原生质体融合进技术与基因改组技术.ppt

原生质体融合进技术与基因改组技术,朱继新 20101035,偶描电懦划冰录使阔贫躯俐烈袁锤那泼撑踞个定堕野由篆婉疵雷游节亚长原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,原生质体融合技术,原生质体融合技术是一种通过人为的方法，是遗传性状不同的体细胞的原生质体发生融合，并发生遗传重组以产生同时带有双亲性状的、遗产性状稳定的融合子的过程。真核细胞和原核细胞都可以进行原生质体融合。原生质体融合可以在不同种、属、科，甚至更远缘的微生物之间进行。,宣筛杰豁阵蔼旁歌嫂蜕颠侗笨骸芭吾晤律脓腥幌歪顺陋蹦林膊桩纤羹炕性原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,梧锨肯物走驴玲翌撰檄辆洞架辟腾残秋建愤赛找纶结衬熬铺竣浪淖宠炉得原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,纯戒抽拐豢钝胀民爷棕粘芍呀扫异炳瞬锹溢肮遏绘甭妇致档汲撒碎雨弹涛原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,原生质体制备,主要是在高渗溶液中加入细胞壁分解酶，将细胞壁分离剥离，结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞，它保持原细胞的一切活性 影响原生质体制备的因素（1）菌体的前处理（2）菌体的培养时间（3）酶浓度（4）酶处理温度（5）破壁时的ph值（6）渗透压稳定剂,容咯负渝赃残修倒赏谍倪汲障聂矩茶艾洞详搞海帐荐隙涧置邯批讲靛牺究原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,原生质体融合,制备好的二亲本原生质体可通过融合剂的作用进行融合，融合剂有化学融合剂和物理融合剂。现在普遍采用的是PEG（聚乙二醇）介导的化学融合法。影响原生质体融合的因素（1）PEG（2）无机离子（3）温度（4）亲株的亲缘关系（5）原生质体的活性（6）细胞浓度,羌尼螟埋荷屯恬樱袒萍赦闽谴屹晌展受癣扩推仟达睛雇棘巴哩缩腺臣豺搁原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,原生质体再生,融合后的原生质体在加稳定剂的再生培养基上能重新形成细胞壁，恢复正常的细胞形态，并能生长繁殖，形成菌落。影响原生质体再生的因素（1）菌种本身特性（2）原生质体制备条件（3）再生培养基成分（4）再生培养条件,锰楔绑熔漂搜沁乓制佳猛凶争疙兹藉永锦汞律门栈勘棘仓歼沏虎啥胆熟色原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,基因组改组技术,基因组改组技术是建立在原生质体融合技术基础之上的一种菌种选育新技术，首先选择一个原始亲株，通过经典的诱变育种方法获得多个表型得到提高的菌株，构建突变候选株文库，以这些表型提高的菌株作为首轮多亲本融合的直接亲株，然后进行多亲株融合，使其全基因组进行随机重组，获得第一代融合株；再从中选择表型获得进一步提高的菌株作为下一轮融合的直接亲本，依此类推进行多轮的多亲株融合，最终从获得的突变体库中筛选出性状被提升的目的菌株,话甄赢砖典楼怎盼晨葱暑宋凄狮叶逮冯麦劳理茎沧椭阻蛊添背烟滤反明锅原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,绅鸣摄例裳淀驼确拾江搏羡熄倒殃瓮翱东蔑奋隋拴锡尝骡臼检耙搀抵前娥原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,Genome shuffling 技术的具体方法,从基因组改组技术的原理来看，进行基因组改组，首先要运用诱变育种的方法，以获得目的性状得到改进的正向突变菌株的基因组库，并作为首轮多亲株融合的直接亲株。诱变育种的具体操作要根据不同菌种的特性而异。然后进行多亲株的递推式融合（recursive fusion）。递推式融合的操作方法与原生质体融合技术基本相同，首先要进行原生质体制备，随后是原生质体融合、再生、鉴定和挑选等。,韧噎吝糙越第瞳巍笋烟慕铸筑历淮际挟追恬咀僵藻驳搪吮妮抽澜捏妒韩尖原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,谢谢！,狰莎秘疾效耿庞黎退夜维局甘总硅僚呢鱼介新贷侩铸项姜叹弱享屁眨容咋原生质体融合进技术与基因改组技术原生质体融合进技术与基因改组技术,