体外受精和早期胚胎培养(公开课).ppt

体外受精和早期胚胎培养,第二节体外受精和早 期胚胎培养,榜山中学 杨美山,1988年3月10日我国首例试管婴儿“神州试管婴儿之母”张丽珠教授和我国大陆首例试管婴儿郑萌珠,试管婴儿,1978年7月26日，世界首例试管婴儿“路易斯布朗”在英国诞生，现已成为母亲。,根据资料回答下列问题：1.资料上用到了什么生物技术？试管婴儿技术（包括体外受精、胚胎体外培养）和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕，生产的过程有何异同？相同之处：都通过有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处：受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,存在困难：1、引进一头良种成年奶牛需要3万5万元。2、牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生 只能生育四五次。（牛的妊娠期约280天）,讨论1：是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖？为什么？,牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了（精子数:50亿/mL),理论基础：,讨论2：如何让引进的良种牛快速大量的繁殖？,试管动物技术,是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。,快速繁殖动物优良品种,目的：,技术手段：,体外受精和早期胚胎培养,试管动物技术的三个基本操作环节：,第一步：体外受精,第二步：胚胎的早期培养,第三步：胚胎移植,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,幼体,新个体,哺乳动物个体发育过程,试管 动物,思考：子代数目的多少取决于精子数还是卵子数？,方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,方法2-1：从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞,借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,方法2-2：从活体卵巢中采集卵母细胞,比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？,比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？,2.精子的收集和获能,1)收集的方法:假阴道法,手握法和电刺激等2)获能处理:培养法：把精子放入获能液中。（啮齿动物、家兔和猪）化学法：把精子放入一定浓度肝素等溶液中。（牛、羊）,3.受精,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程,离心的目的是什么？,卵母细胞的培养的目的是什么？,CO2培养箱,二、胚胎的早期培养,复习：动物细胞培养的条件是什么？,二、胚胎的早期培养,发育培养液成分:,水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.,牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚试管婴儿：8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植。注意：不同动物胚胎移植的时间不同,为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞，不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉，还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看这个想法可行吗？,奇思妙想,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,保存剩余的卵子和精子的方法是什么？,试管动物 与 克隆动物相比生殖方式：技术手段：遗传规律：,有性生殖 无性生殖,核移植技术、胚胎移植,遵循 无,体外受精胚胎移植,胚胎移植,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,1 哺乳动物的体外受精主要包括_，_和_等主要步骤。,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,2 收集精子的方法_：_：_：,假阴道法,手握法,电刺激法,3 对家畜进行卵母细胞采集时，可用()处理促性腺激素 B.促性腺激素释放激素 C.肝素 D.性激素,4 从活体动物的卵巢中直接采卵时，不正确的方法是超声波探测仪 B.内窥镜 C.腹腔镜 D.阴道镜,5 体外受精的场所A.在水溶液中 B.在盐溶液中C.在获能溶液或专用的受精溶液中 D.在酒精溶液中,3.2 体外受精和早期胚胎培养,一、从试管牛说起二、体外受精 1.卵母细胞的采集和培养 2.精子细胞的采集和获能 3.体外受精过程三、胚胎的早期培养 1.概念：应用人工创造条件，对获取的 早期胚胎进行体外培养。2.培养液成分：,