医学微生物学实验三胡.ppt
医学微生物学实验三,南华大学病原学实验中心微生物学与免疫学教研室,1、细菌的人工培养（讲授）2、细菌的培养方法：固体培养基接种法（自做）；半固体、液体培养基接种法（示教）3、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）4、细菌的形态观察 自阅片：甲型链球菌、结核杆菌 示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌,实验内容,第四节 细菌的人工培养 p31,一、培养基（culture medium）：是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。,常用培养基的种类 按营养组成和用途分,厌氧培养基,基础培养基,增菌培养基,选择培养基,鉴别培养基,二、细菌在培养基中的生长情况 据物理状态分1、液体培养基：均匀混浊、沉淀生长、表面生长（菌膜）；多用于增菌,均匀混浊,对照,沉淀生长,2、固体培养基：含1.5%琼脂 用于分离培养菌落：单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见 的细菌集团。纯培养：挑取一个菌落，移种到另一培养 基中，生长出来的细菌均为纯 种，称为纯培养。菌落特征大小、形状、颜色、气味、透明度、光滑或粗糙、湿润或干燥、隆起或扁平、边缘整齐与否、是否溶血等有助于细菌鉴定,菌落（S型）,菌苔,菌落（R型）,光滑型(S型)粗造型(R型)粘液型(M型),3、半固体培养基：含0.3%0.5%琼脂 鞭毛菌混浊生长（沿穿刺线呈云雾状/羽毛状）无鞭毛菌沿穿刺线呈线状生长 用于检测细菌的动力和保存菌种,斜面划线示意图,4、斜面培养基接种法,应用：短期保存菌种,三、人工培养细菌的用途,在医学中的应用 1.感染性疾病的病原学诊断：明确病因，指导用药 2.细菌学的研究：细菌遗传、变异、耐药性 3.生物制品的制备：疫苗、类毒素、抗毒素在工农业生产中的应用（抗生素、维生素、酶制剂等）在基因工程中的应用（基因工程菌乙肝疫苗）,进入实验内容讲授,1、固体培养基(平板)接种法,分区划线法,原划线,标本：混合菌液分组：1人一个固体平板,连续划线法,菌落示意图,细菌在固体培养基中的生长现象,细菌在固体培养基中的生长现象,菌 落 菌落特征：大小、形状、颜色、气味、透明度、表面光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否、溶血性等。菌落类型：S型、R型、M型菌落。菌 苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。,菌落（S型）,菌苔,菌落（R型）,光滑型(S型)粗造型(R型)粘液型(M型),注意事项,1、无菌操作2、密而不重叠3、勿划破琼脂4、做好标记，第二天观察结果,2、葡萄球菌培养（示教）,营养要求不高，普通培养基生长良好,菌 落：S型菌落，金黄色、表皮、腐生葡萄球菌各自形成金黄色、白色、柠檬色-脂溶性色素,血平板：,金黄色葡萄球菌形成的-溶血环,金黄色色素,白色色素,3、链球菌培养（示教）,血平板上的菌落：甲型溶血性链球菌形成草绿色溶血现象，乙型溶血性链球菌形成透明的完全溶血现象，丙型链球菌无溶血现象。,甲链溶血草绿色溶血,乙链溶血,丙链不溶血,4、常见致病菌的形态与染色性,甲型溶血性链球菌,取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,自阅片之一,结核分枝杆菌,取材：痰涂片染色法：抗酸染色放大倍数：10X100,自阅片之二,菌体染成红色，细长略微弯曲杆菌，单个或分枝状排列；（非抗酸菌及细胞染成蓝色）,淋病奈瑟菌,示教片之一,取材：泌尿道脓性分泌物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,淋病奈瑟菌,中性粒细胞分叶核,淋球菌染成红色/G-，肾形或豆形，成双排列,肉毒梭菌,示教片之二,取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,G+粗短杆菌，芽胞呈椭圆形，比菌体粗，次极端，细菌呈汤匙状或网球拍状,产气荚膜梭菌,示教片之三,取材：小鼠腹腔渗出液染色法：革兰染色放大倍数：10X100,G+粗大杆菌，两端几乎平切，在被感染得人或动物体内形成明显的荚膜,炭疽杆菌,示教片之四,取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,G+粗大杆菌，有氧条件下形成椭圆形芽胞，位于菌体中央,白喉棒状杆菌,取材：纯培养物染色法：美蓝染色放大倍数：10X100,取材：纯培养物染色法：Neisser染色放大倍数：10X100,示教片之五,菌体细长弯曲的杆菌，粗细不一，常一端或两端膨大呈棒状；排列不规则，呈栅栏状、V字形或L字形。异染颗粒,1、细菌的人工培养（讲授）2、细菌的培养方法：固体培养基接种法（自做）；半固体、液体培养基接种法（示教）3、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）4、细菌的形态观察 自阅片：甲型链球菌、结核杆菌 示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌第2页：实验名称：细菌平板划线分离法（记录实验结果绘一简图并描述平板上的菌落特征）第3页：实验名称：细菌的形态观察（绘图）甲型链球菌、结核杆菌、淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌,实验内容,第1页：实验名称：细菌培养及形态观察,甲型溶血性链球菌取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,结核分枝杆菌取材：痰涂片染色法：抗酸染色放大倍数：10X100,淋病奈瑟菌取材：泌尿道脓性分泌物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,肉毒梭菌取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,产气荚膜梭菌取材：小鼠腹腔渗出液染色法：革兰染色放大倍数：10X100,炭疽杆菌取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,白喉棒状杆菌取材：纯培养物染色法：Neisser染色放大倍数：10X100,
