实验细菌分离培养与培养性状观察.ppt

实验 细菌分离培养与培养性状观察,一、目的要求,从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法成为分离；,纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由 一个细菌分裂、繁殖而产生的后代；,分离培养的目的在于从被检材料中、或者从污染的众 多杂菌中分离出纯的病原菌。,一、目的要求,被检材料或病料,分离,单个菌落,纯培养物,纯培养,移植培养,。,一、目的要求,1、掌握细菌（需氧菌、厌氧菌）分离培养的基本要领2、掌握钓菌、纯培养及移植技术3、了解细菌在固体、液体培养基中的生长表现4、了解培养性状对细菌鉴别的重要意义,接种工具,接种针和接种环：由三部分组组成，即环（针）、金属柄和绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种针用于穿刺接种细菌，接种环用于固体、液体培养基的细菌接种。,接种环境,VS-1300-U型洁净工作台,接种的基本程序,灭菌接种环,沾取标本,接种,灭菌接种环,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本,杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境,一、目的要求,（一）常用的细菌培养方法,1、需氧菌分离培养法,（1）平板划线分离法,目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得 纯菌。,一、目的要求,一、常用的细菌培养方法,1、需氧菌分离培养法,（1）平板划线分离法,方法：,分区划线法：适用于含菌量较多的标本。,连续划线法：适用于含菌量较少的标本。,一、目的要求,1、常用的细菌培养方法,（1）需氧菌分离培养法,1.平板划线分离法,方法：,分区划线法：适用于含菌量较多的标本。,分区划线法,第一区划线,灭菌接种环,第二区划线,灭菌接种环,第三区划线,灭菌接种环,连续划线法,一、目的要求,（一）常用的细菌培养方法,2、厌氧菌分离培养法,（1）肝片肉汤培养法（2）焦性没食子酸法,一、目的要求,（一）常用的细菌培养方法,3、兼性厌氧菌分离培养法,一、目的要求,（二）钓菌、纯培养及细菌移植技术,细菌移植,斜面培养基接种法：用于培养，保存菌种及其它实验用。,液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面生长，沉淀生长，均匀混浊生长等。,二、材料,1.器材：接种环、酒精灯、打火机。2.培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培养液，试管斜面培养基。3.菌种：大肠杆菌、未知混合菌种各1支。,一、目的要求,（三）细菌在培养基上的生长表现,1、细菌在固体培养基中的生长现象,菌落定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。,菌落与菌苔,菌落,菌苔,一、目的要求,（三）细菌在培养基上的生长表现,2、细菌在液体培养基中的生长现象,混浊沉淀：多见于链状排列的细菌。菌膜：多见于厌氧菌。,菌膜,菌沉淀,均匀浑浊,对照,一、目的要求,（三）细菌在培养基上的生长表现,3、细菌在半固体培养基中的生长现象,有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。,有动力 现象,无动力 现象,思 考？,1、细菌分离培养的目的是什么？何谓纯培养？2、培养皿培养时为什么要倒置？3、分别描述大肠杆菌、混合菌种在液体培养基、固体培养基中的生长表现。,谢谢！,