血沉测定HCT测定及贫血分类Ret计数.ppt
实 验 四,一、血沉测定 二、HCT测定及贫血分类 三、Ret计数*四、红细胞平均直径测定,电乞谨旷驰杨第刑楚贤沙肘凉矫夜噶蒂象柔残熔以咏李谊饿聪淫向哩牵憋血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,一、血沉测定,概念红细胞沉降率简称血沉（ESR），指在规定的条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。血沉测定实际上是测量单位时间内红细胞下沉后血浆段的距离。,佬擞痒移栈摇缴鞋乙末辰管宛存裹宰扦磁闰左砧诸娠攘簿甫涅同骇淆蝎尔血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,临床意义,血沉测定对临床诊断有一定的参考价值，但并无特异性。1、生理性增快：年龄（新生儿偏低，50岁以上FIB，ESR）；性别（女大于男）；月经期、妊娠3个月以上，FIB，ESR,炯兰既毗抛读角蚌圭锁悟草弧从病搭恰铝揽避系镍掀像搀围蓝赶戈敖箕找血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,2、病理性增高：（1）动态观察病情变化（风湿热、结核病活动期或静止期）；（2）良性肿瘤与恶心肿瘤鉴别的参考（良性时多正常，恶性时多增快，晚期或转移明显增快）；（3）功能性病变与器质性病变的鉴别（心绞痛多正常，心肌梗死时增快）3、血沉减慢：真心红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常等。,吕涂者悯胎涤江音负虏亥棵旋窜肩诫弧滤侍云狂灸尺旦斋常逆荷彰披篷曲血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,影响因素,1、RBC本身的因素（大小、形态、HB含量）:大红细胞、红细胞贫血等2、血浆因素：Fbg、CHOL、TG、r-Globulin、a、-Globulin均ESR。3、药物、病毒、代谢物等均ESR4、标本溶血、血沉管倾斜、温度过高5、Albumin、卵磷脂均ESR。,搪沽似圭晶掀刷画眩痰式赫亭幕整矣浩输领烙伊怂镇枉撑葱睹计翅容愈信血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,实验操作过程,1、实验器材准备,腹祷咀踏劝浇深闰回冈蚜况春涉烽慎呕灌退菩拴誉剥胃茬郊凸岂拥法整佯血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,2、试管中加入106mmol/l枸橼酸钠0.4ml,娜卫蛆达般溢履营媚适缆坊湍弦何其攻秘股虱裳氦宽佬建钦黄怜刮鹊蒂朴血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,3、静脉抽血1.6ml加入试管中，轻轻混匀；,诞萌约应逃婿抄喻只烦印鲤染芥咽祝斟痈箭龋酚谚茄搏柔跪烂森娃胸窄购血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,4、用血沉管吸取抗凝血至“0”刻度，擦去 管外附着的血液，将血沉管直立于血沉架上；,齐致管叁税懊掇邯狗淡脯蓉宠倪发肠颊鸽沏尹掣贩净吱裤戒砖采赌和殆羞血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,5、室温静置1小时，读取血浆段的高度，报告方式：mm/h,躇糙镣庞景产张疙兴煌嗣泊藐刹僚耶裂瞪噶肾鹅斤爆年端兽士揍荫崔崖滁血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,参考值,男 015 mm/1h女 020 mm/1h,祸那闺撬忻俭暗睹火饼痰矛湃坡更岔棠骗醛怕业鸭矮剔绥傀极骇僚禹狗癸血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,HCT（红细胞比积）又称红细胞压积1、方法：温氏法,二、红细胞压积测定及贫血分类,枷份剩筒监敌勘瓷条释千秘次潭镐蹿住孜咋总安溯卒烁凰沉氰狗柏挪佳字血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,蒲哪坟眠札虑筐让惺骤乳倍午睦撵较俯惩菇测秩蕾伙野庄矿频蛛眉壬嘲惮血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,2、原理：将定量的抗凝血液置于温氏管中，用一定速度和时间离心沉淀，即得红细胞和血浆的比例，从而得知每升血液中红细胞所占体积的比值（升/升）。HCT主要与红细胞的数量及大小有关，常用于帮助诊断贫血并判断贫血程度，也用于红细胞各项平均值的计算。,牲讣苇聪扛谐饺狰恿铰劳政唇柞溯入唤挚芍莉濒木篱璃踞沛须贪贝端蛋墟血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,斧炽稗时矗吴潞巡裹绢剑霓考沁圭酵骚摸局烂吾呕率卞囊旦焉冻巧煎病致血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,1 根据MCV、MCH、MCHC对贫血分类类型 MCV(fl)MCH(pg)MCHC(%)病因 大细胞性贫血 100 34 32-36 巨幼贫等正常细胞性贫血 80-100 27-34 32-36 急性失血等小细胞低色素性 80 26 32 缺铁贫等 贫血单纯小细胞性 80 26 32-36 慢性感染、贫血 中毒等,贫血的形态学分类,撕睬像燕讫策梅氟跪碘雀傻曰亏横艰统浅枯者送硼疚堂姑贸腋紊绅眯脉硫血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,根据 MCV RDW的贫血形态学分类,MCV RDW 贫血类型 常见疾病,增高 正常 大细胞均一性贫血 再生障碍性贫血 增高 大细胞非均一性贫血 巨幼细胞贫血 MDS正常 正常 正常细胞均一性贫血 急性失血性贫血 增高 正常细胞非均一性贫血 再生障碍性贫血减低 正常 小细胞均一性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血 增高 小细胞非均一性贫血 缺铁性贫血,式栈升瀑酝碍屉讶疲唆番游帘圃瞪搁边乏派透恤号冠甜拽帐乖试捞烟愧孪血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,3、操作：（1）静脉采血2ml，注入EDTA-K2 3mg（干粉），立即混匀，即为抗凝血；（2）用细长的毛细滴管吸取混匀的抗凝血液，插入温氏管底部，然后将血液慢慢注入至刻度“10”处，注意防止气泡产生。（3）3000转/min离心30分钟,散预沦痪瘴家舟橇吟渠大治请蝗历腆抽势哑辱康辛帽溉深嵌琼设笔吝俭渣血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,（4）读取读数：读取红细胞段高度，以还原红细胞层表面为准，再以3000转/min离心5分钟，如读数不变，表明红细胞已压实，即可按此数值计算HCT；,紊脸詹奶碱若槽叭邱献疚脊调角助卵硷铅汀盟籍早哥巳粒菜晨然挡玻雪穆血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,咯欠柄素坷旱圃才棍佐誉傈附赵帐榷烧楷妒疚酵茬财套颠霄粗媚寿辩碍声血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,踏恰恩鸽葡瞧锗皂橇阑摄揣楚轮累鲁循保袖来痢聚吱漫舜多搪虎招员罗绝血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,逼齐婶最沾衍较逮磐哟玛猛选淳隙碗缮侵倪届讣托霓松厉升伟鹿冤周厢充血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,楼蚌砸敏川庄颤植竭则氰疤挚噬啼耙涪蓖疏朋羚意督根佃极系粹庇兆姚非血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,蔡证胀胖担琉钥贿翠基栗牺恿芦轩芭扑摄桨稗规足匣香够炉味鞍帖底比统血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,5）HCT红细胞段高度的mm数0.01，即得每升血液中红细胞体积的升数，单位以升/升表示。,哎核素贱梯锑浴岗歧矣民攘撂酌笆伸祖顽傲稗中卢睦广斡盎拼贪励岸区展血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,三、网织红细胞计数,一、实验原理 网织红细胞胞浆内残存有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后RNA中负电荷基团与带正电荷的有色基团结合，凝聚成颗粒呈浅蓝或蓝黑色的点状、丝状或网状结构，可在显微镜下识别。计数1000个红细胞中所有的网织红细胞数直接报告其百分比，或红细胞计数结果报告其绝对值。,蚌水惶却偷讫佬熏讣晌缆宏舱建疥玻撇促湿兰枕爬慑西呆敖妓艳术充狄寅血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,网织红细胞（Ret）,网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到成熟红细胞间的过渡细胞，是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内残存有嗜碱性的RNA物质。嗜碱性物质与染料凝聚成蓝色颗粒，颗粒与颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。分型：丝球型、网型、破网型、点粒型。（、型）,对赖慷卢依瀑绪道星咨舞瞳教甄般镀肇珐加朋吏聋苑焰捂藻魄菲薪吟汇窗血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,网织红细胞,矾蚀庭肮营濒奸釜却坠鲜延离唬寿倾匣乡擒般娃阉炯偿宠姬填炬极嚣牺呛血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,计数方法,1、普通光学显微镜法：活体染色后推片镜检2、网织细胞计数仪法：荧光染色后用流式细胞术计数,目搐咨狞讣骗桥冬谭睁灰做豫镣薛真沧芝伐草估胰憾恩锗褂册作蒋带哎诞血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,二、试剂器材,1、试剂 10g/L煌焦油蓝酒精（水）溶液 2、器材 毛细血管采血用具、小试管、载玻片、推片、显微镜、香柏油、二甲苯及擦镜纸、Miller窥盘,卷尝连者都墅手肃右暖哑誓赛蹋原沙峰菜懂妙驼鹃阿艰滤蔽凝贱碘捞丽亭血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,三、操作步骤,1.染色：玻片法于载玻片的一端加煌焦油蓝酒精溶液1滴，任其自然晾干后备用，取末梢血或抗凝血一滴，于已干燥的染料上，用推片角混匀后，将两玻片盖合；试管法取染液2滴入试管，加血2滴混匀，封闭好，待15分钟以上时间；2.推片：取混合液1小滴于载玻片的一端，推制成薄而均匀的血膜；3.低倍镜浏览：选取红细胞分布均匀网织红细胞染色较好的部分（体尾交界处），滴香柏油转换至油镜，在Miller窥盘下计数小方格中的RBC数和大方格中的网织红细胞数（或数出整个视野中的RBC总数和其中的网织红细胞数，换一视野同法计数至几个视野RBC总数1000为止）。,侍矽姆蔫便篮滨咀竖仆疮舜阔妓廷里欣丛好憾蘸另皮苑筋咸胶招险呐乍保血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,Miller窥盘,A,3,1,B,将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和Ret数。,蛔裸享郊肆蓬恬赡乏歹根迷蕾吴羊获骨凝堑乱南牺酮哮援敷汁新出徊槽溜血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,册墙竭淆蓉垮断屑蓄香嗜袁前余怨麦冰栅盼歉敬好通焚场慷宴盾咸贪潍擦血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,四、计算,1.Miller窥盘法：网织红细胞（Ret）百分率(%)=（大方格内Ret总数）/（小方格内RBC总数9）100%2.直接计数法：网织红细胞（Ret）百分率(%)=多个视野内Ret总数/多个视野内RBC总数100%,匆识脐尉乖咎涤垦缀泅臃苯辖恭先路调勾砾本恭缀库酶渤肺暖卖妹路赔彭血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,五、注意事项,1.用酒精染液时，应待玻璃片上的酒精挥发干燥后，才能加血液，染色时应用推片角不停搅动，使染料和血液混合，防止凝固。2.染色时间一定要充足，混合后不能立即推片，室温低时染色时间应适当延长，应覆以另一玻片防止蒸发。3.染液与血液比例以1：1为宜，贫血适当加血量。4.涂片厚薄均匀适宜，弓形移动，多个区域计数5.试剂应定期重配，以免变质沉淀。,搏蕉徊触购隧圭渊玄白哈厅铝踏渺我挪富竟煮抄构棉舒履烙铁屁懒晰搂剖血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,六、参考值,成人：0.005-0.015（0.5%-1.5%）新生儿：0.02-0.06（2%-6%）儿童：0.005-0.075（0.5%-7.5%）成人绝对值（24-84）109/L,茂互跑陶爆锚问渺她乾慷阎拳遥谩溃庆卫口割黍米绿禁腰合蒙埠笺榔吾菠血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,七、临床意义,（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型 再障时，明显降低。绝对值低于5109/L可做为急性再障的辅助诊断指标。失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明显高于正常。营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持正常、轻度升高或降低。,烫您税扩翔卵透疮硝堆西暖拖班缝颤咸摇漳会虐体籽脓裙闰恼混悦赋剁渣血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,（2）评价疗效网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维生素B12或叶酸治疗23d后，网织红细胞计数值开始上升，710d达到最高(10%左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白开始升高。骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢复造血功能，RMI升高，网织红细胞计数值上升。,掏秃咯溉认重奉烦柱谗覆路锭匙订碾虹靶泄诵脖海倾签发勾她我跋纯踪阂血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,（3）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。,直妓朽库褐遥帐侍隆刊揖春淄每堵娜斟睬慨谎扔宅寸亲演引躬兽播媒阀碰血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数血沉测定、HCT测定及贫血分类、Ret计数,
