临床PCR实验室的设计及管理体系的建立.ppt
临床PCR实验室的设计及质量管理体系的建立,卫生部临床检验中心 李金明Tel.010-58115053,临床标本的接收,通常的工作流程：标本采集 血清分离 编号 保存或检测应在四个测定区域之外的地方或区域内接收 接收的标本应收集在原始容器中在核酸提取时带入至标本制备区,理想的PCR实验室设计A,理想的PCR实验室设计B,PCR实验室设计的一般原则,各区独立注意风向因地制宜方便工作,“十六字口诀”,A,B,传递窗,传递窗,传递窗,“无基因”或“无核酸”概念的重要性！,实验室质量管理体系的建立,质量手册质量体系程序文件标准操作程序(相关记录表格),质量管理的内涵,写你所做的做你所写的记录你已做的分析你已做的,看得见的看不见的,好习惯是生产力罗马不是一天建成的(Rome was not built in a day)任何事情只要能够坚持不断去加强它，它终究会变成一种习惯。,质量体系文件的三大特性,法规性、唯一性和适用性。法规性:是指文件一旦制定完成并批准实施，就必须认真执行，按照相应的文件去完成日常检验工作，也就是前面所说的做你所写的。并且文件的修改不能随意，只能按规定的程序进行。唯一性:则是指（1）一个实验室只能有一个质量体系文件系统；（2）一项检验活动只能有唯一的操作程序；（3）一项规定只能有唯一的理解，不产生歧义；（4）只能使用文件的有效版本，无效版本在实验室的任何地方都不能使用。适用性:是指质量体系文件无统一格式；无标准文本；怎么做怎么写，切合实际，具有可操作性，不拘一格。所有文件的规定均应保证在临床实际检测工作中能完全做到。当发现文件有不适合情况时，则应立即按规定程序对文件进行修改。,怎样编写SOP？,SOP（5W和1H）,谁来做(Who)：责任人做什么(What)：适用范围何时（When）：适用范围何地（Where）：适用范围为什么做（Why）：目的如何做（How）：操作步骤,SOP等于试剂盒说明书吗？,实验室清洁SOP要点,目的:为了使实验室台面、地面和仪器设备在使用后，处于洁净和无感染性状态，以防止出现因仪器设备不洁影响检测或仪器使用寿命；防止因实验室台面、地面和仪器设备的生物传染危险性造成实验室人员感染，以及防止实验室交叉污染而出现假阳性结果等。适用范围应包括实验室地面、台面和仪器设备等的清洁。按实验室台面、地面和仪器设备分开来写各自的具体清洁方法，要具体而又有可操作性 应规定工作人员在清洁时，必须按试剂准备区标本制备区扩增(及产物分析)区方向进行，不得逆行 规定每一工作区域的清洁必须使用专用的清洁用具，不得混用 规定有潜在生物传染危险性材料溅出时的消毒清洁方法,实验台面的清洁,实验记录表格的设计,存在问题,表格种类繁多重复记录表格无实用性，用于检查的痕迹很重,记录表格设计的基本原则,信息充分简单明了临床标本的检测信息能有机联系起来融入LIS系统？,临床PCR检验流程记录表 检验日期 检验项目：扩增仪中保存文件名：使用说明：1本记录表须严格遵循试剂准备区标本制备区扩增区（产物分析区）单一流向移动，严禁逆向移动。2各项工作执行后，在相应叙述前的“”内打“”。3本记录表最后与相应的标本接收记录等归档保存于扩增区的专用文件柜内，以备查找。,实验前准备 试剂在有效期内 扩增仪、加样器和温度计在校准的有效期内 生物安全柜的滤膜在使用有效期内 消毒溶液在有效期内 冲眼器内无菌生理盐水在有效期内 离心管、带滤心吸头已经过质检合 操作者：,试剂准备区（1区）实验前：打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱温度：冷藏室（28）；冷冻室（182）实验室温度：（允许范围：1030）；相对湿度：（允许范围：30%70%）PCR试剂来源：（可直接列出有关厂家名称）批号：检验项目：本次实验用量：人份，剩余量：人份。其他有关试剂配制：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制1%含氯消毒液 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制4NaOH溶液 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升；按XXX（将有关SOP编号列出）SOP配制 毫升；其他：仪器设备使用：离心机：正常 不正常 振荡器：正常 不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面、加样器和离心机，并进行紫外照射30分钟以上。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。操作者：,标本制备区（2区）实验前：打开通风设备 实验台面清洁（水或70%酒精擦拭）冰箱（柜）温度：冷藏室（28）；冷冻室（182）实验室温度：（允许范围：1030）；相对湿度：（允许范围：30%70%）阳性室内质控物来源：浓度及批号：扩增位置：阴性室内质控物来源：批号：扩增位置：所取理的标本（对应标本接收的唯一编号）及拟扩增位置：1917252101826311192741220285132129614223071523318162432核酸提取及加样过程：按XXX（列出编号）SOP进行。仪器设备使用：生物安全柜：正常 不正常 恒温仪温度校准：离心机：正常 不正常 振荡器：正常 不正常实验后：按XXX（将有关SOP编号列出）SOP清洁实验室台面、地面及仪器设备。按XXX（将有关SOP编号列出）SOP处理实验废弃物。操作者：,分析你已做的,每次实验结果的分析 表象与真象多次实验结果的综合分析 趋势的内在含义仪器设备的使用情况分析 维护与校准周期的有效性,技术验收审核的其它内容,就有关实验室质量管理方面与具体工作有关的内容进行口试和/或笔试；已知HBV DNA和/或HCV RNA血清盘的实际检测和结果报告。,另外两个存在较多问题的档案记录,人员的技术档案：一人一个档案（包括个人基本情况；学历、学位、任职资格、培训证、上岗证、荣誉证书等的复印件；论文、著作、成果等的目录和必要的证明文件复印件；培训考核的记录等。）仪器设备的技术档案：一台仪器一个档案（包括仪器基本情况，如仪器设备名称、型号、序列号、生产厂家、购置日期、启用日期、目前放置地点、责任人等；仪器校准的记录（本次校准日期和下次应校准的日期、校准证书或数据）；维修维护的历史记录；仪器使用说明书、注册证等的复印件；合格证书；配备的小配件如保险丝、灯泡等）,谢谢！,
