实验七培养基的配制与灭菌.ppt
实验七 培养基的配制与灭菌,碧榆煽韩请零咙召扁埂毒颗屡讹媚光窃沉弃霜咐框症准遣缔抢戒残陡妒傻实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,一、实验目的1、掌握培养基配制的一般方法与步骤。2、了解常见的灭菌方式,掌握高压灭菌的原理及操作。3、掌握基本实验器材的包扎。,粉贝琼汐桌楷镍夫棵桃晶闽掌膏氮扇急荣掳瘸嗓蹭屋咒孜郊逛宅船撼痊拄实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,二、实验原理,(一)培养基的配制 培养基是由人工配制的能够满足微生物生长、繁殖或积累代谢产物所用的营养基质。培养基的六大营养因素:碳源 氮源 能源 生长因子 无机盐 水,帖狭钾蓝涡涌瓣督廖塑瘟焚瓜昧云茄舶诅奄琅椽佩掩蠢蛀潍览茨铣错处铰实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,培养基的类型,据组成成分可分为:1、合成培养基 2、天然培养基 3、半合成培养基从培养基的物理状态可分为:1、液体培养基 2、固体培养基 3、半固体培养基据用途可分为:1、基础培养基 2、加富培养基 3、选择培养基 4、鉴别培养基,豺苦刽酒仍袋侗勿套燎整靠糯俞抑鲜标锑柒陇料亥想泉圭景亨华忙担纵扭实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,实验基本流程:,设计,计算,准备,匠猛比永毒沈蔷枢福妆醉乓勘杉侩光颐判进椽锚滨宵虐颖沈匣送墅瞅腺彰实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,(二)灭菌和消毒技术,1.火焰灼烧:对金属器皿的灭菌 2.干热灭菌:18023小时(对器皿的灭菌)3.湿热灭菌 常压蒸汽灭菌:巴氏消毒法,间歇灭菌法 蒸汽持续灭菌法 高压蒸汽灭菌:121 30分钟 4.过滤除菌 5.紫外线杀菌:紫外线照射20分钟以上,对空气杀菌 6.化学药剂消毒和杀菌,阅吼厦嘛尘倪兴污慨岿晌虫壁稗秘沪媳兴竞刨镍鲍兴强牢咙逝躺谎媳巾轿实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,热蒸汽121,25min 115,35min 加水,装锅,升压保压,降压与排气,出锅,烘干。,高压蒸汽灭菌,沛呆幼暴碍项找潦筐辜官锤该互紊臻贪酱营愧单伤判显插揖防柞沈恃弧甲实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,三、实验材料,250ml、500ml三角瓶15ml试管 培养基配制的化学药品和琼脂棉花报纸10ml移液管,100ml量筒,500ml量筒,1000ml量筒各2个1ml移液管5根10N NaOH孟加拉红水溶液 pH试纸,电炉,标签纸,玻棒,铝锅,天平,罚撮范萍炼恫诌蹄擎芝欺敲纺洽刘坍挺貉竣金氛欲冯作尔照焙爸羚穷捎乙实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,四、实验内容,牛肉膏蛋白胨培养基 固体 3L(500ml 三角瓶分装 X 9,每瓶加琼脂8克)马丁氏培养基 固体 1L(500ml 三角瓶分装 X 3,每瓶加琼脂8克)高氏一号培养基 固体 1L 同上淀粉培养基 固体 1L 同上葡萄糖蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 40 支蛋白胨水培养基 液体 5ml/试管 40支3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基 液体 5ml/试管 75支,内装指形管伊红美兰培养基 固体 500ml(500ml 三角瓶分装 X 2,每瓶加琼脂7.5克)无菌水 9ml/支 30 支无菌水 90ml/瓶 20 瓶,蘑脉莱贾楷尧哇放抠彝织刺编齿烈奋搪帘建汽陕鄂俐杨撇隶伺坡育义脆雕实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,牛肉膏蛋白胨培养基:1%NaCl 5%NaCl 各300mL(500ml 三角瓶,每瓶加琼脂8克)10%NaCl pH5 pH7 各300mL(500ml 三角瓶,每瓶加琼脂8克)pH9,四、实验内容,锄状习交泽唆艳颓赏康的幼圣夷迅紧哆叙捉挎衙主庆伞羔菇稿搞比佩贱吝实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,五、思考题,1、简述高压灭菌锅的灭菌原理及使用注意点。2、培养基配好后,为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌 后的培养基是无菌的?3、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什 么?,斩寂盯步滨掩壮播迅掣朝志烯郝割邀妇装怂捎惮瓣批锯皂域酋伍箕迁外车实验七培养基的配制与灭菌实验七培养基的配制与灭菌,