仪器分析课件第13章核磁共振波谱分析.ppt

第十三章核磁共振波谱分析,第一节 引言（introduction）,定义：核磁共振谱(Nuclear Magnetic Resonance SpectroscopyNMR):低能电磁波（波长约106-109m)与暴露在磁场中的磁性核相互作用，使其在外磁场中发生能级的共振跃迁而产生吸收信号，称为核磁共振谱。一、NMR发展简史：1939：气态NMR试验成功；1945：凝聚态NMR试验成功；1945：美物理学家Block 和Purcell同时发现NMR现象，证实了核自旋的存在，为量子力学的一些理论提供了直接的验证，是本世纪物理学发展史上的一件大事；1950：W.G.Proctor 和当时旅美学者虞福春发现NH4NO3 中14N 的共振谱线为两条，说明同一核在不同化学环境会表现出不同的核磁共振信号（化学位移不同）；1951：Gutowsky等发现POCl2F 溶液中19F 谱图中有两条谱线，而分子中只有一个F，由此发现了自旋-自旋耦合（spin-spin coupling）;1952：Block 和Purcell二人因发现NMR现象，获诺贝尔物理奖;1961:法国著名物理学家A.Abragam 出版专著核磁学原理，目前已成为物理学中广泛引用的专著；1966：高分辨核磁共振谱仪出现；1970年代：R.R.Ernst 创立脉冲傅里叶变换核磁共振（FT-NMR）;1970-1980年代：R.R.Ernst发展了二维核磁共振(2DNMR);1987：R.R.Ernst及其学生G.Bodenhausen 和A.Wokaun 合作出版一维和二维核磁共振原理，此书与A.Abragam 出版的专著核磁学原理被国际NMR领域称为NMR发展史上的两块里程碑；1991:R.R.Ernst因其创立脉冲傅里叶变换核磁共振（FT-NMR）及发展二维核磁共振(2DNMR)这两项杰出贡献,当之无愧的独享了1991年诺贝尔化学奖;1990年代-：高场超导核磁共振谱仪（目前世界已有900MHzNMR谱仪）以及与其他仪器联用（如：与液相色谱联用，NMR-LC）,二、NMR用途：1.化学:研究分析结构；2.医学：病变诊断（如：人体断层成像）；3.药学：药物成分研究；4.生物学：研究蛋白质结构、构象；溶液高分辨核磁共振在化学中主要应用 基本化学结构的确定、立体构型和构象的确定 化学反应机理研究、化学反应速度测定 化学、物理变化过程的跟踪 化学平衡的研究及平衡常数的测定 溶液中分子相互作用及分子运动的研究（氢键相互作用、分子链的缠结、胶束的结构等）混合物的快速成分分析（LC-NMR,DOSY）,三、核磁共振的分类1固体核磁共振 用于不溶性的高分子材料，膜蛋白，金属材料的研究;2.液体核磁共振 用于有机化合物，天然产物，生物大分子的研究；3.核磁共振成像 临床诊断的成像仪，动植物实验、研究用的成像仪四、核磁共振波谱分析的特点1 样品无损；2 结构信息丰富；3 新的分析测试技术不断出现。,第二节 核磁共振谱,一、核磁共振基本原理1.原子核的自旋与磁矩：（1）原子核的自旋：大多数核绕某个轴作旋转运动 若原子核存在自旋，产生角动量 自旋角动量：矢量，绝对值为：,子,L,自旋角动量（矢量）在Z轴之分量：Pz=(h/2)m m 为原子核的磁量子数，其值(共有2I+1个)为:-I,-I+1,-I+2,-I-1,-+I,表示了磁性核在外磁场的取向，如，I=1/2,表示有两种取向和；I=1，表示有三种取向：，亦表示了磁性核在外磁场中的能级数Pz最大值为：Pz,max=(h/2)m2、原子核的磁矩（矢量），绝对值为：,二、核磁共振条件（一）核磁共振现象1 量子力学观点：1）.外磁场作用下核的能级分裂：自旋量子数 I=1/2的原子核（氢核），可当作电荷均匀分布的球体，绕自旋轴转动时，产生磁场，类似一个小磁铁。当置于外加磁场H0中时，相对于外磁场，可以有（2I+1）种取向：氢核（I=1/2），两种取向（两个能级）：a.与外磁场平行，能量低，磁量子数1/2;b.与外磁场相反，能量高，磁量子数1/2;,图 12.3 空间量子,因此，处于高能级的核必须回到低能态，才能维持处于低能态的核的微弱的数量优势，使得核磁共振信号得以检测。这一过程以非辐射的形式实现，称为驰豫过程，可分为：1、自旋-晶格驰豫，又称纵向驰豫:自旋核与周围分子交换能量的过程，如固体的晶格，液体则为周围的同类分子或溶剂分子。用弛豫时间T1 示。2、自旋-自旋驰豫，又称横向驰豫:核与进行能量交换的过程。用弛豫时间T2 示。试想：纵向驰豫和横向驰豫有何区别和联系？对NMR图谱有何影响?查阅文献，找出T1和T2 可能的用途。,第三节 化学位移的基本原理,则：,一、化学位移的产生 理想化的、裸露的氢核；满足共振条件 产生单一的吸收峰；实际上，氢核受周围不断运动着的电子影响。在外磁场作用下，运动着的电子产生相对于外磁场方向的感应磁场，起到屏蔽作用，使氢核实际受到的外磁场作用减小：由于屏蔽作用的存在，氢核产生共振需要更大的外磁场强度（相对于裸露的氢核），来抵消屏蔽影响。,由于屏蔽作用的存在，氢核产生共振需要更大的外磁场强度（相对于裸露的氢核），来抵消屏蔽影响。,图 12.5 电子对质子的屏蔽作用图,化学位移：在有机化合物中，各种氢核 周围的电子云密度不同（结构中不同位置）共振频率有差异，即引起共振吸收峰的位移，这种现象称为化学位移。,图 12.6 甲醇的核磁共振氢谱,二、化学位移表示方法：1化学位移的标准 没有完全裸露的氢核，没有绝对的标准。相对标准：四甲基硅烷Si(CH3)4（TMS）（内标）位移常数TMS=02为什么用TMS作为基准?（1）12个氢处于完全相同的化学环境，只产生一个尖峰；（2）屏蔽强烈，位移最大。与有机化合物中的质子峰不重迭；与裸露的氢核相比，TMS的化学位移最大，但规定 其为0，其他种类氢核的位移为负值，负号不加。常见基团的化学位移范围见 图 12.7,图 12.7 常见基团的化学位移范围,若用 Hz 表示化学位移，则不同场强测出的同一化学环境的核的位移不同，给分析带来不便，如图 12.8示。,图 12.8 不同场强测出的同一化学环境的核的位移（Hz）,三、化学位移测量方法：扫场法（常用）：固定照射频率，不断改变磁场强度 扫频法：固定磁场强度，不断改变照射频。,第四节 化学位移与分子结构的关系,一、影响化学位移的因素（一）屏蔽效应1、局部屏蔽效应：由成键电子的电子云密度而产生，由两部分组成(1)逆磁屏蔽：由成键电子在外磁场作用下产生的诱导环电流而产生的与外磁场相反的次级磁场；(2)顺磁屏蔽：化学键限制了成键电子在外磁场作用下的运动。对1H而言，可略而不计。影响电子云密度的主要因素:诱导效应：与质子相连元素的电负性越强，吸电子作用越强，价电子偏离质子，屏蔽作用减弱，信号峰在低场出现。,图12.9,共轭效应：影响电子云密度，如，甲氧基苯环上的H，邻位的化学位移为6.84，对位的化学位移为6.99，间位的化学位移为7.81。杂化影响：若无其它效应的影响，杂化轨道随S成分增加而电子云密度降低，屏蔽作用减小，化学位移增大,2、远程屏蔽效应：亦称邻近的逆磁屏蔽或磁各向异性，具有方向性。当分子中某一原子核外的电子云分布不是球形对称、即为磁各项异性时，其对邻近核就附加了一个各向异性的磁场，使某些位置上的核受屏蔽，而另一些位置上的核去屏蔽，因而改变了一些核的化学位移。（1）叁键的各向异性：如乙炔,其氢核位于屏蔽区,图12.10 乙炔叁键的各向异性,（2）双键的各向异性：如烯烃或醛基氢核均位于去屏蔽区,图12.11 双键的各向异性,（3）芳环的各向异性,图12.12 苯环的各向异性,（4）单键的各向异性：C-C单键电子产生的各向异性较小，C-C单键键轴是去屏蔽圆锥的轴，随着甲基的氢被取代，去屏蔽效应增大，信号就往低场移动。在椅式构象的环己烷中，直立键的化学位移小于平 伏键的化学位移，即Ha小于He。,图12.13 单键的各向异性,（二）氢键的影响：分子形成氢键后，使质子周围电子云密度降低，产生去屏蔽作用而使化学位移向低场移动，如醇类、胺类和酸类等。1 分子间氢键：受溶液浓度、温度和溶剂的影响较显著；2 分子内氢键：几乎不受溶液浓度、温度和溶剂的影响。溶剂效应：如二甲基甲酰胺，随各向异性溶剂苯的加入，两个甲基化学位移发生变化,（a）在CDCl3中(b)(d)中为逐步加入苯4 二甲基甲酰胺的溶剂效应,图12.15 苯环对二甲基甲酰胺甲基的屏蔽,交换反应：1.位置交换:活泼氢，如-OH,-SH,-COOH,-NH22.构象交换:环己烷平伏键与直立键,二、不同类别质子化学位移不同类别质子化学位移及经验计算,图12.18,QUESTIONS:1、查出乙烯和乙炔分子中氢核的化学位移，试比较他们数值的大小，并解释其原因。2.通过对不同类型质子化学位移的估算，结合量子化学理论知识，你能否设想计算机在化学位移计算方面的应用?,第五节 自旋偶合及自旋分裂与分子结构的关系,一、自旋偶合及自旋分裂的基本原理：,每类氢核不总表现为单峰，有时多重峰。1.原因：相邻两个氢核 之间的自旋偶合（自旋干扰）,即自旋偶合导致自旋分裂。,2.自旋偶合（Spin-Spin Coupling）自旋分裂Spin-Splitting)一般规律:峰裂分数：符合n+1 规律；n为相邻碳原子上的质子数（磁等价的核）；峰面积比：系数符合二项式的展开式系数；峰面积与同类质子数成正比，仅能确 定各类质子之间的相对比例；裂分峰以其中心位置对称分布，中心位置所对应的化学位移即为被裂分质子的化学位移；裂分峰的间距即为耦合常数；核之间的耦合是通过成键电子传递的。,3.核的等价性(Equivalent)（1）化学等价：d 相同；（2）磁等价：不仅d 相同，而且与分子中任意其他核的耦合常数都相同。（3）结论：化学等价并不一定磁等价，而磁等价则一般化学等价，通常所指的等价质子是指磁等价(磁全同)。,4.质子群的符号表示（自旋系统）：（1）质子群（自旋系统）：在分子结构中，常常包括多种不同类型的核，相互耦合的核组成一个自旋体系（称为一质子群），体系内部的核相互耦合、但不和体系外的任何一个核耦合；在体系内部亦并不要求一个核和除它以外的所有核都耦合。例：,有三个自旋体系：,一般把处于较高场而化学位移接近的质子用A,B,C表示；把处于较低场而化学位移接近的质子用X,Y表示;处于中间的则用M表示。若有多个磁全同的核，则用下标数字表示之；若核是化学等价而磁不等价的，则可用同一字母加上标 示之。例：,CH2F2 A2X2,二、偶合常数（J）:相邻两个氢核之间的自旋偶合（自旋干扰）程度，用偶合常数（J）来衡量，反映了多重峰的峰间距的大小，以Hz为单位表示，与外磁场无关，而与成键的数目有关；在饱和烃类化合物中，一般只能传递3个单键，大于3键，J 近于0；但偶合作用又与立体结构有关，有时在大于4键时，仍有耦合分裂，这种耦合，称为远程耦合；双键和叁键较单键更易传递耦合。一般 J 不大于 20 Hz。三、偶合常数（J）类型及其与分子结构的关系 J值的大小表示邻近核相互干扰程度的大小，与核间相隔的成键数目有关，也与影响成键电子云密度的因素有关，而与外加磁场无关，可分如下几个类型：1.同碳质子（偕质子）耦合常数 2J,通常为负值；2.邻碳质子耦合常数 3J，通常为正值；,（1）饱和型（H-C-C-H）:,图12.22 JH-H与双面夹角的关系,（2）乙烯型（H-C=C-H）:3J顺=6-12Hz,3J反=12-18Hz,3.远程耦合：四键或四键以上的偶合问题：试比较环己烷的平伏键和直立键上的氢相互之间的偶合常数的大小。,第六节 核磁共振仪,一、基本原理图：如 图 12.26 示。,图 12.26 核磁共振仪示意图,二、核磁共振仪：有两种类型，即连续波谱仪和傅立叶变换核磁共振仪1、连续波谱仪 组成包括：(1)磁铁：用来产生一个强的外加磁场。按磁场的种类分为永久磁铁、电磁铁、超导体三种。前两种磁铁的仪器最高可以做到 100MHz，超导磁铁可高达 950MHz。(2)射频振荡器：用来产生射频。一般情况下，射频频率是固定的。在测定其他核如 13 C、15 N 时，要更换其他频率的射频振荡器。(3)射频接受器和记录仪：产生核磁共振时，射频接受器能检出的被吸收的电磁波能量。此信号被放大后，用仪器记录下来就是 NMR 谱图。(4)探头和样品管座：射频线圈和射频接受线圈都在探头里。样品管座能够旋转，使样品受到均匀的磁场。(5)电子计算机（工作站）：用于控制测试过程，作数据处理，如累加信号等。,2、脉冲傅立叶变换核磁共振仪 一般连续波核磁共振仪是在核进动的频率范围内用扫频或扫场的方式来观察 NMR 信号的。由于每一时刻只能观察到一条谱线，所以效率低。脉冲傅立叶变换核磁共振仪（PFR NMR 仪）是用一个强的射频，以脉冲的方式（一个脉冲中同时包含了一定范围的各种射频的电磁波）可将样品中所有的核激发。为了提高信噪比，需要多次重复照射、接收，将信号累加。现在生产的脉冲脉冲傅立叶变换核磁共振仪大多是超导核磁共振仪，采用超导磁铁产生高的磁场。超导线圈浸泡在液氦中，为了减少液氦的蒸发，液氦外面用液氦冷却。这样的仪器可以做到 200900MHz。仪器性能大大提高，但消耗也大大增加。,第七节 图谱解析,一级图谱一、一级图谱应满足的条件：（1）n/J6（2）同一组核要磁全同（3）符合n+1规律，若邻近核有两组，核数分别是m和n，则谱峰分裂数为(m+1)(n+1)二、谱图中化合物的结构信息（1）峰的数目：标志分子中磁不等性质子的种类，多少种；（2）峰的强度(面积)：每类质子的数目(相对)，多少个；（3）峰的位移(d)：每类质子所处的化学环境，化合物中位置；（4）峰的裂分数：相邻碳原子上质子数；（5）偶合常数(J)：确定基团联结方式、化合物构型,三、谱图解析,四、高级图谱的简化:1增加磁场强度：n/J6 符合以及图谱2添加位移试剂：低场位移和高场位移3共振去耦,第八节 波谱综合解析,一般步骤:一、分子量的确定由质谱图确定：从一般质谱图寻找分子离子峰;二、分子式的确定1.同位素丰度法：根据 M+1/M,M+2/M，查Beynon表2.高分辨质谱：R10,000高分辨率CO 27.9949,N2 28.0062,CH2N 28.0187,C2H4 28.0313 3.NMR 特殊技术(DEPT)结合UV,IR 信息三、不饱和度计算：UN=环+双键（三键）四、紫外光谱(UV)：由,判断是否有共轭体系、芳环、杂原子五、红外光谱(IR)：官能团区推测官能团，指纹区推测结构片断骨架 六、核磁共振（1HNMR,13CNMR,DEPT,2DNMR,NOESY）化学位移、偶合常数、峰面积、峰型（裂分峰数）确定官能团、结构片断、联接顺序、空间位置等；七、结构验证：1.各种图谱相互佐证；2.标准图谱对照；3.标准化合物对照。,波谱综合解析实例,Fig 1.1,2,11-trihydroxyeudesmane,FAB+MS Spectrum,图12.27 MS of 1,2,11-trihydroxyeudesmane,图12.28 IR Spectrum of 1,2,11-trihydroxyeudesmane,图12.30 HMQC Spectrum,图12.31 HMBC Spectrum,图12.32 1H-1H COSY Spectrum,