体液中的电解质.ppt
体液中的电解质,概论,体液中的离子称为电解质，它们都有维持渗透压，调节酸碱平衡的作用，包括阳离子，如钾、钠、钙、镁，主要阴离子有氯离子、碳酸氢根离子、磷酸根离子、硫酸根离子，除了这两种离子，还有一种是有机离子如乳酸和蛋白质。体液中电解质分布见表1,血浆中的主要电解质有Na+、k+、Cl，细胞间液通过细胞膜的过滤，电解质成分与血浆类似，不同的是血浆的蛋白质多，细胞间液蛋白质少。细胞外液主要是Na+、Cl，k+主要分布于细胞内液。按照 Donnan 平衡学说，提液中德阳离子与阴离子的总数相等，并保持平衡的电中性。体液中的电解质在体内不停地交换，交换的力量是渗透压，他们的交换依靠体液调节和神经调节。钙、磷、镁是人体重要的组成物质，它们的浓度依赖肠道的吸收、骨质的沉积和吸收、肾脏排泌所调节。雪浆中钙、磷浓度(mg/dl)的乘积在3640之间。见表2,表2、血浆中钙、磷、镁在体内的分布,几个相关的概念：,1.AG(anion gap,阴离子间隙，指细胞外液的阳离子总数和阴离子总数的差值。AG=Na+k+-(Cl+HCO3)。AG对于酸碱平衡的判断有非常重要的作用：AG升高一定是代酸，但代酸不一定是AG升高。2.渗透压：溶液的渗透压与电荷或非电荷的颗粒树相关。渗透压计算公式：mOsm/kg=1.86(Na+mmol/L)+葡萄糖mmol/L+尿素mmol/L+9。,第一节、K+Na+测定,方法（一）离子选择电极法（ion-selective electrode,ISE）1.原理：离子选择电极法(ISE)是以测定电池的电位为基础的定量分析方法，其检测原理是检测电极表面电位的改变，比较测定电极与参比电极表面电位变化的差值大小来估计样本中钠、钾离子浓度。,Na+测定：含玻璃膜的钠电极是由对Na+具有选择性响应的特殊玻璃毛细管组成(硅酸锂铝玻璃电极)，钠电极与参比电极之间的电位差随样本溶液中Na+活度的变化而改变。K+测定：含液态离子交换膜的钾电极是对K+具有选择性响应的缬氨霉素液膜电极，此敏感膜的一侧与电极电解液接触，另一面与样本液接触，膜电位的变化与样本中K+活度的对数成正比。,2.分类：ISE分为直接法和间接法两类直接电位法是指样本(血清、血浆、全血)或校准液不经稀释直接进入ISE管道接触电极作电位分析，测量的是血清水相中离子的活度。与样本中脂类、蛋白质所占据的体积无关，即不受高蛋白血症和脂血症等情况的影响间接电位法是指样本(血清、血浆)和校准液要用指定离子强度与pH的稀释液稀释后再送入电极管道测量其电位。该方法会受到样本中脂类和蛋白质占据体积的影响。一般ISE的测定均在仪器上操作：,3.基本操作：1）仪器管道清洗2）两点定标3）标本测定4）测定完毕，清洗管道，再关机。,（二）火焰光度法1.原理：发射光谱分析，测定发射光的强度，样品中的钾钠原子吸收热能处于激发态，发射特定的波长，迅速回到基态。2.仪器组成：1）雾化燃烧部分：将稀释后样本雾化后与压缩空气混合到达燃烧器。）燃烧部分：燃烧后的火焰经反光镜和聚光镜使发射光成一平行线，通过干涉滤光片，到达光电管。3）光度计：读出光强度。,（三）酶法 1.原理：酶法测定Na+：是在Na+离子存在下-半乳糖苷酶水解邻-硝基酚-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)，在420nm波长可测定产物邻-硝基酚(发色团)颜色产生的速率 酶法测定K+：采用掩蔽剂掩蔽Na+，使K+Na+选择性提高至6001，用谷氨酸脱氢酶消除内源性NH4+的正干扰，利用K+对丙酮酸激酶的激活作用来测定K+的浓度,参考范围：血清钠：135145 mmol/L血清钾：3.65.1 mmol/L临床意义：血钠降低 低钠血症指血清钠135mmol/L，可由钠减少或水增多引起（1）消耗性低钠血症胃肠道失钠创口大量失钠皮肤失钠尿钠排出增多,（2）稀释性低钠血症 因肾病综合征、肝硬化腹水、右心衰竭等引起抗利尿激素增多，导致血钠被稀释 血钠增高 高血钠症(145mmol/)较为少见可因摄入钠过多或水丢失过多而引起。临床上可见于肾上腺皮质功能亢进，严重高渗性脱水，中枢性尿崩症时尿量大而供水不足时。血钾降低：血清钾3.5mmol/L时称为低钾血症,引起低钾血症的常见原因（1）钾摄入不足（2）钾排出增多（3）细胞外钾进入细胞内（4）血浆稀释血钾增高 血清钾5.5mmol/L时称为高钾血症。引起高血钾症的常见原因（1）钾输入过多（2）排泄障碍（3）细胞内钾向细胞外转移,血清氯化物的测定方法简介：汞滴定法、分光光度法、库仑电量分析法及最常用的ISE法。1.汞滴定法：最早测定Cl 的方法之一 2.分光光度法：硫氰酸汞法既可手工操作，又可作自动化分析，特异性高，准确度和精密度良好，是临床使用的常用方法 库仑电量分析法。3.离子选择电极法：简便、快速、准确、精密，目前测定Cl最好，最多的方法。氯电极是由氯化银、氯化铁-硫化汞为膜性材料制成的固体膜电极，对样本中的Cl有特殊响应。Cl电极总是与Na+、K+电极配套使用，氯测定所需的试剂和定标液也是与钾、钠电极应用的缓冲液和校准液组合在一起。,1.汞滴定法：用标准硝酸汞溶液滴定血清或尿液中的Cl-，Cl-与Hg2+结合生成可溶性但不解离的氯化汞，当滴定到达终点时，标本中全部Cl-与Hg2+结合，过量的Hg2+与指示剂二苯卡巴腙作用生成紫红色络合物。根据硝酸汞的消耗量可以计算出氯化物的浓度。2.分光光度法利用硫氰酸汞与标本中氯离子作用，生成不易解离的氯化汞和与Cl-等当量的硫氰酸根（SCN-），SCN-与试剂Fe3+反应生成橙红色的硫氰酸铁，在460nm波长处比色，可定量测出标品中的Cl-的量。,3.电量分析法 将标本中放置银电极，在不断搅拌的条件下导入恒定电流，银电极在电压作用下不断产生银离子释放入标本溶液中，并与Cl-结合生成不溶性的AgCl沉淀。当Cl-全部与Ag+结合完毕，溶液中就会有游离Ag+出现，使溶液电导明显增加，仪器的传感器和计时器立即切断电流并计算消耗Cl-所需时间。通过测定标本中消耗Cl-所需时间，并与标准液所需时间进行比较，可换算出标本中Cl-的浓度，用mmol/L表示。,4.离子选择电极法 ISE法是目前测定Cl-的最好方法。氯电极常用氯化银或硫化银等物质作为膜性材料制成固态膜电极，与参比电极组合在一起形成复合电极，并与Na+、K+电极组装在同一台仪器上，使用较方便，在临床上得到了广泛使用参考范围96108 mmol/L。,临床意义血清(浆)氯化物减低：常见原因有氯化钠的异常丢失或摄入减少。1）胃肠道丢失（2）长期限制氯化钠的摄入（3）代谢性碱中毒（4）艾迪生病血清(浆)氯化物增高1）高氯血症性代谢性酸中毒（2）氯化物摄入过多（3）临床上高氯血症还常见于高钠血症,第二节、血清钙、磷、镁的测定血清钙的测定总钙测定 滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法、酶法、邻甲酚酞络合酮法（o-CPC）邻甲酚酞络合酮法（o-CPC）：o-CPC是一种金属络合染料，也是酸碱指示剂。在碱性条件下可与钙螯合生成紫红色螯合物，与同样处理的钙标准液比色，可求得血清钙的含量。参考范围：2.12.7mmol/L参考范围 2.12.7mmol/L离子钙的测定离子选择性电极法为主。参考范围 1.151.42mmol/L,血清磷的测定人体内的磷元素尚不能直接测定。在临床化学实验室进行的无机磷测定实际上只是直接分析磷酸盐阴离子（H2PO4-，HPO42-）。方法：1.磷钼酸还原法 标本中的磷酸盐与钼酸生成无色的磷钼酸，用还原剂将磷钼酸还原成蓝色复合杂聚物钼蓝，620nm进行比色分析。临床实验室较多采用。,2.磷钼酸非还原法 血清中无机磷在酸性溶液中与钼酸铵作用形成的磷钼酸铵杂聚化合物，在340nm或325nm波长的吸光度值与无机磷含量成正比，与标准品比较可计算出标本无机磷含量。适用于微量无机磷的测定。3.酶法 嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）和黄嘌呤氧化酶（XOD）偶联并以过氧化物酶（POD）为指示剂的方法，可用于常规标本的自动分析 参考范围：0.61.6mmol/L,血清镁的测定原子吸收分光光度法 甲基麝香草酚蓝比色法：金属络合指示法 Calmagite比色法（钙镁试剂法）达旦黄比色法：染料结合法 尿液离子的测定方法与上述方法类同，但一般为24小时为多。脑脊液氯离子测定也与上述方法一样。,离子测定的质量控制,质量控制（quality contral,QC）是贯穿检验操作的全过程，包括分析前、分析中、分析后三个环节。分析前主要包括：人员培训、实验室配置、仪器的质量保证、检测方法的评价、试剂和仪器的选择与评价、标本的准备。分析中包括建立项目操作程序、室内质量控制和结果分析。分析后包括报告结果、室内质量控制的数据管理、参加室间质量评价、投诉的处理。,一、室内质量控制,室内质量控制（Internal quality control,IQC）:主要是控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作的天内和天间标本的检测的一致性。1.控制物的种类：液体血清、冻干血清。2.质量控制的主要方法：常用均植标准差方法（XSD）：A.具体方法：浓度未定的血清，在天内、天间反复测定20次，求出均值（X），标准差（SD）和变异系数（CV），绘制质量控制图，得均值线（X）、警告线（X2SD）、失控线（X3SD）。,B.结果分析：I.95%数据落在X2SD内；不能连续5次在均值的一侧；不能有5次结果逐渐升高或降低；不能2点落在X2SD之外；不能有落在X3SD之外的数据II漂移提示系统误差；趋势变化说明试剂或仪器性能变化；精度变化提示测定偶然误差较大。C处理；回顾检查结果，分析出错原因，找到纠正措施，填写失控报告，存档。,Westgard多规则质量控制法A.两份质量控制血清，最好是一份为高值，一份低值，在同一质量控制图上，分别绘制质量控制图，一份处于2S3S界限时，采用其余规则对质量控制图检查，若符合其中一条，判为“失控”。B.规则：12S，即有一控制血清在2S3S间为警告；13S，有一控制血清超3S，为失控；22S，同一质量控制品连续两次超2S，或两质控同超2S，为失控，多系统误差；R4S，同批中一抄+2S，一超-2S，为失控，随机误差；41S，一质量控制连续4次抄+1S或-1S，或2份质量控制连续2次超+1S或-1S，失控，系统误差；10X，一份质量控制连续10次在均值一侧，或两份结果同时连续5次在一侧。为失控，系统误差。,二、室间质量评价,室间质量评价（External quality assessment,EQA）,通过各实验室间的比对，观察结果的准确性。条件：有素质高的人员；有室内质量控制；有良好的质量控制血清；有参考实验室定值；统一质量控制血清。方法：1.计算均值与离散度，1S满意，2S警戒，3S逾界。,二、室间质量评价,2.计算变异指数得分（variance index score,VIS）:V=X-X/X 100VI=V/CCV 100 CCV为选定的变异系数（WHO规定）。VIS400时，VIS=VI；VIS400时，VIS=400。3.我国VIS80 为优良，150为及格，一般VIS200，表明结果中有临床上不允许的结果，VIS400，会有临床上严重失误，是不被许可的。,Thank you!,
