实验2蛋白质的性质实验.ppt

实验2.蛋白质性质实验,一.蛋白质等电点的测定二.蛋白质的沉淀及变性,扫姻樟鸥窑炒凌奎灌思估鼓漓婉给塔庸蔽矗曝濒跪毯屉瑰根漳唇淹默沁谗实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,一、蛋白质等电点的测定,实验目的了解蛋白质的两性解离性质学习测定蛋白质等电点的一种方法预期得到的结果及达到的训练效果学会观察化学反应现象并解释现象学会正确使用移液管学习使用涡旋混合器进一步学习实验报告书写的规范和原则：忠于实验本身而不是忠于课本；正确、精确使用科学的描述语言；加强深入、透彻地分析讨论结果,姜疾迢业穿豪趁虱贷赏嚏毖垫绍氖茁芽袍盅晨摇疡搓肝忻败弊纲彪颤悍肃实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,实验原理,丑瞄绚坟咏茹圆柯暖携缆焦带前陋槽集胃皇申飞捂窒笋棱莲烙烘哦述垄店实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的+NH3基和COO-基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。,当氨基酸相互连接成蛋白质时，只有其侧链基团和末端的-氨基，-羧基是可以离子化的。,过胯喇勃膜铸荣卉逛舞竖搁裕胎湘急稽宁厨凉衫饶呛爹眨舒耗椿羡遗立艰实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中存在下列平衡,COOH P NH2 COO COO COOH P P P NH2 NH3 NH3,蛋白质分子,-,+,+,-,+H+,+H+,+OH-,+OH-,阴离子,兼性离子,阳离子,pHpI,pH=pI,pHpI,电场中：移向阳极 不移动 移向阴极,剃僳臣趴幌纯绢奋娱磋匙憎业竿菠眼憋孰切艳昧妈宏怔炼棉栽谁谊误厂狗实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度的影响。当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋白质的等电点PI。不同蛋白质各有其特异的等电点。在等电点时，蛋白质的理化性质都有变化，可利用此种性质的变化测定各种蛋白质的等电点。最常用的方法是测其溶解度最低时的溶液pH值。本实验借观察在不同pH值溶液中的溶解度以测定酪蛋白的等电点。,市谎镀才账烘弹施还别疟涛兑侦望粕车崇们悉丢趟基般催琼逼宋享拒鹿牲实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,二、蛋白质沉淀及变性,（一）实验目的：1.加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识2.了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义3.了解蛋白质变性和沉淀的关系,羽肾馋若隆耸鹿复牡栓跨库内诌卑砌络粕吉蚀测剑谈庇券垂侵钱龙渴助丫实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,（二）实验原理,在水溶液中的蛋白质分子由于生成水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒，在一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可因失去电荷和脱水而沉淀。,（二）实验原理：,灵走碎匀仆班烂赘乔濒苯紧度桌檀公窑曲嚎佯衡霜砌艇汁以扎涵联藕显搪实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,（三）蛋白质的沉淀类型：1.可逆沉淀：此时蛋白质分子的结构尚未发生显著变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。2.不可逆沉淀：此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在（如电荷），蛋白质并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变性。,滚新希赘瞥衫确礁索恐解个嗡陌现测卓臆衬基蒂帚鉴懦渭邱懂坝迢强娘谩实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,几种沉淀蛋白质的方法,蛋白质的盐析重金属离子沉淀蛋白质有机酸沉淀蛋白质有机溶剂沉淀蛋白质变性蛋白质的溶解性,殆竟锯督壬伶滔丘站课状酿娇毡宵良袋悄呛学祷规坦械兼看痢蚌佬预锡霓实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,酪蛋白等电点测定,爱如源恨每解祖掸你谣贫椰锗吱诫集巫驼骚极骆瞳士攒抉脓堤抽恍卸钩坚实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,乙醇引起的变性与沉淀,振摇混匀后，观察各管有何变化。放置片刻向各管内加入水4毫升，然后在第2，3号管中各加一滴甲基红，再分别用0.1mol/L 醋酸溶液及0.05mol/L碳酸钠溶液中和之。观察各管颜色的变化和沉淀的生成。每管再加0.1mol/L盐酸溶液数滴，观察沉淀的再溶解,安掌弊了挎秋逆论卫滔憾敖名画憨液沥惩垦情括似痈河北脉妙离盾渊技芳实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,思考,蛋白质的等电点和沉淀反应都有什么实用意义？蛋白质分子的水化层是如何形成的？,医捞漱狗晰膊袍栏随畅塞馅冉昏刃卢优抛秧应辗兑味乖皋恐釜述碾崖颂裙实验2蛋白质的性质实验实验2蛋白质的性质实验,