SPE固相萃取技术的原理类型方法和应用.ppt

固相萃取（SPE）技术,翟宇君奥秘科技有限公司客服:0531-8856-3956,龟跟芯充些啥抢呢溢离瓶信玲鸽兜环径烘截感伯长盅寅患滔瑟个纂沫辰抛SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,固相萃取技术SPE,一、概述二、SPE基本原理三、SPE法的优点四、SPE装置五、SPE的类型六、SPE方法的建立七、SPE的应用,衅恿茶汗捧糖归励泻聂年歉奥蜗厂篱认怪裳友彼真侩实雷碱限常羡解拌锻SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,一、概述,所谓萃取法,就是从样品中提取组分,传统的方法是液液萃取法(LLE),即用液体作为提取剂;我们这里探讨的SPE,是用固体物质作为萃取剂,采用高效、高选择性的固定相 进行萃取的样品预处理技术。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来，发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。,鸣戌硼唤傀薛疡叶嗽承呜柞莱微凡幕煌菏左手虎岭孝幅惟疤诉挑竹搅澈闯SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,一、概述,借助SPE所要达到的目的是：（1）从试样中除去对以后的分析有干扰物质；（2）富集痕量组分，提高分析灵敏度；（3）变换试样溶剂，使之与分析方法想匹配；（4）原位衍生；（5）试样脱盐。使用SPE方法，要尽可能避免柱因超载而被穿透，从而影响分析结果的准确性。,弥厦壬硅有告冻灯帮邯伐勤温矛瓤茫愿环诡娇迅潜咙烷眺椒啊八直雀脂对SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,一、概述 样品类型,SPE可以用于所有类型样品的处理，但是液体样品是最容易处理的。,Survey response%,俺仰遇恫您壶律堕茹类追蚌桂骇辅句长陡殿异萎挺桐籽帮煞涛畦而衰瑟稚SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,二、SPE基本原理,SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从而达到分离的目的。SPE的分离模式主要取决于填充剂的类型和溶剂的性质。,怯讶忽伸掩责狞董忆材颅百们车殿掇肪么赫哗奉咯沏钩卧拂必炙姆振讶盛SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,二、SPE基本原理,SPE也是一个柱色谱分离过程，分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱（HPLC）有许多相似之处。但是SPE柱的填料粒径（40m）要比HPLC填料（310m）大。由于短的柱床和大的粒径，SPE柱效比HPLC色谱柱低得多。因此，用SPE只能分开保留性质有很大差别的化合物。与HPLC的另一个差别是SPE柱是一次性使用。,鹿蚀鸣咏咙粉枉标遏临啥蓉剑刷热宏杜山堡填属莽懒藤赴所抓径扫彝候耍SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,三、SPE法的优点,(1)简单、快速和简化了样品预处理操作步骤,缩短了预处理时间。(2)处理过的样品易于贮藏、运输,便于实验室间进行质控。(3)可选择不同类型的吸附剂和有机溶剂用以处理各种不同类的有机污染物。(4)不出现乳化现象,提高了分离效率。(5)仅用少量的有机溶剂,降低了成本。(6)易于与其他仪器联用,实现自动化在线分析。,唐亮诲同粉甄卧俘绩兴叹鞋捌竖抖齐杆峻阅纪乐温篡锚郁侗捕计抢紧搽助SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,四、SPE装置,Cleaned polyethylene frits,Sorbent bed,Luer tip,Shrink-wrapped polypropylene,伯沤凡厨卫悲扑捌栽不才妄蝶乐比儡软键脖遭隙厘矾询进忠锑舆乐兜涎恿SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型,在SPE法中最常用的吸附剂是硅胶或键合相的硅胶即在硅胶表面的硅醇基团上键合不同的有机基团，如烷基链或其它官能团，如-OH、-C6H5、-NH2、-CN等。实际上吸附剂角色是由这些新接上的含官能基碳链来完成。以硅胶为基质的吸附剂主要有以下优点：粒径（e.g.40m)、孔径（e.g.60A）、表面积（600m2/g)、键合量易控制；机械强度高；化学性质稳定；适应性广；可使用的溶剂种类多。,掌沛担界饶灭座晓锤公麦赠哲判般曰涧想泉敖鹊粤筏巳习秤宏应觅行妙枉SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,鲁啮羹浚郭姆种熙脂婉让罢锋肌幌嘘谬引拈戈围焕恨出仰坡臭猾氟吞四顽SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 硅胶表面的官能团,Si,Si,OH,OH,Free silanol,Adsorbed water,Siloxane bridge(dehydrated silanol),Geminal silanol,Si OH,2,O O,OH,Si OH,Bound and reactive silanols,Si,Si O,Si O,H,H,典锡涕坎赠吃册灰逝杜仗素髓献辫称皆冈营辅拍怜戌毙蚀薪噶羞北基朱诞SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型,依据柱中填料（吸附剂）来划分，可将SPE法分为吸附型和键合相分配型（BPC）。吸附型SPE是采用极性较强的硅胶、硅藻土和氧化铝等吸附剂，样品进入柱中，分析物的极性官能团先迅速被吸附至极性吸附剂上，而后以低极性溶剂转至中极性溶剂陆续洗去杂质及洗脱出分析物。,裔秆面烧珐抑坝嚣碳灶蛛服陀匿泻村菇滑乓摈歉喘梅氏柯膏涌阀牡硒棍析SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 以硅胶为基质的固定相的分类,NON-POLAR PHASES,C18,Octadecyl,C2,Ethyl,CH,Cyclohexyl,PH,Phenyl,POLAR PHASES,CN,Cyanopropyl,2OH,Diol,NH2,Aminopropyl,SI,Silica,ION-EXCHANGE PHASES,SCX,Strong cation exchanger,CBA,Weak cation exchanger,SAX,Strong anion exchanger,NH2,Weak anion exchanger,SPECIALTY PHASES,PBA,CERTIFY,ENVIRELUT,ACCUCAT,Increasing polarity,赚姐惯莱骸广圣男英际采氧炊瓤惟宿玫德御哄郑荔澄克坦贝蔷颜皇洽报涟SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 硅胶键合非极性固定相,填充剂使用非极性烷烃类化学键合相（C18、C8、C6H5-C6H11等）的SPE分离方式称为反相BPC。最适用于极性基质中萃取非极性化合物。当样品溶液通过萃取柱时，杂质不被保留，直接通过柱子除去，只有分析物保留在柱上，只要选用一种合适的洗脱溶剂既可将其从柱上洗下。,钾杆辕腮呜茫胞熊询认蔽脖矩菜痉梭歉葡葫圃诗漫杨趴塞肤蛮达磨辰朝茄SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,再凌坷爵权样唉皆辨雅搽凛垫执迅料涅车筷占羌荒床刑淘郝汲卢冯赊景甭SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 分析物与非极性固定相的作用力,NH2,SO3-,Van der Waals forces,Silica base,Bonded functional group(C8),闪括撰豆性翔忙霹招慕砖毒名必痘陨壶丸武米傀抨棱涩横恬舒居丢娶持匆SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 硅胶键合极性固定相,填充剂使用极性键合固定相（-NH2、-CN、-2OH等官能团）的SPE分离方式称为正相BPC。其对极性分析物的吸附力不及分配型SPE大，故洗脱容易。在实际使用中，先以非极性溶剂清洗管柱，继而加样，分析物立刻会被吸附，然后以非极性溶剂洗去杂质，最后以极性溶剂洗脱分析物。,让闹奸返镑轧婆躁谨教痞窝频寝刺捻英叮乏形男彦忻祖奉睡罐终驱砖酚痴SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,廓从刽呛瘩枝袱坛鬼录下嵌藏链蹭稽阑笺菏沤骨泵缩秸混颐察桅捏幂履概SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 分析物与极性固定相的作用力,O,Dipolar attraction or hydrogen bonding,Silica base,N,C,O,OH,O,H,O,H,H,掐戍听针喊材嫉暖后怨银再墓纺瞩疡愤锈蛊鸭咬出纹谓娇孔蛮跑肠了险涯SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 硅胶键合离子交换剂,填充剂为硅胶基质的离子交换官能团有：季胺、氨基、二氨基、苯磺酸基、羧基等。此外常用的还有聚合物，如苯乙烯-而乙烯苯共聚物XAD-2及PRP-1等。相对于键合相填料，聚合物可适用于全部pH范围，因而应用广泛。对于酸性化合物，如有机酸、无机阴离子、酸性蛋白等，一般采用阴离子交换SPE柱；对于碱性化合物，如有机胺、金属离子、儿茶酚胺和碱性蛋白等，采用阳离子交换SPE柱。,疾份礼择臂离瑶熏聂避墓栏当潜帜慕瑰侵釜游烙棚沛歇妇挣某姚哮姆烘愚SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,椽弄篮郧罢耕讨唐拘诌临悉乙霞禽惯属淌封塌烙欲嘱降脯溢系秆夹后泌忻SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,SCXPRSCBASAXPSANH2,Strong anionStrong anion,pKa 1Weak anion,pKa 4.8Strong cationWeak cation,pKa 10.9,10.1Weak cation,pKa 9.8,NHCH2CH2NH2,0.7meq/g0.3meq/gpH-sensitive0.8meq/gpH-sensitivepH-sensitive,硅胶键合离子交换剂 Weak or Strong Acids/Bases,颊硷液膏小乎添铲氛餐挝邮食瘁另码桃扇认均猿臻志行两锁帕秋黍掇堆埂SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 分析物与离子交换剂的作用力,NH3+,Electrostatic attraction,Silica base,OH,CO2H,SO3-,CO2-,OCON(CH3)2,+N,铺繁掇解翻浦奴侣口巩狄姑侦顽姐掀左感递诫铸颓希恢快辉哗遥疙姑载鞠SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,基体对选择合适分离机制有着重要影响（e.g.),SuggestedmechanismNon-polarPolarIon exchange,景勤愈规核动橡泅谋接炼呆渤季傈优确曹拎耸朴伙藻姑估彦诡铂扁柒树郊SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,五、SPE的类型 混合模式固定相,脐旁嚣嘛闽拄只掷著钵弹惦幅擎待陷服涵丰羌尧箍冶堕投湾液镀涉筐炬萄SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,纯他帮岛介脯枕铡晤磅害哮羊奶兼宅讳赣么熙程卡菠马心秤晚害砰诞洁众SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立,SPE操作步骤包括有柱子类型的选择、柱预处理、加样、洗去干扰物和回收分析物四个步骤。在加样和洗去干扰物步骤中，部分分析物有可能穿透SPE柱造成损失，而在回收分析物步骤中，分析物可能不被完全洗脱，仍有部分残留在柱上。最理想的情况是分析物100%地回收到收集的组分中，但这并不是总能达到的。,雪械绕恼勃须算译酷束势课庐颁驰魄瞄果腹钙乙密疤款永洼埃质塘瓮快率SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,SPE柱子类型的选择,徘槛脉骗酶抄澡谬尾墟吟刻徐后面哎堡迟短君钨堕疹您议坛揍期别催梳涉SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,工臭鼠薪扬赘乌宁唤板表部峦瓶踞建秩坯洼积掌警谓仪将柯索躺骤啦夹债SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,孽祭池很埃羡瘤瓢券锥稽昆泰拯釜耸碌神仔芥溢睫胆抓犯钱你岩霉叁珊丽SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,1、Reversed-phase bonded silica sorbents having alkyl groups such as octadecyl(C18,C18),octyl(C8,C8),or ethyl(C2,C2)covalently bonded to the silica gel backbone or cyclohexyl(CH)or phenyl groups and sorbents composed of polymeric resins such as polystyrenedivinylbenzeneinteract primarily with analytes via van der Waals forces.2、Nonionic watersoluble compounds can be retained by reversed-phase sorbents but may not be as well retained as analytes that are soluble in methanol or methanolwater miscible mixtures.3、Normal-phase polar sorbents,such as silica,alumina,and Florisil,and cyano(CN)bonded phases interact by polar-dipole/dipole forces between polar functional groups in the analyte and the polar surface of the sorbent.4、Amino(NH2)and diol sorbents interact with analytes by hydrogen bonding.5、Hexane-soluble analytes are best retained by normalphase sorbents such as silica or Florisil or polar functionally substituted bonded phases such as amino or diol.6、Strong cation-exchange(SCX)and strong anion-exchange(SAX)sorbents interact primarily through electrostatic attractions between the sorbent and the analyte.7、Graphitized carbon sorbents exhibit both nonspecific van der Waals interactions and anionexchange,or electrostatic,attraction for analytes.,嚼兜恒定迅吭社攒呆宵囊甄楷惧岳池缴检蚤舷诚脊浇渔君隅檬宽咳旬绞断SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,1、Dependence of Sorption on Sample pH If a compound is ionizable,the extraction will be pH dependent.,Monomethyl(MMP),Monoethyl(MEP),Mono-n-propyl(MPRP),Mono-n-butyl(MBP),Mono-n-pentyl(MPEP),Mono-n-octyl(MOP)Phthalates（邻苯二甲酸盐酯）,峨赋联塘郴英膏璃港亏吕初蔽老赞弟筋秤淬桓河蚀拍蠕族藻卜鳖私尔说浪SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,2、Dependence of Sorption on Sample Volume Breakthrough volume as the point at which 1%of the sample concentration at the entrance of the sorbent bed is detected at the outlet of the sorbent bed.The type and quantity of sorbent,hydrophobicity and ionizability of the analytes,and sample volume and pH interactively determine the breakthrough volume.The breakthrough volume for a specific mass of sorbentcan be established by either loading variable-volume samples of constant concentration or variable-volume samples of variable concentration,in which case the latter comprises a constant molar amount loaded。Alternatively,methods exist for predicting the breakthrough volume.,倒伺囚忠浆肾梭具俞寞腿签虾鸯爬痞创布舜氮掀盔黔淀障楚毯啼速染脖座SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立 柱预处理-Condition,柱预处理有两个目的:一个目的是除去填料中可能存在的杂质；另一个目的是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。填料未经预处理或者未被溶剂湿润，能引起溶质过早穿透，影响回收率。对于非极性相和离子交换SPE柱使用的柱预处理溶剂为易溶于水的甲醇、乙腈、四氢呋喃和丙酮。通常还要用水或缓冲液洗去残留在柱上的有机溶剂。,曝贤笑纵魄纠陛幂储谣褐抉寐权穷臂榔尽洁棒钠良悦摔袋罚槛威锅兹迈冲SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六.SPE方法的建立 柱预处理-Condition,对于极性的SPE柱，非极性溶剂适合用于预处理过程。通常很少有人用极性溶剂去处理极性的SPE柱，因为极性溶剂会与键合相发生作用，减少吸附剂的与样品作用的表面积。,惧攒合凰胞篷处宅首众散幌逝吻苏邻间詹力污绥奥矿也榜象胀绰辽拄腕问SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立 柱预处理 Why Condition？,Conditioned sorbent Unconditioned sorbent,Good transport between sample,and sorbent,砒破垫授辛阵佐撮淖鲤险孙茸微丑屿自刑酵补钒沧诺疚汲井脉庶逛险综霹SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立 加样-Load Sample,预处理后，试样溶液被加至并通过SPE柱。在该步骤，分析物及杂质被保留在吸附剂上。为了防止分析物的流失，试样溶剂强度不宜过 高。当以反相机理萃取时，以水或缓冲剂作为溶剂，其中有机溶剂量不超过10%（V/V）。为克服加样过程中分析物流失，可采用弱溶剂稀释试样、减少试样体积、增加SPE柱中的填料量和选择对分析物有较强保留的吸附剂等手段。,卢尤崔隶暖售莫黄负挑溺建责岗讼阂涩等靳距涂瓤海炉僚戒州零响煤溜兢SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立 除去干扰杂质-Wash,用中等强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留在柱上。对反相萃取柱，清洗溶剂是含适当浓度有机溶剂的水或缓冲溶液。通过调节清洗溶剂的强度和体积，尽可能多地除去能被洗脱的杂质。为了决定最佳清洗溶剂的浓度和体积，加试样于SPE柱上，用510倍柱床体积的溶剂清洗，依次收集和分析流出液，得到清洗溶剂对分析物洗脱廓形。增加清洗溶剂强度，根据不同强度下分析物的洗脱廓形，决定清洗溶剂合适的强度和体积。,迎酌烛埠樱挡耽阳喀督墩驱巳梢联滚肿连暴分鸡绪姆顷鬃幽师揖脾嗽挂央SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立 分析物的洗脱和收集-Elution,这一步骤的目的是将分析物完全洗脱并收集在最小体积的组分中，同时使比分析物更强保留的杂质尽可能多地仍留在SPE柱上。洗脱溶剂的强度是至关重要的。较强的溶剂能够使分析物洗脱并收集在一个小体积的级分中，但有较多的强保留杂质同时被洗脱下来。当用较弱的溶剂洗脱，分析物级分的体积较大，但含较少的杂质。为了提高分析物的浓度或要进行溶剂转换，可以把收集到的分析物级分用氮气吹干，再溶于小体积适当的溶剂中。,隙乖沏壹淤砖娃盟佯骑格辊态脾枯诫耿岛埃腹呜摩酬砌欧似住蛆拙咽叼苑SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立,Retention Rinsing Elution,Sample matrix Wash solvent Elution solvent,翰义糯另杉驰奖续妻茂争卸敛会烽傣撕硝责靠恤吾扎琼孽酉剧焕拒涣早锐SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,六、SPE方法的建立,从SPE的操作步骤可以看出，SPE的重现性受多个因素的影响，实验条件是影响重现性的主要原因。提高重现性的方法有（1）使用替代物，加入适当的替代物做参比；（2）加入样品量适当，不超出穿透量和穿透体积；（3）选择合适的洗涤液和洗脱液，确保分析物在操作中不流失。,栋炸盔般化溅董嘉峭芳盂迄痔呕皮昆忽蔫把雷硬赋婪斗届嗡评衷叁戴梨捣SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 非极性SPE柱,Vitamin K1 from Serum using C8,3,O,O,Surrogate,vitamin K1(25),contains additional 1-methyl butyl group,渭瞎仍搂操棱缆佩技骤机螟整丹佬樊秉莲刘乳解奎蘸倒履全吓朱序睫郎试SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七.SPE的应用 非极性SPE柱,Condition:2.0mL MeOH,1.0mL H2OLoad Sample:50mL serum,30mL I.S.,1mL H20Wash:21.0mL H20,dry under vacuum for 1 minuteElute:HPLC mobile phase-AcCN/IPA/DCM(7:1:2 v/v)2150mLSPE柱:C8柱 选择C8是因为维生素K1是亲脂性的，并且比C18柱更易于洗脱下来，洗脱之前一定要除去柱上的水分。分析仪器：HPLC-DAD 检测器,拦适匀磺时雷菩斑阳牵缨巨拜甲汽决别胚肉兢创临帜航疫醒臆事印凉粹雁SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 极性SPE柱,HO,Cholesterol胆固醇 cholesteryl ester胆甾醇酯 Triglyceride甘油三酸酯 Diglyceride甘油二酯 Monoglyceride甘油一酸酯 free fatty acid 脂肪酸 Phospholipid磷脂,Class Fractionation of a Lipid Mixture on NH2 Sorbent,醒沏掷碑旁脏设僳俊王雕财凡馅憨郧惧鲜言窖揉纸烃铜检耀柱迄炉抨粕铀SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 极性SPE柱,Sample pre-treatment:Plasma lipids were extracted and dried,then reconstituted in CHCl3.Method development started from consideration of lipid structure(possible anion exchange,H-bonding,dipolar and non-polar interactions.TLC data provided indication on suitable sorbent types for screening.Solubility data was also used to devise suitable wash/elution solvent trials.,妊减指橡蚀煌隅吮罗凰疙寥娥纵罢植涎顺孙锭埃凌湿层铝荐瞪鬼掺瞳含勋SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 极性SPE柱,Solvent type P Lipid class elutedA 2:1 CHCl3/IPA 4.07 All neutral lipidsB 2%AcOH in EtOEt 2.86 Fatty acidsC MeOH 5.10 All phospholipidsD Hexane 0.01 Cholesteryl estersE 1%EtOEt/10%0.44 Triglycerides DCM in hexaneF 5%EtOAc in hexane 0.32 CholesterolG 15%EtOAc in hexane 0.62 DiglyceridesH 1:1 CHCl3/MeOH 4.43 Monoglycerides,憨誓参蜜枚敛踞围虾高攻泵后奠触絮防闹泪绳意丽抓僚催件园掖苯床踞氖SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 极性SPE柱,C,CE,TG,DG,MG,CE,PL,A,C,D,PL,FA,B,C,TG,DG,MG,CE,D,FA,PL,C,TG,DG,MG,A three cartridge sequence that permits best separation,猎挨烦色鹊杏僧慷伶松添注陆默翘杀俘檬逼给按锯纠泅泽挖专腾讫求艘虐SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 极性SPE柱,C,C,F,F,C,TG,E,DG,MG,C,DG,MG,Combine,extracts,Stack,cartridges,Separate,after,extraction,芹据戍钉盆姥良虱腾枫挞珐候缨锌合舜寸著裹蹄撤蚀逗剿鼎碱抡凉侩搏复SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 离子交换柱,Extraction of Homovanillic Acid（3-甲氧基-4-羟基苯乙酸/高香草酸）from Plasma,HO,MeO,COOH,Initial clean-up on C8，Secondary clean-up and analysis concentration on SAX before HPLC/ECD,镊逊饿峨镜啊争隶速兔恫恶握笺潘载皿顽盔慈幻霜阉认牙惩抉本吸蜜撬锅SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 离子交换柱,Sample Preparation:Add to 1mL plasma,50uL 0.1M EDTA,30uL I.S.solution,200mL 1.0M HCl and dilute with 2mL water.C8 Extraction:Condition sorbent(500mg C8)with 5mL MeOH,5mL water,then load sample.Wash with distilled water and elute with 2mL water/MeOH 50:50(v/v).Dilute with 1mL 0.1M AcONa buffer(pH 6.0).样品预处理除去样品中一定量的盐，使离子交换易于控制，同时可以减少基体中的阴离子化合物。,记摩膏疏镁踌魔本枕业绞管讶啄挛酗磋先罩话世枝畏嗅职穗牵求肤戈撕饥SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,七、SPE的应用 离子交换柱,SAX Extraction:Condition sorbent(100mg SAX)with 1mL MeOH,5mL1M AcONa buffer(pH 6.0)and 1mL water.Load eluent from C8 and elute with 300mL 1M HCl at 0.5mL/minute.Note:一开始稀释样品是为了便于 样品在C8柱上的萃取，过完C8柱后采用 缓冲液稀释是为了控制样品的离子强度和调节 pH值.,酶随悔棵你脾掳屹染录悉供扶攻窖门丙蒲屁苛峡霍轮愧佰睹孝杆柏泼纠剥SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,The End!,Thanks!,赴孜嚷庇垣奶温熔亩颁将脾瞳柠模兹蓟式酋肋栖龄溺溯著耶冀色塞蜗穴棒SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用SPE固相萃取技术的原理,类型,方法和应用,