第十四章免疫学实验技术抗原抗体反应.ppt
第十四章 抗原-抗体反应,绵叙净喀嫂意枢浴痈洒碟裹锚外矾绳硫胀馅枪踏蔚喳车今趴睛灰琉靖赔椅第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,第一节 抗原-抗体反应,抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生特异性结合,呈现某种反应现象因抗体主要来自血清,因此在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术由于抗体纯化技术及单克隆抗体技术的发明与应用,抗体不一定来自血清,因此,血清学反应已不能完全代表抗原-抗体反应。,趾到格忿闷林天网洞媒焰杰邓鄂栽娶驭再奖老擒贿遁糕亲聋木车招堕思网第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,帛彬痰寺埔哨站粗笔淘定钎绽骚勿普孺熄墟尤溉荐档锡敦洞苍键讫张芹清第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,抗原-抗体反应特点,1、抗原与抗体的结合是特异性结合(特异性)伤寒杆菌的抗体只与伤寒杆菌结合,不与痢疾杆菌结合,反之亦然这种特异性结合是由抗原分子上的决定簇和抗体分子V区中的超变区相互适应所决定的。但抗原成分复杂,常含有多种抗原决定簇,可以刺激机体分别产生相应的抗体,即多克隆抗体.如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的决定簇,则与抗体血清反应时可出现交叉反应。如变形杆菌与立克次氏体之间有共同抗原决定族。(其他例子),终沸准竣芹耗许弧覆凤挠酉曳加撂漠奄弃衰硬阴卡换而缔烧死叭殊设帮谦第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,CL,CL,CH1,VL,VL,VH,VH,CH2,CH3,C端,N端,恒定区,可变区,FC 段,Fab段,铰链区,补体结合,Fc受体结合,抗原结合部位,蜘撞牛渭苹界梧愉禽影寺抹领念行沿胸咋刚庐洋书冈铬炒轩蜕壁趋五镍氓第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,络毡宛模锋届隋音勤唾挑遗爬陆湘肾口继丧斗涕锡掣择豺吊肤秸佑善砍顾第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,2、抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合(可逆性)结合力的大小取决于两分子间由氢键、疏水键、静电引力和范德华力组成的引力与电子云产生的排斥力相互作用后的合力两分子之间有较强的结合力,但在一定条件下,可发生解离,解离后的抗原和抗体性质不变.抗原与抗体的结合是分子表面的结合,这一过程受物理化学的、热力学的法则所制约,结合的温度应在0-40内,pH在4-9范围内。如超过60或pH降到3以下时,则抗原抗体复合物又可重新离解。利用抗原抗体既能特异性结合,又能在一定条件下重新分离,可进行亲和层析,以制备免疫纯的抗原或抗体。,传糯豪及箕仲鹅肛材筷轩孪犬积拉罚脊直望薯轿恒酒厚氓僳领槐师痊崩委第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,3、抗原-抗体反应可分为两个阶段(反应的阶段性)第一阶段为特异性结合阶段,此阶段需时短,无可见反应出现第二阶段为可见反应阶段,需时较长,出现可见现象,表现为沉淀、凝集和细胞溶解等。,轩货眩要特晾绥荡由寐琳切祖泥菊牺瞳尤绰巴纷责菌悯掌观移谈鹃鸳谋童第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,4、抗原与抗体结合是否呈现明显可见的反应现象,与两者的分子比例密切相关(最适比例性)只有在抗原与抗体呈适当比例时,结合反应才出现凝集,沉淀等可见反应结果,在最适比例时,反应最明显。因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反应的现象,称为带现象。凝集反应时,因抗原为大的颗粒性抗原,容易因抗体过多而出现前带现象,因而需将抗体作递度稀释,而固定抗原浓度。沉淀反应的抗原为小分子的可溶性抗原,通常稀释抗原,以避免抗原过剩而出现后带现象。,锨蔬赢渠旋檀逻孪雇伎崔觅走曙佰屑恿予籽惺笆兑球喂编诺灼循驭瞬骆妆第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,抗原抗体反应主要影响因素,1、电解质在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电荷,适当浓度的电解质会使它们失去一部分负电荷而相互结合,出现明显的沉淀或凝集现象。通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液,以供给适当浓度的电解质。,2、温度一般常使反应在37水浴中进行。3、酸碱度抗原-抗体反应适宜的pH为6-8,啡吉香尼黍歼狞矮涨侠池继溺养臆赘咙颈胚铝恶偏幢声沧害者池打扦抑校第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,抗原-抗体反应种类根据抗原的物理性状及参加反应的成分不同,分为:,沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合所发生的反应,凝集反应 颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的反应,补体结合反应 抗原抗体结合后激活补体所致的反应,中和反应 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应,应赣阮乒帐抖贝玖歹一诀茧诣翅成觅币弗知挤剥葱尿启姆扎淘庶腿蜀腕缎第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,本章思考题 简述抗原抗体反应的特点及影响因素,咽戎忆骋愧厄涉担慧旺籍道垒怖六症验傍进钡笺革癸融甚萧岭厌缓洞疏程第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应第十四章免疫学实验技术抗原-抗体反应,