《组织学绪论》课件.ppt
武俊芳组胚教研室 电话：,组织学与胚胎学 Histology and Embryology,课程安排,本学期：理论课48学时（组胚学38学时，胚胎学10学时）实验课20学时。大二：组织病理学实验。,必修课70%理论成绩，30%实验成绩。,Introduction,绪论,内容简介,组织学与胚胎学研究内容（掌握）常用的技术简介（熟悉）学习方法（了解）,一、组织学与胚胎学的研究内容,组织学（histology）是研究正常机体细微结构及其相关功能的科学。,借助显微镜,显微解剖学,结构和功能,内容：细胞，基本组织，器官和系统,1.细胞：结构和功能的基本单位。光镜结构 电镜结构2.组织：细胞和细胞外基质构成。4大基本组织：上皮组织、结缔组织 肌组织、神经组织3.器官和系统,分子 亚细胞细胞 组织 器官 系统,生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂,细胞器等超微结构,细胞质、细胞核等,上皮、结缔、肌组织和神经组织,肝、胃等,消化系统、呼吸系统等,人体胚胎学（human embryology）研究人个体发生、发育的规律的科学。研究从受精卵到胎儿的发育过程中复杂的结构和功能变化。,组织学与胚胎学的地位和意义,以解剖学为基础。结构是功能的基础，学习生理学的基础。学习病理学的基础。学习妇产科学等的基础。,二、常用的研究方法,（一）显微镜,光学显微镜（light microscope，LM）电子显微镜（electron microscope，EM）,光学显微镜 普通显微镜：普通光线 荧光显微镜：紫外光或蓝紫光 激光共聚焦扫描显微镜：激光电子显微镜：电子束为光源 透射电子显微镜 扫描电子显微镜,裸眼0.2mm，1mm=103m=106nm光镜放大倍数以千计，电镜放大倍数以万计,显微镜不同，所见结构大小不一种类 结构 分辨率 度量单位光镜 光镜结构 0.2m m 电镜 超微结构 0.2nm nm 分辨率：人眼分辨两点之间最小距离的能力。,普通光学显微镜,荧光显微镜,激光共聚焦扫描显微镜：激光 采用共轭聚焦原理和装置，利用计算机进行数字图像处理。对切片进行连续扫描，对各个层面的结构图像进行3维重建，解决了标本中结构相互重叠的问题。,透射电镜,扫描电镜,（二）常用标本制备 光、电镜标本技术,离体标本缺陷 变腐 柔软 大块 无色,涂 铺 磨 切,染色,扫描电镜：固定、脱水、表面喷镀金属膜,相应措施,取材固定脱水透明浸蜡-包埋-切片-染色-脱水透明封片常用染色法：苏木素伊红（HE),显示光镜结构的常用染色法,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining),简称HE染色 染料 组织 名称 化学性质 色彩 化学性质 嗜好 着色部位 苏木精 碱 蓝 酸 嗜碱性 细胞核 大量核糖体 伊红 酸 红 碱 嗜酸性 大部分成分特殊染色 如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等活体染色 台盼蓝活体注射,HE染色法,银染法：组织浸入硝酸银。亲银性；嗜银性,甲苯胺蓝染色：异染性,肥大细胞,醛复红染色，台盼蓝活体染色,透射电镜标本：取材，固定，脱水，包埋，切片，电子染色等染色：重金属盐，醋酸铀和柠檬酸铅,电子密度高电子密度低,电镜结构图,透射电镜结构图,扫描电镜结构图,三、组织化学和细胞化学技术,利用某些化学试剂与组织中某种物质发生反应，反应终产物形成可见的有色沉淀物，间接对某种组织细胞成分的进行定性、定位及定量显示。例如：糖类PAS反应（过碘酸希夫反应）脂类苏丹染色,肝糖原,小肠粘原颗粒,PAS反应阳性（过碘酸希夫反应）：紫红色,脂类苏丹染色,脂肪组织,（四）免疫组织化学（immunohistochemistry）利用抗原和抗体结合的原理，用标记的抗体检测组织中多肽和蛋白质的技术。,抗体的标记物荧光素辣根过氧化物酶 胶体金,光镜或电镜,荧光显微镜,电镜,免疫组织化学（荧光素标记）,免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）,免疫组织化学电镜像,（A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）,（五）原位杂交术（in situ hybridization)原理：根据或核苷酸碱基互补规律，用已知的被标记碱基序列（核酸探针）,与细胞内待检的或片段进行特异性结合,即杂交,通过标记物的显示，观察 待测基因的定位和定量。碱基的标记物 放射性核素：放射自显影后观察（涂感光乳胶、暗处曝光、显影、定影）非放射性：地高辛，免疫组化处理后观察,原位杂交,放射自显影术（autoradiography）利用放射性核素的可观察和显示性，研究放射性物质在组织或细胞内消长分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程的方法。将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内，有规律地间断取材、制片，放射性自显影，光镜或电镜观察。,放射自显影像(3H-TdR掺入),（六）细胞培养术（cell culture）把机体细胞在体外模拟体内条件下进行培养的技术。用于研究其代谢、增殖、分化、形态和功能变化，以及各种理化因子对活细胞的直接影响。,培养细胞的倒置显微镜图像,（七）干细胞的研究和组织工程（tissue engineering）用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。,实验中的组织工程耳,八、图像分析术（image analysis）又称形态计量术，是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量、体积和表面积等参数的技术。体视学（stereology）从组织平面图像，研究三维立体结构的学科。,图像分析仪,计算机三维重建,四、组织学的学习方法,基本知识相互联系、相互对比、分析记忆用已有的知识去理解记忆新知识结构和功能的联系结构的直观化充分发挥观察能力 借助插图、照片和图谱等，理解记忆结构立体和切面的关系,立体与切面的关系,典型结构：能反映立体结构特征的切面。,教学参考资料,图谱 彩色、黑白、电镜结构教科书 人民卫生出版社教材等专著 组织学1-2版练习题,教研室网址 http:/,理论讲授课件网上浏览方法,新医校园网主页网上教学登陆 用户名和密码均为您的学号 首次登陆后应修改您的密码组织学与胚胎学课堂讲授课件项所需学习课件在线浏览范围：本人所教授的各班同学,一、研究内容 二、学习组织学的意义 三、组织学技术简介四、学习方法,小结,下次内容,上皮组织,
