医学微生物学实验一.ppt

医学微生物学实验课件,南华大学病原学实验教学中心Etiology Experimental Teaching Center of University of South China,实验内容,一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察：1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛）2.示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做）,实验室规则,微生物学实验要求 1、微生物无处不在：故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作;2、实验材料为病原微生物，具有感染性 1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他 个人用品不得带入实验室；2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室,3、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏10元/张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。,一、显微镜的使用操作及注意事项,二、显微镜的使用,（一）观察前准备,1.显微镜拿取 2.调节通光量 使用油镜时，为使通光量最大，可采用：1）光圈开到最大；2）聚光器上升到最高；3）低倍（10）物镜下，转动凹面反光镜，使视野的光照达到最明亮 均匀。,（二）低倍镜观察,粗旋钮调节：物像出现 细旋钮调节：物像清晰,为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察？,操作要点,（三）高倍镜观察,在低倍镜转换高倍镜（40 x）适当调节细螺旋即可看到物像,忌使用粗螺旋，否则极易压碎标本甚至损坏物镜。,操作要点,注意,（四）油镜观察,1.滴油（不要抹开）2.转换为油镜头，使其浸入香柏油 3.调节细螺旋即可找到物像 油镜头须浸入油中 不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否则可压 碎玻片及损坏物镜头 光圈需开至最大 聚光器须上升至最高,注意,4.玻片处理5.镜头擦拭：限取3张擦镜纸-如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去（勿用二甲苯）-擦拭时沿一个方向，禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表,注意,二、细菌的形态和特殊结构观察,（一）细菌的基本形态,1球菌：葡萄球菌(葡萄状排列)链球菌(链状排列)脑膜炎奈瑟菌(成双排列)2杆菌：大肠杆菌、枯草杆菌等3螺形菌：霍乱弧菌等,1.荚 膜,荚膜与微荚膜概念化学成分 变异医学意义,（二）细菌的特殊结构,取材：小鼠腹腔渗出液染色法：Hiss染色放大倍数：10X100,荚膜,菌体,肺炎链球菌（示荚膜）,2.鞭 毛（Flagllum）,概念数目、位置和排列可不同鞭毛是细菌的运动器官医学意义：,变形杆菌（示鞭毛）,鞭毛,菌体,取材：纯培养物染色法：鞭毛染色放大倍数：10X100,3.芽 胞,概念形状、直径、位置随菌种而不同形成条件非细菌的繁殖体抵抗力强医学意义：,破伤风梭菌（示芽胞）,芽胞,菌体,取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100,4.菌 毛,概念在光镜下看不见，使用电镜才能观察到分类：普通菌毛和性菌毛医学意义,三、革兰氏染色法,常用染色方法 单染法：一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色；复染法：两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。,渗透性学说：两类细菌的细胞壁成分和结构差异,【原理】,【材料】,1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2.革兰染色液。,涂片：注意无菌操作 干 燥 固 定 染 色,【步骤】,初染：结晶紫染液染 lmin 水洗，甩干 媒染：卢戈氏碘液染1min 水洗，甩干 脱色：酒精脱色约30s 水洗，甩干 复染：复红染液染1min 水洗，甩干 印干 油镜观检,染色,关键步骤！,革兰阳性球菌,革兰阴性杆菌,取材：培养混合菌液放大倍数：100X10,革兰染色结果,【结果】,作 业,1、细菌特殊结构绘图2、革兰染色法的完全实验报告（实验名称、目的、材料、步骤、结果、分析、结论）,