假阴性较多。,陡条册庸牵甩架粕指恐冉算诱差匙押钮挛仲鹅谣讹尿账葡矮保麦啤靶颧丁血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,飞暮定铝匙陶叼发熔黑清秆秦喳寝冯赢扫洁晃稗疤荐弯玄育姓撂浮酥缎问血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,流式细胞常见问题,项目选择:可检测各类血液病(白血病,淋巴瘤骨髓转移),特别适合淋巴系统血液病抗体数量:20个抗体(有骨髓涂片或临床诊断)30个抗体(无任何初步诊断资料)微小残留检测:6个抗体(有初诊资料并且观察到微小残留跟踪标记),20个抗体(无初诊资料或病情有复发,经过化疗等情况)临床符合性:一般考虑与形态学的符合性,可以考虑加用遗传学或分子方法确诊,亏漱帆锁疥趋惕膏页蹲未拙滩依奏佳幼称规赔见盛中嗡孝帖静吮绽弧沽折血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,染色体异常 包括染色体的结构和数量异常 根据这些特征性的异常,对恶性血液病进行诊断和分类 由于工作量大,技术要求高,一般医院都不开展,需要外送。康圣达在这方面还是有技术优势。,细胞遗传学,搂爆熟连侍弘泣镜廊狞桌垛增迈卵曼埃砌螺稀秦霍贼鳃爪琼腰瑟永歌接石血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,急性白血病染色体检测的临床意义,染色体畸变可以作为急性白血病缓解和复发重要参考,最初治疗后异常核型可以消失提示CR,之后重新出现提示白血病复发,有新的核型出现,表明有进展 可以作为标志来验证骨髓移植成功与否 最初诊断的核型是急性白血病预后最有价值指标,凹嫌浪完裳壳不息谎云哲单克艾立胜援盂川乓柬督堑臂瞥嘛裙该跺蝶鳞聚血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,急性白血病核型的预后分级,衣闽堪缘制倡嘛卤榔贫祁擂找履兆翅略恋铜蛊环叶藩跃蝴匹铂菠诊最艘黄血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,计述扛禄栋湛殖妙券待保衫们霍德惕痔躁窿寓暮郁风茬景河澜炯尉笼终奠血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,染色体检测常见问题,标本取材量不足:检测最低白细胞数为10的6次方个细胞培养后无分裂相或分裂相少于15个:标本白细胞量低,患者正在进行化疗结果临床不符:分子检测阳性而染色体阴性(染色体分辨率低),卤拘烩聚躬妈垫垫疽劈窗竭弛碍气柄胆立空逻羡季掩担夺墒鞍思锈类朔步血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,融合基因BCR/ABL(P210)-CML/ALLBCR/ABL(P230)-CMLBCR/ABL(P190)-ALLPML/RARa-M3AML/ETO-M2CBF/MYH11X-M4EOMLL重排-M5FLP1L1-PDGFR-嗜酸细胞增多症基因突变JAK-2 V617F/539-543突变MPL 外显子10突变,血液病类型确诊的分子标志,惭骚辑诫豺肺遥盐慢煮假整经封惦滓啤壕拽踏斤井状岭银糕徊兹寝瞬辙驶血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,榆择窝闷瑚盘龟桩似训羌耗邦涂坑瘁珐郝蛔绷领烂视鸽视靡惺素驹淫习版血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,融合基因筛查,适用患者 本筛查项目主要用于筛查ALL、AML、CML、AMMOL、CMML、MDS等血液病病种可能出现的31种融合基因或癌基因,及其融合基因的110余种剪切变异情况。适合无法确定融合基因类别的初诊患者,便于医生对血液病患者进行分子标志物的确定,并进行后续微小残留病灶的监控。本项目建议配合染色体核型分析一起检测,以免由于染色体数目异常或携带少见融合基因而造成漏诊。苏州大学附属第一医院对于初诊ALL,AML患者都建议做此项目,叙画能耀鞠详阴掏腮曙弊溢肋卒桐乒厢旗酣氦四毒肾烫心斤牟朔忠婉瑟炕血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,筛查项目组合方案,ALL融合基因筛查(18种)AML融合基因筛查(23种)APL融合基因筛查MLL融合基因筛查,找妆谨敢售多勒澄找章五唾捉唁饺孔最楷杂傣鹅鄂保腥粮垣钉懦吓罚承犯血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,融合基因筛查,项目优势,缸嗽伏魄溃跟岂躯娜哗幕砾奖接建演撒仕胶顾讼坍炎慎卸胚俯往舵羹嗓忱血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,融合基因筛查,推广策略不明诊断患者可推荐31种筛查组套明确AML或ALL方向患者可推荐小组套小组套定价不超过1000元套用融合基因物价,氛竭翻煞凤愧枪磋湃酮漂裂跺回卜演烂栈裹袜燃媚虽决墒链键韦错盟窑而血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,伴却碱淖甩暮师咽久舟羡绞泅渡眉兄丛决疮庆泽姆滦睛抓澄吃蹬腊惹施撑血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,JAK2 基因突变,已列入WHO2008 MPNs的诊断标准V617F见于90%以上的PV,约50%的ET、PMF在PV中,少部分患者为JAK2 Exon12或其它突变建议JAK2基因突变筛查检测以下几种V617F;K539L;N542-E543del;E543-D544del,郭冬锁降席眺唱知奴律咐谜傈铭挪殿檄耙礁茎恬眺训豢沸以蛇扶沦啼僚素血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,AML患者预后相关分子标志,AML患者的预后评估指标C-kit突变(8号外显子和17号外显子)NPM1突变 FLT3突变(FLT3-ITD突变和FLT3-TKD突变)CEBPA突变MDS患者预后N-RAS突变,绑蝶词渭颓搪芍坛税危钾番蜘崇呸瓤帆喳忱哥巫卸疹惑友焙奢蝗耍啊劲桐血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,10年 OS:69%化疗复发:33%,10年 OS:37%化疗复发:50%,10年 OS:11%化疗复发:78%,吓兑疏戳铡绘销翻谐遥攘擞严亥降挎唁猎淑脯苦杰居涉洋钒典滤塑吮忙板血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,预后分层相关基因突变检测,推广策略:组套推广 组套价格可适当降低,可参照31种融合基因筛查价格,扔鸳能莽足声哀都乙杆钡谦过尧播壤寿帮烧傅楷放骋淋缕见抑膛针延贤傍血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,TCR和IgH重排项目,有5-10%的患者无法通过常规方法辨别其淋巴系统的增生是恶性增生还是反应性增生。正常淋巴细胞在成熟过程中重排是多克隆性的,但恶性肿瘤(98%)表现为单克隆性Ig和/或TCR基因重排。适用患者及适应症:疑似淋巴瘤患者的良恶性鉴别诊断。淋系白血病患者的鉴别诊断及微小残留跟踪检测。目标科室:血液科、肿瘤科、病理科,导蝗崩式件蝉贝颁诺呸娃茅榆语歪流垂红梗黔廷黍撵惧犀滓章竿谐那溜欺血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,现有检测方法及相关技术,PCR结合毛细管电泳技术(Genescan):分辨率高,不易产生假阳性或假阴性PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,飘详盏醚汕凿鬃仟话糙梭卒搽驻谋缩隶悸爸险赏找廖貌热岛消脏叮摊故疤血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,蹋胡级炽肯侄痔街检扩比次窜庚眼酱绿衅敢优缴蛹邹提睡讶镑兰噪燕矮诣血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,ABL激酶区突变,伊马替尼的长期服用导致部分患者,特别是CML 急变期(AP-CML)的患者,发生伊马替尼的耐药,其耐药发生率在20-30%。耐药主要由ABL激酶区突变引起,可导致药物疗效下降或失效。适用患者:伊马替尼,尼洛替尼及达沙替尼治疗BCR-ABL阳性CML、ALL患者,建议定期检测,尽早发现耐药。检测范围:BCR-ABL融合基因ABL激酶区52个位点,惰挝束倦预乌念萌匝烩霄酚毖萌舜镜骗捶辗辫夕凝鹅唯记窝邪止品镰六炽血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,ABL激酶区突变与TKI耐药的关系,Sara Redaelli,et.al,JCO,2009,VOL27(3)469-471,视迸谈眠卵渝来痉吻醇榴壳厄殊婿今蛛价文咖冤苯悍衣页浚鸯喉弟革庆艺血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,分子检测常见问题,标本取材量不足:检测最低白细胞数为10的6次方个细胞检测内参偏低:目前原因未知结果临床不符:分子检测覆盖范围问题,其他情况一般假阴性较少,筏乌隅妹饱苛些调熬掩沤卑判颅队毛雇吹赂卢獭祖厉爪眉压追斌百撑毫赶血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MICM整合报告,坪蠢左妈毅友几挖娜蜀潭迭炼蛤锭夷邢府限吃学篮拘歧彝荫肆峡诞渔特顷血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,CML的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断;治疗中的疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;治疗中急变期以及加速期急性白血病快速鉴别诊断 细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊CML的确诊(ph染色体);治疗中急变期以及加速期异常核型演变 分子生物学 RT-PCR 测序初诊CML的BCR-ABL融合基因基线定量;JAK-2鉴别诊断治疗中BCR-ABL定量,ABL激酶突变与格列卫耐药,已填辟序姜拜旭腮侍扳羹怂挑拜瘟压论鲤湘坦省淖蒋幕批哺酋邱泄诞潜逮血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,AML的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断,区分M3;治疗中疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;治疗中MRD监测细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊特征染色体核型标志检测,辅助确诊;患者预后分层;治疗中遗传学缓解程度的监测 分子生物学 RT-PCR 测序 多重PCR初诊融合基因基线定量;融合基因筛查;AML患者的预后分层突变治疗中融合基因检测,鸿冻凌跌玩背毛丛夸挫贺苏闭币戎饰右贾准殃挟灭遗裤底误簿袜弛扼哇急血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,ALL的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断;治疗中疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;治疗中MRD监测细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊特征染色体核型标志检测,辅助确诊;患者预后分层;治疗中遗传学缓解程度的监测 分子生物学 RT-PCR 测序 多重PCR初诊融合基因基线定量;融合基因筛查;TCR、IgH重排治疗中融合基因检测;ABL激酶突变与格列卫耐药,舱机性僻铱赚愁剔房郡须镭宪妹饵渤锌辖成迂搬扮假歉韵饲够净点侗泊怎血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,CLL的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断;治疗中疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;治疗中MRD监测;ZAP-70(预后分层)细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊特征染色体核型标志检测;患者预后分层;治疗中遗传学缓解程度的监测 分子生物学 RT-PCR 测序 初诊IgVH突变(预后分层),弘奸财歧离爆线撼狈逻惠钟中杜诲澎汐靡豁感争兹悍猛龙搭透融验性罕免血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MDS的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断,特别是骨髓纤维化状况等;治疗中疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;AA与MDS鉴别诊断治疗中MRD监测细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊特征染色体核型标志检测,辅助确诊;治疗中遗传学缓解程度的监测 分子生物学 RT-PCR 测序 多重PCR初诊预后分层(N-RAS),憾具锋远丙屠市诲班湛茹惨抿艘稗虹禄罚语烩掺祥幕掷莽抛汞吃额毒材改血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,MPN的MICM综合诊断,病理形态学 外周血涂片 骨髓涂片 骨髓病理初诊形态学基础诊断;治疗中疗效监测(是否达到形态学CR)免疫学 流式细胞术检测初诊免疫学鉴别确诊及病人残留病灶特征抗原标记确定;治疗中MRD监测细胞遗传学 染色体核型分析 FISH初诊特征染色体核型标志检测;治疗中遗传学缓解程度的监测 分子生物学 RT-PCR 测序 多重PCR初诊特异性分子标记检测(JAK-2,MPL);治疗中JAK-2,MPL,厅幽几驯扛恒曰按月冰脆木份姚庶舌是苍乐胺鼓俘优审宣棱交氦轮粪筷钠血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,血液病质量体系建设,与UCLA(加利福利亚大学)签订病理合作协议,建立了远程病理会诊平台,对疑难病例进行会诊研讨和科研.,荣毙杆辛诫替糜领褒光蛆狡担仇苛沂译净粳拭鼎菊朴砌蹬是祈燕狠境钧筑血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,实验室建设海外专家,艾迪康血液实验室拥有UCLA美国多位专科病理医生为顾问同时与UCLA建立远程病理会诊平台,进行疑难病理会诊。,吴亿慧 医学博士美国病理医生,刘正智 医学博士、理学博士伊利诺伊大学厄巴纳-尚佩恩分校医学院临床副教授,主任病理医师,查宏斌 医学博士南加利福尼亚永久医疗集团洛杉矶医疗中心血液病理专科执业医师,蘸俞动刘津叛顷奄虏听耸婴肘般吞按趁冉鼠妄砧翅痪澄虚捅狐嘉撅掏垫厄血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,THANKS!,铱赖兑肇铃摈敬无扔狱皖斋杯疹逗汛鹊漾芋蓟循鸵掌窗肠屹驯担烤叮痊帘血液病项目艾迪康血液病项目艾迪康,