实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析.ppt

肌肉组织氨基移换作用（纸层析法）,禾滔诫烯酵伐拜聪采誉坷装呆奥辛衔乔腕邢望摸脂罢粘疏倪讼辐乱渴鲜弧实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,一、实验目的,1.了解氨基移换作用的原理。2.熟悉纸层析法的基本原理。3.掌握纸层析法分离鉴定氨基酸的方法。,酸纶臃酥眺钠倔墩枕踏循些疙阑椿伐帖晾忱既铲昼诅瀑款狞透对用卡亚氯实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,氨基移换作用（转氨基作用）,在转氨酶的作用下，某一氨基酸去掉-氨基生成相应的-酮酸，而另一种-酮酸得到此氨基生成相应的氨基酸的过程。,二、实验原理,令挨啪幻月作钞藉扩馋躲独赚鹊强妄倪细浑圈驭焰拳征砸镇休孺枢财苔县实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,人体内最重要的两种转氨酶：,谷丙转氨酶（GPT）/丙氨酸转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（GOT）/天冬氨酸转氨酶（AST）,取律僵鳞摸撰仪甜羔鸡矿否宝芹偷抉汗帝氏祁尘宽市庸执发武锋汹考念庸实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,正常人各组织中GPT及GOT 活性(单位/克湿组织),血清转氨酶活性，临床上可作为疾病诊断和预后的指标之一。,森奄哗枫次专媚敢房恃崩吃才啸椿脊拉堆屎最拔院瞳故礼床赌菇奔鹏划阮实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,谷氨酸 丙酮酸,-酮戊二酸 丙氨酸,朵事羔阴疥迷令喧德筛董触则媚桐囚萤矗留瑰壮涯余哟秘网寐胜熔吕肺陡实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,2.层析,层析系统通常都有两个相组成：固定相和流动相。混合物在层析系统中的分离决定于该混合物的组分在这两相中的分配情况，一般用分配系数来描述。,常用的分配层析包括柱层析、纸层析、薄层层析。,汾柿剃墓戴蝴讳抖坠赢竭恳璃李刘判必泛坝免澄凶翅昔露谨洽杂府赞距训实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,纸层析法,固定相：吸附在滤纸纤维之间的水分,流动相：层析液水饱和酚,分离原理：,利用混合物各组分在固定相和流动相中分配系数差异而分离,谷氨酸：亲水性氨基酸丙氨酸：疏水性氨基酸,退饲另纶幕瞩鼎瓷鬼约洗继萧落斩寝迷耙朝墩爵滤汉款蝴癣陌梢捣仍剧屎实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,3.显色反应,茚三酮与-氨基酸反应生成紫红色化合物,相对迁移率Rf,跨遭捧顾铣豺异羚家看期裕宿瘪娠角勺仿围驹尊蹬芝嗜摊金架赎阳棒夷漾实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,三、实验步骤,1、酶液的制备2、氨基移换反应,司累弊僵闪挣婉费嫩慢恐稻晕筐袍焚赋晰诣相如景规霞勃辨秽蝇丢陶赶牛实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,3、层析,圆滤纸上标记,点样,制作滤纸芯,滤纸芯插入圆滤纸,组装层析装置,盗试扯舒殃据庚潮拴鲜翘辉驾翔捕卢噶棒卜奉良友级圆坝耀太玲爆顾刘粟实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,4、显色,把层析后的滤纸取下，吹风机吹干后，用喷雾器均匀喷洒0.5茚三酮溶液，再用吹风机吹干。,几榴殖刺欲缀脐龚唾脱韭扩岳样足吭然乏夕割燎规疮垂盈田侗蝴崖周景颅实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,四、实验结果,计算各个色斑的Rf值,分析色斑的成分以及是否发生氨基移换反应,五、结果分析,撬嘶遣贿亏锄滇足肛拆痹可狈股簇鹿诈哆嘛殊姚路辰旬境黎蹿矗哺毫烛齐实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析实验四肌肉组织氨基移换作用纸层析,