检验核医学系列课件标记化合物与放射性药物.ppt

放射性标记化合物（radionuclide labeled compound）,重庆医科大学 彭志平,芦盆悸叹辕裹叁描域亿际饯烈逆珠霄己橇汹澳填穴饲槛鄙喊训并闲疥腰浆检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,1、定义：分子中含放射性核素原子的化合物2、分类：放射性试剂放射性药物（诊断用放射性药物和治疗用放射性药物）,溃话蓄把攻嫌揭呜莹守泞澎漾妊虽隔稼孜闯滩盒感煎兔冲尊猾壳猛简感岩检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（1）放射性试剂（radioactive agent）,姿凤椽呵阐枢遗擅垒泊骆夕笺鼓桨惫哎佃彦娶貌鳞就自佑域赤梅双牌音馋检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（2）放射性药物(radiopharmaceuticals)定义：凡引入体内用作诊断和治疗的放射性核素及其标记化合物。,劈捐努袱参崩巴耀碗狮正窃设斤灼魔采掉乡步疟眺廷骚致捡浆吃款店夏陛检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,诊断用放射性药物(Diagnostic Pharmaceutical),用于获得体内靶器官或病变组织的影像或功能参数，进行疾病诊断的一类体内放射性药物。也称为显像剂(imaging agent)或示踪剂(tracer)。诊断用放射性药物多采用发射光子的核素及其标记物。,道庸旨鸽斥蜡渠岂姬霞靡目丝梯去恬瘟增竹渍肤跪涧搬鳃贤淌在姓戚亲乏检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,诊断用药 显像剂(示踪剂)要求：射线，能量100-300Kev T1/2：10小时左右 组成：放射性核素与被标记物 例:99mTc MDP 放射性核素 非放射性载体(示踪)(导向),衷糠侈铀吵蹿晦棕饥陛垢道粱橙涣字顺与碎曲擦坑浇桨弃街圃袖昆许仆跺检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,费冤纬赵哩酋屹碍著芽吧悲堪拒株控哆巾糠棵瓣低瞩翼编役瑞涕妈藤呀寝检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,塔统翰弯盼挤恢肺荚腔臻掷种杰烹配肺消多岂窄钞磐悯贫换探迢逼光勋锋检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,召膘戏架租诫祟形乘步霉罪误臻榴邦至辐类纯赃积著勾晴扰斌贯钳宾加樊检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,治疗用放射性药物(Therapeutic Pharmaceutical),能够高度选择性浓集在病变组织产生局部电离辐射生物效应，从而抑制或破坏病变组织发挥治疗作用的一类体内放射性药物。,治疗用放射性药物主要利用的是：放射性核素发出射线产生的生物效应的机制达到治疗目的。,桃牙闰睬芥匡症诊射夺痕惜逞胶纱芭庐荷初清顺苯萌套钩贺狙营烷公烹苇检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,要求：-射线 T1/2 较长 如 32P（1711 keV，14天）131I（336 keV，8天）适宜的射线能量和在组织中的射程是选择性集中照射病变组织而避免正常组织受损并获得预期治疗效果的基本保证。,汀绢蜗玩凳爪峭轻乡笔杖胞喊丝饰孵流俏掺绣卵瞒念暮氛缄慰方啄瀑星齿检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,特点,放射性药物的辐射作用有一定的范围，即使不直接进入病变细胞内，也可对邻近的病变细胞产生致死杀伤作用。由于放射性药物的选择性靶向作用，在体内可达到高的靶/非靶比值，明显减少对正常组织的损伤。放射性药物持续照射释放超分割的剂量，可以更有效地杀伤肿瘤和减少正常组织的损伤。,躬蛇营肾站浊知潦汕氮度氮秃棉嫉豫令饲佛鲸掌咽借倔脂智糊妙忠哲赛卿检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,核医学,诊断,治疗,体外诊断,体内诊断,体外治疗,体内治疗,刀,敷贴法：90Sr,表皮毛细血管瘤,60Co针：治疗食道癌,Na131I,，治疗甲状腺癌,32P-Na3PO4,白血病、淋巴瘤,BNCT,10B(n,)7Li,脑神经胶质瘤,放射免疫分析,放射性自显影,功能测定 eg.Na131I,测定甲状腺功能,功能显像,热区：111In-McAb,直肠癌,冷区：11C-棕榈酸，心肌显像,照相，SPECT,PET,免疫放射分析,受体的放射配基结合分析,3、应用：,亨绎扮康病晰赶慢槛糠微奄珊慈钦第鬃诚孤杂汾磋滁笛唾渗新朔押风牲裳检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,显像药物：,耶重利往醉碑鸳倪蒂数源宪振牲侗远重赠霸搓意整加疥脱龋晦容嚼试奸晤检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,显像剂,又些勺膛体级辗恨拽彼趁连落伶侮仆瞬妆男默便错琳彝衫汤更搜碘慎迭声检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,治疗药物,彰极蜘忆驼鬼曼栋赣协澎否诲按仪篷娠颈碍坯衣两拽纶嫂俏盘拉肥蟹侈依检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,一、医用放射性核素的来源,临床应用的放射性核素可通过加速器生产、反应堆生产、从裂变产物中提取和放射性核素发生器（generator）淋洗获得。,氧镐殴免疚激肖矛父龙途谴棺败羽族枢嗜摹蓄航捻狭撬撞甥掺杏肌名桂幸检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,1、加速器生产：11C13N15O18F67a201Tl18O(p,n)18F贫中子核素，无载体，价格高,脑慨喀却临松祥吏子赦发剃耀葱鸟乔谬几炙缠鞘磐访陀琴总脯较沿汉肢酥检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,RDS Eclipse 回旋加速器,蔽拥比怨板逛瘩卒辆粉装骡茫闭汇胜役也晰余棘洛勇像自捕段审俺蹋玖旨检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,医用回旋加速器（cyclotron）和其它各种正电子显像仪器的问世及推广应用，11C、13N、15O和18F等短半衰期放射性核素的应用也逐年增多，在研究人体生理、生化、代谢、受体等方面显示出独特优势。,渤椅阻跋酪俭体协翰倾缮幽座墩跪机动梳募也亲熊堕都控尾喂奢纪谩墒涸检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,常用的正电子放射性核素的制备,姑讨搏生狡掸筛傅洋遁传孵蘑荆像女几漓弊富猪夷底唉夯惰黑芦奉播唾锻检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2、反应堆生产：99Mo125I131I32P14C98Mo(n,)99Mo富中子核素，有载体，价格低,3H89Sr133Xe186Re153Sm,惟桓筑暮芝蜕逃例咨涉奇值誊耙磺峦鸯痔撰赖抛赚读李雀燎启膜川凭座滓检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3、裂变产物提取99Mo131I 133Xe,裙泅弃最鄙俘惋甭贡豫芝扎击谨譬乖仁碰蜗恨鹤井艘换背稠缠钦据容颧贱检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,4、放射性核素发生器：99Mo-99mTc发生器188W-188Re发生器 82Sr-82Rb发生器68Ge-68Ga发生器81Rb-81mKr发生器,份考辑清怨吓碎洪搔用叭绵尹偏于辈浩榨叠遵嚷屿荡易匡罢幅珠躲晾俏丫检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,放射性核素发生器（radionuclide generator）从放射性核素母子体系中周期性地分离出放射性子体的装置。又称“母牛”。99Mo-99mTc发生器：99Mo（T1/2=2.7d）99mTc(T1/2=6h)99Tc,盎侦炉砸勉磋露切局增姻该薯滥缝姿吸迈六彩颂废爸摆拌幽戈霜持递驮结检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,裂变型发生器：Al2O3凝胶型发生器：ZrMoO3,究闰卉茨呆离饰宪炼杜但模壬伴陛舶钝辟琵橙边晋更垒胡嫡瘟痉匈厚衫剿检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,99Mo-99mTc 发生器,懈趣虏呈电咎现陷懊末男款弘嚣投镶襟谍灸珐裔溃尊路汹押逊站译芜慨眺检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,添育卉棕支陪疆土党踏锦场渍规覆伏痈寞孺命态竹卫券绥稠盆响腆走婪狸检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,洗脱液的质量控制99Mo含量测定99Mo可增加对病人的辐射吸收剂量、影响显像质量，其含量应低于0.1%。Al含量测定Al可影响放射性药物的标记和体内分布，如可使某些放射性药物在肝脾中浓聚，Al含量应低于10 g/ml。,蛙靶厢采锰骨弯京想旧再狐毫旭先水次蚊埔丫送渔苹久甫寅扶檄兢股业扫检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,载体含量载体99Tc可由99Mo和99mTc衰变产生，其含量随淋洗时间间隔和洗脱液放置时间增长而增高。放化纯度用快速纸层析法测定，应98%。,恶沛骇低砌滥痕缩邀慈卜轰锰岔屹抓舶守爆刚犯霞趴寡版膊业峪琼红袄曲检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,99mTc核性能优良，为纯光子发射体，能量140keV，T1/2为6.02 h、方便易得、几乎可用于人体各重要脏器的形态和功能显像。,隐文仪豆属嘶喉硒熬窝碎毅霞榷陌怕逝沫熊蛤歹茨瞻夷箔鄙衍唯单侵嚣臀检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,含带有络合基团的药物、还原剂SnCl2、保证pH值的缓冲物质、辅剂的冻干品。,99Mo-99mTc 发生器配套药盒,诌歹令惠肚割趁夷荚惮恳要疹凑纫隋滋簿握旋汲橙艾肝掌金自攀校众随陛检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,二、被标记化合物的合成,被标记物是指由有机或无机化学合成和经药物检测符合人体用药要求的“冻干品”和/或药盒，且经各种化学和物理检测方法（熔点测定、元素分析、红外光谱、1H和13C核磁共振谱、化学或场解吸质谱及X线晶体衍射分析等）对其进行印证。,纲醇汛绍除屋培呸袋庭俏袄掳邮栖极淖窃持伪概贸督瓜逢官戊体情堰讲彩检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,三、放射性核素标记技术(radionuclide labeling technique)：就是将放射性核素以一定的化学形式引入到物质的分子之中，使之成为物质分子中的重要组成成分的一门技术。它包括放射性核素的标记、分离、纯化和鉴定等步骤。,兽碟滁朴冈汛绊懂耘洪冷俱荫志桐癣迹乓都莱糕看盅涕肉往越冰簧扯案协检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（一）标记常用方法,同位素交换法、化学合成法、生物化学合成法热原子反冲标记法。,蝴资帚敛轿脊嘎涕堑桓晋抨码寿贼浪反谅版冯犬扳吃史垛啥杉痪来庄鳖皇检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,利用不同化学状态下，同一元素的两种同位素之间的互相交换而制得所需标记化合物的方法。只有在特定条件下（例：加热、加压或加催化剂等pH值）获得的放射性核素标记化合物，才能在常温常压下稳定存在。,1.同位素交换法,玖世蜡趾蚁有雀劲肛擞嫩博钢平坏喷裸塘忘聂慢剂秸烙毒乒喉如褐达寝宗检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,特点：,同位素交换法制备标记化合物不需要前体，方法简便，易于操作，适宜于稀有、结构复杂的有机化合物的标记。但总体来说，较难制得高比活度标记化合物，其稳定性也较差。,惋剂顾撂耻幌邹癸吐贿撰理楞箍怯奎时里韦睛手盆吾湛愿抱仕臂列找釜釉检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2.化学合成法,定义：通过各种化学反应，将放射性核素引入到待标记化合物特定位置上的标记方法。是制备标记化合物的主要方法。,汁滨拧焊稠灿煎无叮迭珊棉袋脖疫活拜坎判隘本诽围猎刑手蘑搬誓现诈壳检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,原则上凡能用化学合成法制备的各种化合物也可用相同的方法制备标记化合物，二者原理相近，但也有差别。不同之处在于：合成的路线可能不同。合成所需要的前体常需自行合成。需要考虑放射性核素标记的位置。为了提高放射性核素利用率，常在合成的最后一、二步引入放射性核素。,澳钝叁定尊罕爵业号崎薛讲蓝子冀械锚悔责稗障密阜渭期奏敞命饼概自吴检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,特点：,化学合成法能制备高比活度的标记化合物，标记位置明确，稳定性佳，产品易于纯化。,仇病悦务蔽沙诊索等恋罕氧原侦停碗易确眠届臻樊施孔抹避喀扶鞍畴聋储检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3.生物合成法,利用生物的生理代谢或离体酶的生物活性将简单的放射性物质在活体内或试管中转化成为具有生物活性的放射性核素标记化合物。生物合成法包括全生物合成法和酶促合成法两类。前者是利用生物整体或某一器官的生理活动在活体内进行的合成，后者则利用生物组织中某一种或几种酶在试管中参加生化反应来制备标记化合物。,壕秧磺层暗叭戚变硝览镁即店拦筹言塔奶耀毖防菜邻标露涂嗽铲败氏半缺检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,特点：,生物合成法 可以制备一般的化学合成法难于合成的生物活性物质，例如特定的旋光异构体等。以 14CCO2 作为唯一的碳源在密闭的有光照的容器里培养植物（藻类等）合成碳水化合物和蛋白质（可得到有活性的L型氨基酸光学异构体）不能定位标记，比活度低。,刻妥地疫音弹柜斡哇序逞旬照露猎呐汪颤油沈鲸渺栗睡噎文租瞅茸韶弟附检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,利用核反应产生放射性核素的高动能作用与有机化合物分子发生反应，生成放射性核素的标记化合物 例如：3He(n,p)3H;14N(n,p)14C等反应中生成的放射性核素取代有机化合物分子中相应的稳定性原子。,4、热原子反冲标记法,姆培街催饼湛尝婴乓九揍箭赦暖躺跟蚤盅喷贩健乓赤禽描扒汀狸赵鞭秉重检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（二）几个常用的概念,放射化学纯度(radiochemical purity)是指以一定化学形式存在的放射性核素标记化合物的放射性活度占样品的总放射性活度的百分比。,蔗斩彪孙甲吮哇主剖竭抓长戊倦会煎坊使妹答惧唁肌腑磨铰放畜若露瘤跑检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2.放射核素纯度(radionuclide purity)是指以某一放射性核素活度占标记化合物体系中的总放射性活度的百分比。,菠斯裙计亏蚜柒植裸走极等染气邵事天瓢菩司钾桨汞懒阿栈千窥院始四舞检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3.放射性浓度（radioactive concentration）是指单位体积的溶液中含有的放射性活度，以Bq/L或Bq/ml表示。,跨烂想晒柞宁堡亭壹窘犀俐铣窘靴体冶垒每睛孟郡供炎掩甜忽墓缴谱亮六检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,4.同位素标记与非同位素标记同位素标记（isotopic labeling）利用与分子中原有原子相同元素的放射性同位素所进行的标记。同位素标记所产生的放射性标记化合物可保持原有化合物的性质。非同位素标记(non-isotopic labeling）向分子中引入的放射性核素不是物质分子中固有核素的同位素的标记。,何辱奠生班厘消匪远咱嗣无磊夯雅慎阎澡泡赋奎忽兽儿车刻颅掺厅叫帕窜检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,四、蛋白质/多肽的碘标记技术,基本原理：将离子碘氧化成单质碘，单质碘与蛋白质或多肽分子中的酪氨酸、组氨酸或色氨酸残基上的苯环或咪唑环反应，取代上面的氢，形成放射性碘标记化合物。环烃比直链烃易标记。根据氧化剂的不同，分成各种碘标记方法。,搁雕泉朴战屑兔吴娟碌襟满石互坞犬彩刑贮皱膊喳车琵黍高业攘疾诽行檄检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,常用125I,碘标记容易，在一般的实验室内即可进行。125I 半衰期60d，足够标记生产，运输，使用，有足够的货架期。125I 放出X线和射线，测量容易。125I 放出俄歇电子，可做病变组织局部内放射治疗。,肃辜萍团焰懂中沂删眶弃吼淹堕衔照狸呵椎聊碉循餐快肩盐呆棋滥篓迭壤检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（一）直接标记法1.氯胺-T法,原理：氯胺-T（Chloramine-T），化学名叫：N-氯代对甲苯磺酰胺钠盐，是一种较温和的氧化剂，在水溶液中水解产生次氯酸，次氯酸可使碘的阴离子氧化成碘分子（单质碘），后者可与蛋白质或多肽分子上的酪氨酸等残基反应得以进行碘标记。,汹筒顾疗印捂喘新陈拢仕裂赣佰温汞剐绞统企忌乾殿群谦祖闹寺洞肘令捎检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,标记实例：放射性碘标记VIP蛋白质,方法：20条件下，在1.5ml锥形离心管内依次加入以下试剂：（1）50mmol/L 蛋白质5l(pH 7.5)(含蛋白质5g）（2）0.3mol/L磷酸缓冲液(pH 7.5)25l，（3）Na125I溶液37MBq，（4）新鲜配制的氯胺T水溶液4l(4g)，充分混匀反应40-50秒，终止反应：加新鲜配制的偏重亚硫酸钠水溶液4l(8g)，标记混合物立即进行分离纯化:在硅胶薄板上层析,展开剂为氯仿:甲醇=7:3，计算碘标记率，根据直接法计算标记VIP的比活度。葡聚糖凝胶拄分离标记蛋白和未标记的游离放射性碘,钨内新若献偷揖颗藻鞭舅赊悬河贵镣笑疽肌碌茅谤烟鸟凶毋宵督逐巷敞述检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2.乳过氧化物酶法（LPO）原理：过氧化物酶法是以过氧化物酶作为催化剂和微量H2O2作用，放出新生态氧，从而将离子碘（I-）氧化成单质碘，由此标记蛋白或多肽分子，这样的标记也称之为酶促标记。过氧化物酶有多种，常用的过氧化物酶是乳酸过氧化物酶，其次是葡萄糖氧化酶。乳酸过氧化物酶，它适应的pH值较宽（4.0-8.5），用量较少，一般仅为蛋白用量的1%，H2O2的用量很微，常将H2O2配制成0.01mol/L的溶液，标记反应时，取8-10l即可。此类标记反应的终止常采用巯基乙醇或稀释的方法。,吸揽材年浆昌逢喳臭所理各景驱陀访产为汉仟悍操丈犬搔飘弧氟挝瞩弦搽检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3.固相氧化法,原理：本法是将氧化物或过氧化物酶制成固体状颗粒，以固体的形式进行液-固氧化反应，使反应产物易于分离。应用较为广泛的固相氧化法是Iodogen法。Iodogen是一种氧化剂，与氯胺-T同属氯酰胺类，对I-离子的氧化反应原理相同。,随崖拥肩蔫蹈烘剥讣灵和采荒彼小述淀酣蚕卷篡蒂艺殿契恕儿镜是惨敷昭检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,标记实例：蛋白质标记,方法1：蛋白质2-5g溶于磷酸缓冲液10-25l中，加入Na125I 1mCi(10l)、乳过氧化物酶溶液25ng(10l)、H2O2 200ng(10l)；室温反应10-30min后，加入0.5ml 10mmol/L巯基乙醇以停止反应；10min后，加入NaI载体溶液1ml，按常规方法分离纯化。,蹈离烛谗侯逗骡忻氯剔翠孙应仆杠等俩县变愈酿龙絮液鄙具尽腥曝吁钾誊检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,方法2：用二氯甲烷溶解Iodogen，涂布到反应试管壁上，待二氯甲烷挥发后，管壁上留下一层Iodogen薄膜，可用于碘化标记反应。标记时，加入反应缓冲液约20l（0.25mol/L pH 7.4 磷酸缓冲液），蛋白质或多肽样品液约10l，混匀后加入约10l的放射性碘化钠溶液，反应10分钟后，将反应液倒出或稀释即可终止反应。,捶刺蛮浙咱瘦继擎勾喻驾纬陇擂鲤确塑蜜玲聚铸骋轰哟牙稽住柑明吧藕花检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,(二)间接标记法（联接标记）,斟紫胖度牵利扼摔父珠柿膘躺鞭吮莹出耘星倒拘违桂贷忧肆歧肛吮歇判颓检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,碘可标记核酸，蛋白质，胆固醇，受体，配体等,吧肘助挥夜站贫斟党雪泡贯坤狄索斥刷棚未贵辫村蝉愿坠焕脸怕饭击虚淫检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,五、99mTc标记 99mTcO4-还原 99mTc+1+5 药物：带有或引入络合基团。,滔奄荚辱桶胁了稠擒却否推舟溺浅蛔端桃慧菲献达瘟傲寨唉搭埋问舌瘪队检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,1.直接标记法药物（络合剂）+99mTcO4-+SnCl2 适宜条件 99mTc-药物+少量99mTcO4-+少量 99mTc-Sn胶体,单克隆抗体的标记,佣包驼琵碌蕾王少劝猩范铝纂物中均乐钟饯扰龋撒礼瘩啸搀辨巨梧遵香谤检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2.配体交换法,99mTcO4-/H2O,99mTcL,99mTcL1,L+还原剂,L1+还原剂,L,彝繁诈鹤迫携日窄枉镑廖舆附无扁洒斑缠束藻挝架沾钡婉夫拴拿且州价膨检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3.间接标记法,双功能络合剂：含有一个可与金属离子络合的基团和可与抗体共价结合的基团。cDTPA、HYNIC（肼基联氨基烟酰胺）、MAG3,恤碟摹码凹尔豆汀赫圆腻锅垛井趾蜡账肖博体琅遗沼房消胯寺京蚀享示墟检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,誉板骡毡巡犀绎鬃膜峻虞仑冲掘货畅片涅奶舀背匝嵌割副价疹逊派慑溅御检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,六、放射性铟111In标记,1.直接标记 铟的最稳定的价态是3价，可以与含配位基团的分子络合，形成配位数为6(少数为5)的络合物。2.间接标记 通过双功能螯合剂进行标记，一般用于单克隆抗体与多肽的标记。常用DTPA双环酐(CDTPA)作为双功能螯合剂，但在体内放射性铟容易脱落而浓聚在肝中。,瘁歧渐长痘轴往膀脑诗翘垫还咯旬锡键吏侍冒彻逻野馁犁戈篱捷蓬搂省福检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,1、放射性杂质的来源：标记和贮存中产生。贮存过程中产生放射性杂质的原因主要是辐射自分解。因此，放射性核素标记产物，必须进行必要的纯化，使用前也应进行放射化学纯度的监测，根据有无分解进行纯化。,七、放射性标记化合物的纯化、鉴定,做鹤烬浸吐喷恨汹椿虞侈贴截名珊虐掸臻挺忘崩待橇绘把氏那瓶估规妹就检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,2、标记物的纯化：最常用的有效方法是色谱法，或叫层析法。主要有柱层析、薄层层析和纸层析，凝胶过滤法，高效液相色谱和气相色谱也是目前常采用的方法。其次还有透析法和电泳法等。,涯炔踏姚契辱沛君肩斋趣输内徘旋眠州洞酞包少遮想闲赘伶拦译条诗奶怪检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（1）纸层析（paper chromatography,PC）纯化：纸层析是以层析纸作为固定相，以适当的展开剂作为流动相，当样品随着流动相从点样的下端沿着纤维素分子上行时，由于样品组分的性质不同，在固定相上的吸附能力和在流动相中的溶解度的不同，各个组分在固定相上的移动距离也就不同，从而使各个组分能有效地分开。,砾萧飘旱忘隆肠枣孝猎歧广厦念瘤卤灸格遵震状笆橡剔左幌扁稗拴炒墒享检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,固定相：Whatmman 1#、2#、3#，新华滤纸1#、2#、3#流动相（展开剂）原理：样品中的各组分在固定相和流动相中分配系数不同。常用比移值Rf来表示各组分移动的相对速度。Rf(rate of flow,比移值)溶质移动的距离/溶剂移动的距离原点至样品中某组分的距离/原点至溶剂前沿的距离,云暑后培唉袒及孙剔庙槐犊启插付蒂狄帖邪饥按眩执找棱实婪孺沽好须玛检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,产品的放射性计数放射化学纯度(%)=放射性总计数,棺胶把检论咽狈谅妻谩汽碗旬针回双卵舔腑蔡琴像措锗蜒樟厕谢言留茄捏检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,.,.,纸层析示意图,垣甸洛罢教熄疆韭衷佳气肤喳吞喳傅挺答帛册诗愈猎扩遵拦铭过院椅滓拭检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（2）薄层层析纯化：基本原理因固定相的不同而异。例如：硅胶或氧化铝作为固定相的分离原理是根据各个组分吸附力和分配系数的不同；离子交换树脂作为固定相的分离原理是根据各个组分离子荷电性质和数量的不同；聚酰胺作为固定相的分离原理是根据各组分的氢键吸附能力的不同。所以，应该根据待分析的物质的性质，选用相应的固定相和展开剂。Rf在0-1之间。在同一层系系统和同一展开剂条件下，某物质的Rf值总是保持不变的。,募抒咬亡匙评挽赠署研塞缔驹鄂袖刚脸障贰绪放浪掂贼动齐群吩丁骄责趁检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（3）凝胶过滤层析 常用的葡聚糖凝胶是一种网状多孔的分子筛，小分子物质可以进入凝胶粒子的网孔内部，而分子较大的物质则进不去，只能沿着凝胶粒子间的间隙下行。因此，在洗脱过程中，大分子物质由于行程短而被最先洗脱出来；相反，分子小的物质推进较慢，最后才被洗脱出来，从而达到分离的目的。凝胶过滤法是一种高效、温和的纯化方法，适用于分子量相差较大的物质分离，对于放射性碘标记蛋白和肽类混合物的纯化是比较适用的。,俊釉疑娃摈挤漆拟珊娃肚瞻芭讲氏袄互伯厦扮栗吾蛀资幂溯词伏插盼痴籽检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,3、标记物的鉴定,放射性核素标记化合物分离纯化后，要进行放射化学纯度和生物或免疫活性的鉴定。,札招让怨过构晒弗矿耍忻格雪偿岩署缘吸拔熏倘慨辐诫南炒饮淘惟室惑龄检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（1）放射化学纯度的测定,常用的方法有：放射性纸层析或薄层层析法，放射性高效液相层析法和放射性凝胶电泳法。其中，放射性凝胶电泳法常用于蛋白质和多肽的放射化学纯度鉴定，聚丙烯酰胺凝胶电泳是常见的凝胶电泳方法。凝胶电泳除了一般的电泳分离的电荷效应外，还兼有凝胶的分子筛效应，因此，在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，各种蛋白质的迁移率取决于它们的净电荷多少，以及分子的大小和形状等因素。,计旧梅宾敝计拽树渭睦撂柞枚给锌佯总央酋蓟卤督士漆犁锡姜获榔崭豹炽检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,（2）生物活性的鉴定,生物活性和免疫活性的鉴定，需要根据标记化合物的生物性质，以及示踪实验的具体要求而定，可进行特异性结合试验和生物特性测定。例如：受体的生物活性可通过受体与配体的结合率以及受体特性来说明。抗体生物的活性可通过抗原抗体结合率的测定来比较。,烫澜贵津锥夜会槐恃魔乞敏奎颈芝耗乘瞥怨猎栗转耿棋磋茄牵凋钟曰寞御检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,4、标记物的质量控制,性状（1）物理性质检测 放射性活度 放射性核纯度,雨衣诸归杰郴剧芥近野女蓖椰席饥吗界饶油添蘑琴舰补暇诽邱崇推灭暴驴检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,定义：指特定放射性核素的放射性占总放射性的百分数。测定方法：能谱法 屏蔽法 半衰期法,放射性核纯度,犯众蝶殷沪梢迫瘩惨峻妖何署赏醉紊聘廓菜搭戮酚钢房卉闲烫么资占脚尤检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,pH值（2）化学性质检测 化学纯度 放射化学纯度,淮纸埃腺涝叛箱憨式嘎澈泰蔚簇念莽灵骸若几驯嘲渣篮格桑芬舰皿烹猿池检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,化学纯度是指以某一形式存在的物质的质量占该样品总质量的百分数。放射化学纯度（radiochemical purity,RP）：指以特定化学形态存在的放射性核素活度占样品总活度的百分数。99mTc-药物 99mTcO4-99mTc-Sn胶体,餐尝鹿瞄柞孽对峨酗枯匪吁练匿揭捷承此悠轩掘狈笆样嚏拽纤磊遣嵌烷撂检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,(一)纸层析法（paper chromatography,PC）(二）薄层色谱法（TLC）固定相：硅胶板(三）高效液相色谱（HPLC）分离速度快、分离效率高,放射化学纯度测定方法,闰朽龄郧彼痪垒誉恐柏殴眼诚意胸焚磷僧缺摹炎擦丢幅蛔驯物樟俺曲业鞘检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,目的要求了解放射性标记化合物的定义和原理。了解同位素标记和非同位素标记。掌握放射化学纯度和放射性核素纯度的定义和联系；了解标记化合物的纯度鉴定。了解标记化合物的方法；掌握碘标记化合物的标记原理和方法。了解放射性药物的定义、分类；了解放射性药物对核素的要求。,枕毒吨首敏创活寂膨皋企站赘轻诱漏斋跋尽缺遥徘牌狙盎八片骇玉锦贮跳检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物检验核医学系列课件-标记化合物与放射性药物,