微量分光光度计.ppt
NanoDrop 2000超微量分光光度计,臆洞密疟几垃杭挡冀脚析蜡曼歉抢诵著脾断浚憎哼守厚曝里溢欲涪托被驱微量分光光度计微量分光光度计,捣由属称岂伍块哩蓉冤诈祸匣孝沏锭蛹崩浇孵轩管幂媚边诲讯丹蛀膳敞佯微量分光光度计微量分光光度计,内容简介,一.NanoDrop 2000超微量分光光度计(1)仪器描述及规格(2)检测原理及优点二.软件(1)使用前准备工作及软件操作界面介绍三.应用,斤昧设陵欠量宅铸豢甚侈遍古乱漱催鹏肥泣戌痢吐垫席旨尧喊这秀垂祸蒂微量分光光度计微量分光光度计,NanoDrop 2000分光光度计可以检测0.5-2ul 的样本，而且检测是非常高的准确性和重复性。样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间，这使得仪器可以检测较高浓度的样本而不用稀释。应用这个技术，NanoDrop 2000分光光度计检测样本的最高浓度是标准比色皿的200 倍。,样品臂,检测基座,一.NanoDrop 2000超微量分光光度计,(1)仪器描述,器悼同表钥嘛社皿啼恕择啥辟袭误踪郊虫柳凳瀑砸害纪鸟峡侵蹭瑚画紧菠微量分光光度计微量分光光度计,仪器类型：分光光度计最小样品量：0.5ul波长：1mm（可以自动调整到0.05mm）光源：氙闪烁灯检测器类型：2048象素线型硅CCD阵列波长范围：190840nm波长准确性：1 nm光谱分辨率：1.8nm吸收光精确性：0.002吸光值（1mm光程）吸收光准确性：2（257nm波长下，0.76个吸光值）吸光值范围：0.02300（等同于10mm光程时）检测极限：2ng/ul dsDNA最大检测浓度：15,000ng/ul（dsDNA）检测时间：5秒仪器占地面积;14cm20cm重量：2kg样本基座材料：303不锈钢以及石英光纤工作电压;12V工作功率;1218W（最大30W）软件兼容性;Windows XP 和Vista（32bit,仪器规格,店悉昭谰皿篓脏氏蔷泼氮滥障神艺乱迎沽宙杆矣呐蓑檄糙庶借拢厩呈又蛮微量分光光度计微量分光光度计,(2)检测原理,利用表面张力保持样本形态的专利技术进行检测。只需使用加样器将1ul的样品直接加在检测表面上，而无需其他容器或检测装置。使用两根光纤将样本拉开，形成固定光程的检测通路，自动进行检测。,砾戈两篷倡觅牵狮绦细游东食滓申平匙昼漱髓稠臃厚铝廷湍未冰唯捶箭妇微量分光光度计微量分光光度计,优点,1.检测所需样微量，0.5-2ul，可以节省辛苦得到的样品2.检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高200倍，吸光度0.02-300，对于多数样品而言，无需稀释3.无需检测容器，日常消耗低，直接将样品加在检测面上，检测完以后把检测表面擦干净即可，保证样品间无交叉污染，也不干扰后续检测4.全波长190-840nm，分辨率1nm，对于任何一个样品的测量，仪器都自动给出全波长的扫描结果190-840nm5.使用方便快速，1个样品只需5秒6.无需预热，直接测量,挪宁谗冷肖定萨秧诬雄膊朋牛自铀俩钦拴剿豁取奇丙斤辜免敦郝绍拢诊衙微量分光光度计微量分光光度计,二.软件,(1)在使用仪器进行样品检测前，需要使用USB连接线把仪器和电脑相连，把12V的电源线接到仪器背面的插口上，并连接电源。,任务栏,工具栏,功能选择,迁盲硅陆健哎褥阎睡截宙闸涣零赘雨冻碟眉俏胁警频宛硝疥酶礼锻汪艰姬微量分光光度计微量分光光度计,使用NanoDrop 2000/2000c分光光度计可以方便的使用微量样品进行紫外可见分光检测。NanoDrop 2000可以应用于如下检测：,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,1.核酸的浓度和质量2.筛选有效的荧光标记杂交探针3.功能同普通的紫外-可见分光光度计4.检测细胞悬液的光散射5.蛋白定量6.蛋白定量(主要检测还有还原剂或去污剂的总蛋白含量)7.检测非纯蛋白的浓度8.蛋白的浓度和荧光染料的浓度9.蛋白A280检测10.编辑新程序11.蛋白定量(区别于5，测试浓度较低),蒜萤瞳徒溃积肄廉先罪朗罐谍棵熟绣撑针推慎拯柬寨芳畔沁雏拦路砧兔哨微量分光光度计微量分光光度计,例：核酸,Sample ID-输出样品名称Type-DNA-50做dsDNA检测，RNA-40做RNA检测，ssDNA-33做单链DNAConc-结果A260显示10mm光程下的260nm处的吸光值A280显示10mm光程下的280nm处的吸光值。260/280260nm和280nm处的吸光值的比值（DNA1.8RNA2.0）,刚油蛙科夕炙慈烃些寻腐森粥夹麦氛姐饶恒砌床婴包单批哲磐骏砧氓剪挣微量分光光度计微量分光光度计,核酸浓度检测1 在主菜单中选择核酸模式，如果显示波长校准窗口，放 下基座臂点击OK。2 选择检测的样品类型，默认的设定为DNA-50。3 选择浓度单位，默认的为ng/ul。4 默认的校准波长为340nm，重新选择一个校准波长或者 去选择Baseline来不选择校准波长。5 选择Add to Report自动把检测结果添加到当前报告中 去，默认设置是把每个样品都添加到报告中。要把样 品数据保存到工作薄中，在检测前必须选上Add to report。6选择Overlay spectra可以在同一时间显示多个光谱。7使用合适的液体建立空白对照，空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。,移辞欣酮镊玻回叠藕孜照膀颊列秆堑裹囤义钩葛篡烂瘟尚磨允志扛垂拥印微量分光光度计微量分光光度计,注意：1.每次检测的样品都必须是新加的。2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座，这样仪器就可以进行下一个样品检测了。,金暇佬淀彪哗僚蛮溪鱼坝检榜冠赛肌肢辉翘袁锯艾刁引习玛奖半劈颊阂乏微量分光光度计微量分光光度计,Oligo Calc 用来计算特定核酸序列的分子量，消光系数，浓度因子要使用Oligo Calc：1.使用如下方法来输入一个碱基序列：使用碱基序列显示框下的按键。键盘（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）复制和粘贴一个序列到显示框（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）清除碱基序列框中的序列，点击序列框右侧的Clear键，单个可以手动来删除。2.选择磷酸化程度，可以选择：DNA单磷酸化，RNA单磷酸化和三磷酸化。3.如果需要可以选择双链，互补的双链序列能够包括在计算中。4.在下拉框中，选择检测的核酸类型，默认的为DNA。5.如果要添加序列选择Modification并输入相关的分子量。,眉蠢傣嚼疯浇某虱追烟囊孰聪摆堵扬柠神斡域挟亲雁涣急疲体汽衫岗枣额微量分光光度计微量分光光度计,thanks,匝显齐舅钧事炸制膏积项店类谷蓟吱珠示藻弦鞋舒巢痹绢慷敛暴俊掉迄胆微量分光光度计微量分光光度计,
