仪器分析大连理工大学42高效液相色谱仪.ppt
2023/6/14,第四章高效液相色谱法和超临界流体色谱法,高效液相色谱仪与结构流程4.2.2 主要部件4.2.3 检测器,第二节高效液相色谱仪,instrument of HPLC,High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography,2023/6/14,4.2.1 液相色谱仪与结构流程,2023/6/14,液相色谱仪（2）,2023/6/14,液相色谱仪（3）,2023/6/14,液相色谱仪（4）,2023/6/14,液相色谱仪（5）,2023/6/14,液相色谱仪（6）,2023/6/14,1.结构流程,2023/6/14,2023/6/14,4.2.2 主要部件,(1)高压输液泵主要部件之一，压力：150105350105 Pa。为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(10m)，液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳，脉冲小，流量稳定可调，耐腐蚀等特性。,（动画）,2023/6/14,(2)梯度淋洗装置,外梯度（高压梯度）:利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。,内梯度（低压梯度）:一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。,2023/6/14,(3)进样装置,流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，结构如图所示：,2023/6/14,(4)高效分离柱,柱体为直形不锈钢管，内径16 mm，柱长540 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。,2023/6/14,(5)检测器,紫外检测器 示差折光检测器 荧光检测器 光电二极管阵列检测器,2023/6/14,4.2.3 检测器,a.紫外检测器 应用最广，对大部分有机化合物有响应。特点：,灵敏度高；线性范围宽；流通池可做得很小(1mm 10mm，容积 8L)；对流动相的流速和温度变化不敏感；波长可选，易于操作；可用于梯度洗脱。,2023/6/14,b.光电二极管阵列检测器,紫外检测器的重要进展；光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图。,2023/6/14,2023/6/14,光电二极管阵列检测器,2023/6/14,三维：光谱-色谱图,2023/6/14,c.示差折光检测器（Differential refractive index detector）,除紫外检测器之外应用最多的检测器。可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度成正比。,通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数）。灵敏度低，对温度敏感，不能用于梯度洗脱。偏转式、反射式和干涉型三种。,2023/6/14,示差折光检测器,2023/6/14,d.荧光检测器（Fluorescence detector）,高灵敏度，高选择性。对多环芳烃，维生素B，黄曲霉素，卟啉类化合物，农药，药物，氨基酸，甾类化合物等有响应。,2023/6/14,请选择内容,结束,4.1 高效液相色谱法的特性 4.2 高效液相色谱仪 4.3 液相色谱的固定相与流动相 4.4 液相色谱中的主要分离类型 4.5 液相色谱分析条件的选择 4.6 高效液相色谱法的应用 4.7 离子色谱法 4.8 超临界流体色谱法,
