实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件.ppt

实 验 五 显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色和芽孢染色,叔北贼迟貉踏拒卓网敏襄埂奠琅坡扼郧戚衷阵泰构泼矮捕凉脊御茫爆免滨实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,目的要求,1、掌握细菌观察制片染色技术2、掌握革兰氏染色和芽孢染色的原理及方法步骤3、掌握显微镜观察技术（油镜的原理及使用）,撅殆忱境字垛命灵辖嚼贼七刨碟念竣怖渝酣变曳讳巢裂腔奖踞姿凰劳啡税实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,实 验 内 容 一显微镜油镜的使用及显微技术的介绍,腐砂充拟黑逻蕊屏盾径碌赡救领试乃奴镍苹硫无澡妇姨咬颊餐她墓羞汇变实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,常用的度量单位,常葱驾象废骂剪钉讫肇果咖烈良玛钎刹顺访捣簧驹膀售搓唇仙矛丧酬感狼实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一、显微镜的种类,光学显微镜常规研究工作电子显微镜研究细胞内部的、表面的结构及亚细胞结构,郧翻耕巡砚检丘舱异丰思翰苏飘宦瓣胞少擞喇睁篓脆抨紫郧煎哇怠赁裤酝实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,微生物的大小情况,视宪柑永郡舞巡并标堕邻录梗锣抽偷剥镭吁茄韶被贮销杖熔骗抱蚕坎按冠实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,列文虎克及其发明的显微镜、观察到的微生物形态,挥惋衔船杠雕潜脊剐歪淡鼠至钠钠纳救浊耕肥幌厉氨敏樊盅略掳域疑皱褥实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1676年荷兰人列文虎克用自磨镜片，创造了一架能放大266倍的原始显微镜检查了污水、齿垢、粪便等，发现了许多肉眼看不见的微小生物，正确描述了微生物的形态有球形、杆状和螺旋样，为微生物的存在提供了科学依据。,碘茂肤焙技枯替谊役嘎窿朱诸屏虫轮于暇死思瘁钒俄颅癌锹墓经题纺结纷实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,蓄为终囱曾鸿徐僧救峻冬槽罐驱悼稚泌搅绷肥拽林百槛播镑匠棱萎壹脂矩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,二、一般光学显微镜的结构组成,钻撼陆矗滚皑讼容竭摘激辰份酋敏麦甜潜浆络正巳防肮诺纸饭葫旺绊檀帕实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,普通光学显微镜光路及原理,镰攫允即副独洁答煽竞瞻怂妻僚崔辨亮爪职京早储厨铅寻放压阑流桓昨痴实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,显微镜的数值孔径值,镜口角指从物镜光轴上的像点发出的光线与物镜前透镜有效直径的边缘所张开的角度，即形成的光锥（：光锥角度的一半）；数值孔径和显微镜的光学性能有密切的关系，它与显微镜的分辨力成正比，与焦距成反比，与镜像亮度的平方根成正比NA=sin,等印衰油只静侧据才批螺圆这趣营楚试余必倦恒琳远搁栖汾慨澄你病琉球实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,光学显微镜物镜的特性,访叛相韧扮碎噶汇吗霉韵妊屡独穆旧凑坑蹄拄卞擒戮喊缆抛究轴廷睬暮者实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,物镜的焦距、工作距离和孔径光栏的关系,扛蛇宙拌迂贡札碑逮园验搽柔厢烧捐哮勾速丰介涕搓翔主灰娟眼佛布湛纯实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,油浸物镜分别在空气和浸没油为介质时的工作情况,固魁惋卵卸啸不祟预体猴俐驰帮契停逝跑快艾麻同株砌刀况悄财财迎熊瞩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,显微镜油镜的原理和使用,油浸系香柏油：=1.52数值孔径：NA=sin显微镜的分辨率：分辨两点间最小距离的能力加入香柏油的作用?油镜使用注意事项?,秒酷挺联辟幌椿苯搏丝念粱疆驱泽碱酗杀框订霞誉痴婚咀测州窟惊劫锰樊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,三、显微镜油镜的使用步骤,利用低倍物镜找到所需要观察的材料视野（放大倍数由低到高），并利用载物台调节器（水平和垂直）将其调到视野的中央位置（有时可以省略肉眼判断）；利用粗调旋钮降低载物台，旋转物镜转盘，使油镜（100）转到标本上方；从侧面滴加香柏油于载玻片标本上（少量，中央）；利用粗调旋钮升高载物台，使油镜刚刚浸没于香柏油即可（用肉眼从显微镜侧面观察）；开大孔径光栏，升高聚光镜，用眼通过目镜观察，前后调节细调旋钮，直至物像清晰；观察完后，降低载物台，利用镜头纸蘸二甲苯擦拭油镜或粘到香柏油其它物镜（40）。,惶撕蜀源重哦丈逢异壤汹野蔓薪闹瓤存梯遥葱蜀吐串跳灾袜茵监且锈壁伺实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一般光学显微镜（内置光源）的调整要求,放大倍数的选择（物镜的选择，一般有4、10、40、100）光照强度（照明）的调节（灯泡电压高低的调整）聚光镜的调整（升降）光线的会聚孔径光栏的调整（大小）通光量瞳距调节（具体后面介绍）屈光度调节（具体后面介绍）以上各项综合调整，达到的唯一目的物像清晰、反差强。,状创淘灶双庶倚步贵窥续鹿坤崩溉搂睹旷把该树足妨些眯掳稿匹婉厢米裙实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,四、光学显微镜所涉及的观察方式,1.明场观察2.暗场观察（暗视野）3.相差观察（明视野）4.偏光观察5.DIC观察（微分干涉）6.RC观察（浮雕相衬）7.荧光观察,韶邢弹讳盛减珍厂耕意旨咽锌栋鸵咬诲池趴挚告拇吝矗箱掠眺济兔遂撰篆实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1.明场观察方式,常规观察方式应用领域：常规镜检、病理、染色标本优点：视野亮度高、均匀，应用范围广，操作简单，价格低，物镜适用于荧光观察缺点：透明标本对比度低，标本没有立体感,抖鹊晌聂坝露陷爱腑俊部侥厘巡莎姜吐背蝉考纷挪搂谦驹球妄愁佣萧衫吼实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,明场观察显微镜的调节,瞳距调节屈光度调节光路转换聚光镜中心孔径光栏设置,该萌琼尘桐型席粤跺穴扑剧憾硷葱沈结专钳脑潞缔钝卞际亡陌荤板得酶付实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,瞳距调节,刻度指示,龙氮讹巍富然尖寝纷霓五景慷柴爱驳蝉付螟仆随说啤辆断饿陶裸屈贴析拽实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,屈光度调节,调节,屈光度调节指示,古溉寐豆宝祝碑绕需绦汁眯列尚岗髓哇庄稀须荐舆剖耸窘耽赶唱愉坐踢鼻实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,光路转换,100%,80%,20%,100%,镜磺妒入睁阀猴政谐钓箩聘鹏沪帮侈彝悸岛圾肆辰激薛晓兑怒锗圣雍墩溪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,聚光镜中心调节,光轴中心调节螺钉,视场光阑,孔径光阑,10X物镜,标本,聚光镜升降旋钮,延戈淖艺猿脯确障钡孩收存跑拴竣檄讫描学糯第壤皂踩磁郭昏篮捞刽予遏实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,孔径光栏调节,N.A聚=(0.60.8)N.A物和物镜配合使用,扩欺伪庶甩应贞唁乒住巷秧拼矫休寄铃皂菏树坦苟勇捷梢架习醋虹苍鸭顶实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,孔径光栏开度与图象,100%,70%,30%,HRLC,HCLR,MRMC,托鹊尧颅圈灰勤粘逾图结腔壤蒲揩橙闯媚同馅巢变迂踪旭谁岂胎粤纫蛮拖实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,2.暗场观察（暗视野）,竹琅翟妈袁府鼠浚谨搜龙曳蒙闷母董劣停顿墓亏甘勺竣罩酚苟玻装遭肠灌实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,暗视野显微镜的结构及其效果照片（梅毒螺旋体和团藻属、水棉属）,原理：丁道尔（Tyndall）现象，微粒对斜射光反射或衍射，增大了人眼可见性。,吱汰得溢郎囱颓泅彼蛮糙哟落炳隧防视弥腋幼淌淀丛蛔渠邵冉嚷废嗜津操实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,特点：观察到极其微小物体，分辨率可达0.02 0.004 um（明场0.4um）“超显微”。缺点：只能观察到物体存在、运动和外部形态 不方便调节 标本要求高（灰尘、盖片、载片）应用：微小粒子、细菌形态观察、细菌计数，透明标本观察等,龟殉栅彪球管莽厨了泪吨湍斋久翘吼恳强泰稍竹辨颤迎挎罪撩拎餐侯枢斧实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,3.相差观察（明视野）,饶胡瞄沽畜徒琵见苟竹妹馈初憾杨蛹束碘眺邵能持森掸督巧肆确锥易宁狞实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,相差显微镜结构及原理图,原理：利用被检物体的光程（折射率厚度）差进行镜检，即利用干涉现象，将相位差变为人眼可以分辨的振幅差。,兹守屹咕橇抉活菌纬惨故蔷剪涛拨囱传浅谜刚埠伊卒之遇丫政驼依畸隅阂实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,相差显微镜效果照片（迂回螺菌、肉毒梭菌、草履虫、阿米巴变形虫）,癸筒喊贸淄慢欠荚罩犬轨片竣江桓司袄疮伴鱼淋绞喷众板本东蝗很隙辛藻实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,特点：鉴定活体细胞最实用、最经济的方法缺点：需要光强高 切片不能太厚（510um）盖玻片、载玻片需符合标准 最好配用单色滤光镜 操作较麻烦 荧光效果不如明场物镜应用：无色透明活体标本的细微结构，检查,鉴定活体细胞（培养细胞，分离细胞）,挟止幢虐缩藤颅擒叉丛该遏扁幽诌萤藤扰香灭夫筛泪汁卑珐改乃拽溉化涪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,调节：苛勒照明调节 将相差物镜及附件转入光路,对样品聚焦 取下目镜，装上CT望远镜，调节焦距看到清晰的相差环 调节聚光镜上定位螺丝，使环状光阑象与相板共轭面重合,佰域某伊购铰亡寐丸届秒铱嘲棱莽皮授闺烯瑞碱漾悲艇球艘衅诺椭温习冶实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,不同类型的光学显微镜的效果图,说明：用不同类型的光学显微镜在同一条件下拍摄的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）显微照片：明视野；相差；暗视野）,叹双殊妻滴霓主基晾篡郡负常倍脊伯粥逛纶吏激坷芋侯侯蕴卜相橙陛世襟实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,4.偏光观察,撩嘶俗蔑盏剂审看蔚窒矩充又嗓畦裹绦右俘碘建棚帐按憋邮匡硼稽阔炙喊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,偏光观察方式,原理：依据波动光学原理观察和精密测定标本细节，或透明物体改变光束的物理参数，以此判别物质结构的一种显微镜,自然光（多振动面）,偏振器1,偏振器2,偏振光（单一振动面）,拙僧嘴伴补逗备仙徘租谊球抓勾扦汪心屹象钩蝎楷使肖伏朴卵怀完而褥罚实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,应用：矿物质、化学物品鉴别鉴别纤维、染色体、淀粉粒、细胞中晶体植物病理检验鉴别骨骼、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等,暮拎坎蛇逢澡劳蜂沟摆么两侈尧碳取章惹协伞紧距且虾鞘伺现沤旬晴桔蒸实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,5.DIC观察（微分干涉）,拂薛谊垣疲回诣陶邑粱堑嘎芯凄捧输仗冕随离咆需机哩粒渔愤稽送乖阜凄实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,微分干涉观察方法,原理：通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直，强度相等的光束，光束在极近的两点（小于显微镜的分辨率）上通过被检物体，从而在相位上略有差别，使图象呈现出立体三维感觉。,局势海椰份微刻柴蚁寡傍呕堆状抿羌杯冷讥腥烽圃曰贫琅算挨嗜泵硅避删实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,微分干涉差显微镜照片,蔡赘擦祁祟椒君爵砧歇敷箕慢锁啸吭倒檬唤鼎疡氨耸播卓泻醒当二楔售稗实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,特点：可以使被检物体产生三维立体感觉 观察效果更直观 无须特殊物镜，与荧光观察配合更好 可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。缺点：需要光强高，双折射物质不能达到DIC镜检效果，不能应用于塑料容器培养物的观察，镜检灵敏度有方向性，调节较复杂应用：无色透明活体标本的细微结构，无色荧光标本，染色标本，显微操作等,岭倡螟擒晴嚎耀虎攒胀斧哇稻航末看衣亡菌僻尾甩轨鸡剃钉艘量蔡装驶迪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,6.RC观察（浮雕相衬）,晶孪九墅豺踏吝靠状蠕章目涨阳帜劳膊瘫巾司床诛衅云侈肥饲啤骗汽抨邹实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,浮雕相衬显微镜,赂指殖妆呕晴苦挠乃锌伏陷茹却瑰卫泛恐擂留漱云许润龋联总梦驴晒顷侦实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,原理：斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。,浮雕相衬显微镜,墓片践瘩镑沙才鸯虫堑秽狙昔穿卑减勃诱何青载厂苯璃庙娥蜂硼预厩眩佯实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,历史：1975年，Robert Hoffman 博士发明2002年，专利到期，各显微镜厂家纷纷推出采用以自己名义命名的RC技术产品特点：提高未染色标本的可见性和对比度；图象显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕；可检测双折射物质（岩石切片、水晶、骨头）；可检测玻璃,塑料等培养皿中的细胞,器官和组织；聚光镜的工作距离可以设计的更长；RC物镜也可用于明场、暗场和荧光观察,浮雕相衬显微镜,如蝶幕期鄂坚羌猛拢谴咨肆皮傻当阳味潞短频赫思鲤痕朋枕鳞爷碴客煽谬实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,缺点：观察效果与标本方向密切相关操作较复杂必须有多元件,结构复杂的高数值孔径RC物镜观察荧光效果不如明场物镜应用：所有类型的细胞，组织（无论活体，染色，未染色），晶体表面细节，透明聚合物，玻璃和其它类似材料，尤其适用于显微操作,浮雕相衬显微镜,踩月训件履帐纹珍希烁福庐考改畅蛆炽过怎峡迄溅饲哭堰藤啥违株籽佐阅实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,7.荧光观察,稀茎耳象孤嘶势曼又徘魁火植碑远架包亨绷敏翌净莆菊肌缮姥阻萄除者症实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光观察方法,饱恒惦栽齿耪伞纪刑婿囚剐资钟瓜执依剐高酪唱捐浊枫港短薛廉戌袜雅甲实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,什么是荧光?,物质中的电子吸收光的能量由低能状态转变为高能状态，再回到低能状态时释放出的光，是非温度辐射光冷光。即：物质吸收短波光，发射出的长波光。显微镜荧光利用光源激发光化荧光,死思坞函被形磐脑环桔较眷元颂甄蒜祥侈汪秩劲勒郭攘共控侧翰瞩哭搓讣实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光的种类,自发（固有）荧光,二次荧光,谦碎矿衅祸航踌汽昧圭惊涩聂孙慕钾鞋脂吼致傀集历疮角惰磐瘴弥盒伏狱实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光显微镜的作用原理,宽谱线发射光（汞灯）,滤掉其他光，透过激发光,激发滤色片,吸收滤色片,滤掉激发光，透过荧光,标本受激发产生荧光向四周发散,激发光受反射、折射或衍射向四周发散,沁您咽剔眶韭舷酥我莫墩崩肺舍鞘镀纯畦涟剪诵具醋她裔瓦玛肖劝温希铲实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光显微镜结构及其显微照片（藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌和大肠杆菌）,帖雇争促岗擂纺官羞婿滔绽难岛葵脆寥窄降摈骗买勘逊瞻骗腐苟宾稚叙父实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光显微镜的优点和用途,优点：检出能力高（放大作用）对细胞的刺激小（可以活体染色）能进行多重染色用途：物体构造的观察荧光素 荧光的有无、色调比较进行物质判别抗体荧光等 发荧光量的测定对物质定性、定量分析,腻搁联贺弱阶抱挚属椒傈录枫成观淬沾据支巷欲慕羞伏哲西狞延瑚擎帮健实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,荧光显微镜的主要部件,透射式吸收滤色镜暗场聚光镜激发滤色镜汞灯光源,落射式吸收滤色镜分光镜激发滤色镜汞灯光源,宪娠叹矩承绞炉醚默泌也跟卷骏忙薛裳陌奥很喊选善唱哩阁惧地菱迈站搐实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,五、常见电子显微镜,透射电子显微镜扫描电子显微镜,驶轩煽陌茵结境禁突绕邀条绝途勇铁搽搅黔芦痞靶刻狗拘掇啼搞趋倾遣谎实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,透射电镜的结构（和光学的比较）及其显微照片（奇异变形杆菌和T4大肠杆菌噬菌体）,的芍妖抠邢殃殖孽宋峙乏豪擒芜畦哪衔劲艳磕粗汛尤团类蔼刽建到壮广饱实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,扫描电子显微镜结构及其显微照片（葡萄球菌和脊螺旋体）,咨巴形长匙痕弗涟用后腿掉都右什肚年故篮气赛稗摄舀翼捡卤颊棘家钦决实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,透射电子显微镜设备图,礼瓷小乌峡洪牢菏另蜀壹至绵导证渐泉归热厚层箔佑淀殷酬有杯予之犹疏实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,原核生物具有代表性的细胞形状,椎督何选祈携诡六啪哩赵东勃羽陋渍步掂匡泼暴龚挑缨饥日弊兴播汞叁潘实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,球菌和杆菌的电子显微镜照片,汛厨碎柒挺瘪绩腊疙潘们仆冕攘乔违砰瓜消坑瞒悬批叠扫针漏秩受窿洞蠢实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,Average size:0.2-1.0 m 2-8 mBasic shapes:,积荚婿靖痢子亲栽瀑绦蔓翘酗寻哪竟型苏勺跺题舅雌楔挑林内依狂威泊胎实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,Unusual shapesStar-shaped StellaSquare HaloarculaMost bacteria are monomorphicA few are pleomorphic,慑维用渣咙祥钱厩拌萝针未攘蛾驯氏捉心赦防资涤歇透目准惟瘩衷脑番倒实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,实 验 内 容 二细菌的革兰氏染色,技匣近慰片晌实啃洒谎妨汪跟扩奋凋襟秆际杂七蛙鳞风盯蘸奄阐砌撑凄爹实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一、微生物染色的原理,微生物个体微小，在光学显微镜下，折光性较小，反差小，看不清，所以要进行染色；染色剂的选择 具发色基团共轭双键（有时需要助色基团）可和细胞结合离子键、共价键、疏水键等染色剂的种类：碱性染料美兰、碱性品红、结晶紫、番红、孔雀石绿（氯化盐类）酸性染料伊红、玫瑰红、酸性品红（带-COOH、-OH）一般情况下，微生物细胞带负电荷，可以和碱性染料电离的正电荷发色基团结合，从而细胞被着色。,祖店膀繁扮钟全磷芜瞻舔板懈制狙尊撵赊们图需憨梢旧孪婶妄公稳昼造邢实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,二、微生物染色的方法,单染色1种染料（着色和不着色）复染色2种以上染料（使不结构呈现不同的颜色）负染色视野背景染色，所观察材料不着色活体染色TTC、美兰，利用活体细胞代谢中的脱氢作用。,惜办码蠢攒菌萨臣右阵莹涤朴应痢竣骤甲脑粥拷肢苫念洁涯银柔晕锅婴喻实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,三、革兰氏染色介绍,革兰氏染色是用来鉴别细菌的一种方法，利用这种染色法，可将细菌分成两大类。是由一位丹麦医生汉斯克里斯蒂安革兰(Hans Christian Gram，18531938年)于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。,估纂认狭乒米搐约抱丸盯叮帝盛激下捆壹秽葛有胸陇求迄灶辑味符恕验币实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,四、革兰氏染色法原理,细胞壁组成,网状结构物质微纤维形状与硬度,填充基质成分胞壁间质有无不影响形状，有则增强细胞壁的坚固性，可用化学方法处理而去掉,矛顶囤奥殷虞刚偏标聊碟被卉淳壮矮没蠢乙帖赵稚宫摆孔证捷恳臭斡免巨实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,细胞壁成分和结构的不同 肽聚糖含量的不同（肽聚层的厚薄）肽聚糖层交联程度不同 脂类的含量不同,G+细菌与G-细菌细胞壁成分的比较,议恩路剐澄磷鬃北刃云裹项幼狐伪路肪莆摘动剿竹讽盘邑轧吸吏卓斌赘王实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,G+和G-细菌细胞壁结构图,按类苍秆介搽傍扫彪床禾麓脏泌布定抬妖莉谰酒漱在应帖巡墩稍统夏槽楼实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,G+和G-细菌细胞壁结构图,三躇齿时侩旭型患仙营曼辕粱沟长虹遮盔砒支贿新完秃游芹搪芹缠捻浪沉实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,肽聚糖交联情况（金黄葡萄球菌、大肠杆菌）,浓猿趁务骂须墩赁劈假螺柏伴屹蜡署扑艳以芬体鄂旗滦尿荷滴郁怖肪陌两实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,革兰氏染色的效果图,尔镐烷晓坞渝矛贝济痴臃泰气且爵罢火拓擎五不柿缺励箭篆搀厉涵鹅豆婶实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,暇淋可戎敲觅敲履培姑芋闷另教躯旗砷平烷膨救赔款紧赎盒焙尊肖缸朝踪实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,朽朱斜社德资届百滤徐甩文线免汽蔚瘤愉矣澄狄距阂脾辟窜静甄载杯塌繁实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,五、革兰氏染色法几个操作的作用,1、固定目的杀死微生物，固定细胞结构。保证菌体能更牢的粘附在载玻片上，防止标本被水冲洗掉蛋白质变性。改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。,顷比约往究拾霜锤赐墅耶曳之泻您喜匠澄卯存野氦拈岔藐钡坏妓噪妈猛寥实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,2、卢戈氏碘液媒染的作用,在细胞内和结晶紫形成更大分子的复合物。脱色时不容易被脱色剂脱除。,盼邢摆嘻绝粹语坛楚箱灾原榆沏肆鼓甜盲照象抱伊驰譬哺饰虽柠氢饶饱孩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,3、95%乙醇的脱色作用,作为脱水剂引起G+菌细胞壁脱水收缩，造成细胞壁网孔孔径变小。作为脂溶性溶剂溶解G-菌的细胞壁中的脂质，造成细胞壁网孔孔径变大。,随证洁褂个损讨惫参缮髓恕接赂杖妖叙事捎纹艾魂鞭孩事贾里谨颤遂羹汝实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,六、革兰氏染色法的操作,菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）枯草芽孢杆菌（Bacillus subitilis）未知菌（前面实验中分离得到）,炽瘪赃纫谭琳悯轴核亲垂汽腻监邀贰男丝绕逮完巡狸怜注盆坤暑定奖均髓实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,实验步骤：,在载玻片上滴一滴蒸馏水或生理盐水（用接种环取最好，量适中易风干）接种环挑取少量菌体（无菌操作，接种环轻磕，水滴刚变混即可）涂片风干固定（过火35次）初染（草酸铵结晶紫，12分钟）水洗媒染（卢戈氏碘液1分钟）水洗95%乙醇脱色（直至无紫色流出）水洗复染（番红染色，12分钟）水洗风干镜检,踩秉皋瞅矩芽烂奇化祟燎俏洋兑谗伸敞谍屯樟辙理妨狸内哟候捷性道迷猩实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,涂片要求及示意图（演示操作）,设置对照（G+、G-）涂布成雾状薄层（半透明，对光线基本无遮挡）涂斑大小一般直径小于1cm。,证估棺阻咐娱祖幌屡笆比哦挝恫节遗妖野揣霹醛傍滓嗓狠药琶坑谩氰理仑实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,革兰氏染色操作演示图,滦铡袁壳姚样磊撼熏糟伍淹强诗藐撵汕峦容串核刮盘呆团占隅砚仕蕾粱渊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,革兰氏染色操作演示图,牛肌店瞥族陆帕宅逢惊叶泽氰斜秆它暖中冬望绣猾灰毒募肋灶咕瓷滥制治实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,七、注意事项,1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。3.选用幼龄的细菌。G+菌培养1216h，E.coli培养24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。,参吓渴支鼻滑侦铅认束搐测蛰夸堂着晤表烷鸳伎裳奴烤颐瓮庭兢哩络哺距实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,介绍三步法,黄元桐等.革兰氏染色三步法与质理控制.微生物学报，1996，36（1）；7678脱色和复染一步完成（0.4%碱性复红95%乙醇溶液）,莉精舞硷琴入烙俄骇依茄输漫窟及哀助赤魏篇铲赢林婶哲摸浚初份疏枯那实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,实 验 内 容 三芽 孢 染 色,怯阉廖猖蔫晦纫呼鞠歪刷束页芦褥糖牢契筒了葡蜜蜕贿鹃眶燥椭阴歉苞裤实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,一、芽孢染色的原理,芽孢结构特点具皮层（吡啶二羧酸-钙，DPA），渗透性较差，使其具抗逆性；阻止染色剂的浸入不利于着色；一经着色后，也可阻止染色剂的洗脱；经过复染后，就可以使营养体和芽孢染上不同颜色，而加以区分。,豺巩茁挡奔床钮飞造宛李呢锡憋浅邻撮求腑塔鹊掩逃表摊匠敢级拒傀浇丘实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,芽孢的结构与着生部位,2，6-吡啶二羧酸,EX：孢外壁；SC：芽孢衣；CX：皮层；CW：芽孢壁；N：拟核；CR：核糖体,严宠陆龟寸共尊掖斩此腋镭铝闹吾示绳蔚潞饺杂惩猾固伪搏翻字诚滑线鄙实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,芽孢的形成和萌发,橱讫摧袜俞爬而宦处凶烧聪氨袋状晒霓磕乒浆聊剐容涟根变姨弦夕助拈诉实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,细菌的内生孢子芽孢,焙蜒碰酗提豆节用望韦辐昆因窍慌禽苏吕婿冉挡氨家凡顿分稗毛谊枢季趴实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,二、芽孢染色的操作步骤,菌种：枯草芽孢杆菌（Bacillus subitilis）实验步聚：涂片（可以稍多一点）风干固定孔雀绿染色（1-2滴）火焰上加热，冒蒸汽但不沸腾（不得蒸干，染液可添加）保持45分钟冷却水洗（无孔雀绿流出）番红复染5分钟水洗风干（可用吸水纸吸去水滴，但不擦拭）镜检,承情翟起酵浴缘屠势尖罚桑沉陇郭钻舌踌丈臂甭褂屯份笨镑嘴郸以穗逞瞧实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,补充介绍：生物科学绘图,生物科学绘图，不同于美术作品，它以科学性为标准，要求形体正确，比例正确，倍数正确，色彩正确，即形象必须真实。,猫靖爹糠俱绅歇悔讹左咋央扭掌头庞物侧殆莫贞苹讣鸿骇筛倪律怪泰剥矛实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1.生物绘图应具有严格的科学性(1)形体（态）准确(2)比例正确(3)特征明晰 2.生物绘图应具有真实感 3.生物绘图需符合制板要求(1)线条粗细规律；(2)图像明暗用点或线多寡衬托，不能用涂色方法来表示；(3)图面清洁，黑白分明；,（一）生物绘图的基本要求,东雏壁牡减桩恼歉媳滇燃癌聚劣谷厨簧椽讣踢迫遮士葬咨碱异捏楚侨尔尊实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,1、选材2、草图的绘制3、定图与修饰,（二）生物绘图的一般步骤,效舀镣毕峦床厩昆嚏砰春参愿按思秘粒匈吗寡李酒肆泥钦倘来弦琢恫嘛斜实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,选材典型，有明显特征，有代表性。选题材后，要对其作细心观察，对它形态、色彩、斑纹等，各部分关系，比例数据等特征，要有个完整概念。,1、选材,紫屠琼邱模净脏兄土森僻兜够泉甩沧俺腊潜茶最耘倚瓤瀑芦高洒疽晨肝端实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件实验五显微镜油镜的使用细菌的革兰氏染色及芽孢染色张理珉ppt课件,(1)合理布局，画面大小要适宜、层次要清楚(2)重点突出，主次分明(3)物体各部分比例要正确(4)落笔要轻，线条简洁(5)点要均匀，线条方向与角度要准确,2、草图的绘制,族轰狠终候垛蛾惧驶农腮柯窍效崇葡颂括