人教版教学课件1.1DNA重组技术的工具.ppt
1.1 DNA重组技术的基本工具,基因工程分子水平改变生命,基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。就是按人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞中,定向地改造生物的遗传性状。,基因工程的“专用工具”,分子的手术刀限制性核酸内切酶:(一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子的酶。),来源:从原核生物中分离纯化出来作用:识别由6个核苷酸组成的序列(大多数)识别由458个核苷酸组成的序列(少数)结果:黏性末端和平末端,EcoR I的切割,切割位点:在中轴线两侧得到:黏性末端,限制酶,限制酶,限制酶,限制酶,黏性末端,黏性末端,Sma I的切割,CCCGGGGGGCCC,切割位点:在中轴线处得到:平末端,DNA连接酶,2.分子的“缝合针”DNA连接酶,DNA连接酶的作用,甲片段,磷酸二酯键,E.coli DNA连接酶 只能连接黏性末端T4DNA连接酶 连接黏性末端或平末端,基因进入受体细胞的载体“分子的运输车”,质粒、噬菌体、病毒,运载体1能够在宿主细胞内复制并 稳定保存;具有一个或多个限制酶切位点以便与外源基因相连;具有标记基因,便于进行筛选,基因工程的操作工具,1.基因的剪刀 限制性核酸内切酶,2.基因的针线 连接酶,3.基因的运输工具 运载体,基因工程的操作步骤,1.目的基因的提取,2.目的基因与运载体结合,3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与表达,小结,